雞群細菌分離鑒定及藥敏試驗案例分析

陳巨清/石家莊市牧工商 楊振燕/河北蔚縣農牧局

雞群細菌分離鑒定及藥敏試驗案例分析

陳巨清/石家莊市牧工商 楊振燕/河北蔚縣農牧局

大腸桿菌病和沙門氏菌病，是目前危害養雞業最常見的細菌性疫病。大腸桿菌和沙門氏菌混合感染是目前禽病流行中的主要趨勢，一旦感染死亡率較高，從而引起更為嚴重的經濟損失。兩種細菌血清型種類較多，不同地區差別較大，不同菌株之間不產生交叉保護作用，極易產生耐藥性。本文針對山東省某一養殖戶發病雞群，根據臨床癥狀和剖檢病變初步診斷為大腸桿菌和沙門氏菌感染，為了進一步確診送檢病料至實驗室檢測。

一、材料與方法

（一）材料

1.病料來源。山東某養殖戶雞群23日齡，出現死淘增加，日死淘1‰～2‰，雞群有部分雞出現羽毛蓬松，精神不振，拉白色稀糞。剖檢死雞80%以上出現心包炎、肝周炎，腸黏膜脫落，其它無明顯病變。初步診斷為大腸桿菌、沙門氏菌感染，取四只死雞送至實驗室進行檢測。

2.材料。麥康凱培養基，自制藥敏片，解剖刀，解剖剪，鑷子，顯微鏡，細菌生化反應管，37℃溫箱。

（二）方法

1.細菌分離培養。將送檢的4只死雞進行剖檢，取肝臟無菌接種到麥康凱培養基上，經過37℃培養24 h。

2.細菌形態學觀察。取在麥康凱培養基上培養24 h可疑菌落，抹片，進行革蘭氏染色鏡檢。

3.生化試驗。挑取疑似大腸桿菌和沙門氏菌菌落經過純化培養后，用細菌生化反應管進行生化鑒定。

4.藥敏試驗。將10%氨芐西林鈉、5%恩諾沙星、5%阿莫西林、10%強力霉素、10%氟苯尼考、10%粘桿菌素、硫酸頭孢噻呋鈉、10%林可霉素8種抗生素制成藥敏片，將被檢細菌涂布接種于普通瓊脂平板上，間隔一定距離貼上各種藥敏片，于37℃溫箱培養24 h，結果判斷依據《紙片法抗菌藥物敏感試驗操作標準（第四版）》進行。

二、結果

（一）細菌分離培養

麥康凱培養基上1#、2#、3#、4#均長出米粒大小，桃紅色菌落及淡橘黃色菌落（見圖1）。

（二）細菌形態學觀察

挑取可疑菌落革蘭氏染色，400倍鏡檢，可見G-中等桿菌，疑似大腸桿菌（見圖2），G-短桿菌，疑似沙門氏菌（見圖3）。

圖1 麥康凱培養菌落

圖2 G-中等桿菌

圖3 G-短桿菌

（三）生化試驗

1.挑取疑似大腸桿菌的細菌分別做枸櫞酸鹽試驗、靛基質試驗、MR試驗、VP試等生化試驗，均符合大腸桿菌的生化特性（見表1）。

表1鑒定疑似大腸桿菌生化試驗結果

2.挑取疑似沙門氏桿菌的細菌分別做色氨酸肉湯、賴氨酸、氨基酸對照、尿素、氰化鉀、氰化鉀對照、山梨醇、甘露醇、水楊苷、丙二酸鹽、ONPG等生化試驗，均符合沙門氏桿菌的生化特性（見表2）。

（四）藥敏試驗

藥敏試驗表明：分離出的大腸桿菌、沙門氏菌對恩諾沙星、頭孢噻呋敏感，對氨芐西林鈉、粘桿菌素中敏，其它低敏或耐藥。

見表3，表4。

表2疑似沙門氏桿菌的生化試驗結果

三、方案制定及效果

方案：10%氨芐西林鈉1 g兌水1.5 L水，配合10%粘桿菌素1 g兌水1.5 L水，連用四天。

效果：連用四天后，糞便明顯好轉（見圖4，圖5），死淘也有所下降（表5），治療結果明顯。

圖4 用藥前拉稀糞料糞

圖5 用藥后糞便正常

表3 藥敏試驗結果

表4 判定標準

表5 用藥前后死淘情況

四、討論

1.隨著養殖設備的更新換代，飼養技術的提高，飼養密度也越來越大，這對雞舍環境和生物安全要求越來越高，否則雞群極容易發生細菌感染，造成損失。

2.近年來，為了防治某些細菌感染，在飼料和治療中常盲目使用一些抗菌藥物，以致產生許多耐藥菌株。大腸桿菌和沙門氏菌易產生對抗生素的耐受性，而且多重耐藥現象嚴重。因此，有條件的應做藥敏試驗，根據藥敏試驗結果選擇敏感藥物。

3.從藥敏試驗結果可以看出該雞群對很多藥物產生耐藥性，恩諾沙星敏感，但目前屠宰企業已將氟喹諾酮類列為禁用藥，所以該病例不能使用恩諾沙星。頭孢噻呋鈉也是敏感藥物，但是雞群23日齡，使用成本較高，因此選擇10%氨芐西林鈉與10%粘桿菌素配伍使用。

4.10%氨芐西林鈉與10%粘桿菌素配伍使用，從雞只死淘情況以及糞便改善情況來看取得較好效果，10%氨芐西林鈉與10%粘桿菌素在雞上的休藥期是7 d，不會造成藥物殘留，且成本不高。