再生基因Ⅳ在子宮內膜樣腺癌中的表達及與細胞增殖的關系

肖　莉　萬義增　高　月　孫雪竹　李亞娟　張　歡

(遼寧醫學院附屬第三醫院婦產科，遼寧　錦州　121000)

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再生基因Ⅳ在子宮內膜樣腺癌中的表達及與細胞增殖的關系

肖莉萬義增1高月2孫雪竹李亞娟張歡

(遼寧醫學院附屬第三醫院婦產科，遼寧錦州121000)

〔摘要〕目的檢測子宮內膜樣腺癌中再生基因Ⅳ(RegⅣ)和增殖相關抗體增殖細胞核抗原(PCNA)、Ki67表達，分析其臨床意義。方法65例子宮內膜樣腺癌術后存留的蠟塊組織作為觀察組，30例復雜性增生的子宮內膜組織作為對照組，21例因子宮肌瘤行子宮全切后的非腫瘤性子宮內膜組織作為正常對照組。應用免疫組化SP法檢測三組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達。結果三組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達差別有統計學意義。觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達均與腫瘤的浸潤深度和最大徑均密切相關，RegⅣ的表達與分化程度密切相關。相關分析顯示觀察組中RegⅣ和PCNA、RegⅣ和Ki67的表達均呈正相關性。結論子宮內膜樣腺癌中RegⅣ高表達是腫瘤形成和進展的重要因素，RegⅣ對腫瘤細胞的增殖有一定的調節作用。

〔關鍵詞〕子宮內膜樣腺癌；RegⅣ；增殖細胞核抗原(PCNA)；Ki67；免疫組化

子宮內膜樣腺癌病變形成與子宮內膜上皮的不典型增生密切相關，蛋白表達失常被認為與病變的形成密切相關〔1〕。再生基因蛋白家族是鈣依賴性凝集素超家族，高表達在部分惡性腫瘤中，參與細胞的增殖和分化過程〔2〕。再生基因(Reg)Ⅳ是家族的新成員，其在炎癥反應、炎性相關的腫瘤性病變及侵襲性癌中可以高表達，對促進腫瘤的生長、增殖可能有一定作用〔3〕。但是關于RegⅣ激活及轉導信號通路的發現很少。本研究關注子宮內膜樣腺癌中RegⅣ、增殖細胞核抗原(PCNA)和Ki67的表達，分析其臨床意義及相關性。

1資料與方法

1.1臨床資料我院行子宮內膜樣腺癌根治手術的65例患者作為觀察組，留取術后的蠟塊組織及完整臨床資料，同時經病理醫師再次閱片證實，并符合WHO中的病理診斷標準。年齡42～79歲，平均57.9歲。30例復雜性增生的子宮內膜組織作為對照組，年齡34～77歲，平均54.3歲。21例因子宮肌瘤行子宮全切后的非腫瘤性子宮內膜組織作為正常對照組，年齡35～76歲，平均51.9歲。三組常規資料無明顯差別。

1.2RegⅣ、PCNA和Ki67表達的檢測RegⅣ、PCNA和Ki67蛋白的檢測均應用免疫組化SP法、二氨基聯苯胺(DAB)顯色。嚴格按說明書進行操作，做好質量控制。

1.3RegⅣ、PCNA和Ki67的判定RegⅣ以細胞質和細胞膜中出現淡黃色-棕褐色顆粒為陽性，PCNA和Ki67以細胞核中出現淡黃色-棕褐色定為陽性。選擇上皮細胞分布密集的區域進行觀察，共選擇5個400倍視野計數。陽性根據以下兩個方面：①陽性細胞數：<5%為0分；5%～25% 1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76% 4分。②染色強度：無色為0分；淡黃色為1分；棕黃色為2分；棕褐色為3分。兩者計分相乘作為最終判定結果。RegⅣ：0～3分為陰性，4～12分為陽性。PCNA和Ki67：0～6分為陰性，7～12分為陽性。

1.4統計學方法采用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗、線性相關分析。

2結果

2.1三組RegⅣ、PCNA和Ki67表達比較三組RegⅣ、PCNA和Ki67的表達差異均顯著(P<0.05)。見表1。

表1　三組中RegⅣ、PCNA和Ki67表達的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達在不同臨床特征中的比較觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達與腫瘤浸潤深度和最大徑均密切相關，RegⅣ的表達與分化程度密切相關。見表2。

表2　觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的相關性分析觀察組中RegⅣ和PCNA(r=0.51,P<0.05)、RegⅣ和Ki67(r=0.48,P<0.05)的表達均呈正相關性。

3討論

子宮內膜樣腺癌常與肥胖及雌激素刺激有關，其癌前病變為不典型增生和內膜的上皮內瘤變〔4〕。病變多為彌漫型，少部分為局限型。腫瘤由異型增生的腺樣結構組成，常排列成密集的腺管狀、背靠背、搭橋、篩狀或迷路狀結構，多數病例為高分化，很少有實性區，而低分化腫瘤常表現為實性片狀結構。癌基因的作用與子宮內膜樣腺癌的形成有關〔5〕。RegⅣ是2001年在對炎癥性腸病庫的高頻序列進行分析時發現并分離出的一種新型基因，有的學者也認為其為癌基因〔6〕。RegⅣ位于染色體1p12-13.1，編碼分泌型蛋白〔7〕。研究顯示RegⅣ主要在消化系統腫瘤如胰腺癌、結直腸癌、胃癌和胰腺癌中表達〔7,8〕。張軍等〔9〕通過觀察RegⅣ在胃癌中的表達，發現RegⅣ在胃癌中高表達，RegⅣ與癌細胞增殖、血管形成有關，聯合檢測RegⅣ和血管內皮生長因子可以作為判斷胃癌生物學行為的指標。近年也有人關注RegⅣ在其他腫瘤中的表達情況〔10〕。王樹香等〔11〕觀察RegⅣ在子宮內膜癌中的表達后發現RegⅣ在正常子宮內膜、不典型增生子宮內膜、子宮內膜癌中的表達依次升高，認為RegⅣ可能對子宮內膜癌的發生發展中起重要作用，同時可以指導預后的評估。子宮內膜樣腺癌是高增殖狀態的腫瘤，臨床標記增殖指數的常用抗體為PCNA和Ki67，其標記準確，客觀〔12,13〕。

本研究提示RegⅣ高表達及PCNA、Ki67標記的增殖指數對子宮內膜癌的形成及癌變進展有一定促進作用；三者高表達可以促進腫瘤的生長及浸潤，使腫瘤處于高度侵襲狀態，細胞的異型性增加，惡性潛能增加。RegⅣ的表達與分化程度密切相關，由于分化是細胞幼稚與成熟變化的過程，因此RegⅣ在一定程度上可以調節腫瘤細胞從幼稚向成熟的分化，此點也在一定程度上間接提示RegⅣ參與腫瘤惡變的內在過程，提示RegⅣ可以有效促進腫瘤的增殖過程，也說明RegⅣ對細胞增殖的作用是其促進腫瘤形成和進展的重要內在調節因素之一〔14,15〕。研究認為在MKN28和TMK1細胞系中RegⅣ與表皮生長因子受體的高磷酸化水平有關〔16〕。也有學者認為RegⅣ可以與通過趨化因子CCL7結合腫瘤表面趨化因子受體CCR1和CCR3，進而誘發腫瘤基質蛋白酶的表達升高促進腫瘤的侵襲和轉移。因此RegⅣ在腫瘤中的作用可能具有多樣性，其需要更多的實驗來證實和發現〔17〕。

綜上，子宮內膜樣腺癌中RegⅣ高表達是腫瘤形成和進展的重要因素，RegⅣ對腫瘤細胞的增殖有一定的調節作用。

4參考文獻

1Bohilea RE,Sajin M,Furtunescu F,etal.Clinical and pathological correlations in endometrial pathology〔J〕.J Med Life,2015;8(4):552-62.

2馬華,梅峰,馬千里,等.RegⅣ在胃癌中的表達及其臨床意義〔J〕.第三軍醫大學學報,2006;28(5):441-3.

3鄭聲琴,何杰,黃培林,等.RegⅣ在大腸癌中表達及其臨床意義〔J〕.世界華人消化雜志,2010;18(33):3594-8.

4Chen M,Jin Y,Li Y,etal.Oncologic and reproductive outcomes after fertility-sparing management with oral progestin for women with complex endometrial hyperplasia and endometrial cancer〔J〕.Int J Gynaecol Obstet,2016;132(1):34-8.

5Sakai K,Yamagami W,Susumu N,etal.Pathological factors associated with omental metastases in endometrial cancer〔J〕.Eur J Gynaecol Oncol,2015;36(4):397-401.

6秦先鋒,朱惠明,劉玉杰.RegⅣ和EGFR在大腸癌中的表達〔J〕.中國醫藥指南,2013;11(36):10-1.

7Moon JH,Fujiwara Y,Nakamura Y,etal.REGⅣ as a potential biomarker for peritoneal dissemination in gastric adenocarcinoma〔J〕.J Surg Oncol,2012;105(2):189-94.

8Guo Y,Xu J,Li N,etal.RegⅣ potentiates colorectal carcinoma cell migration and invasion via its CRD domain〔J〕.Cancer Genet Cytogenet,2010;199(1):38-44.

9張軍,鄒賽英,董雅璐.RegⅣ、血管內皮生長因子在胃癌中表達及其與微血管密度關系的研究〔J〕.中華臨床醫師雜志,2012;6(9):2344-6.

10Yang L,Lan S,Liu J,etal.Expression of MK-1 and RegⅣ and its clinicopathological significances in the benign and malignant lesions of gallbladder〔J〕.Diagn Pathol,2011;21(6):100-6.

11王樹香,陳秀瑋,李雪婷,等.再生基因Ⅳ在子宮內膜癌中的表達及臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學雜志,2015;20(4):317-9.

12Steinbrecher KA,Harmel-Laws E,Sitcheran R,etal.Loss of epithelial RelA results in deregulated intestinal proliferative/apoptotic homeostasis and susceptibility to inflammation〔J〕.J Immunol,2008;180(4):2588-99.

13Numata M,Oshima T.Significance of regenerating islet-derived type Ⅳ gene expression in gastroenterological cancers〔J〕.World J Gastroenterol,2012;18(27):3502-10.

14楊德生,康玉華,李福春,等.再生基因蛋白Ⅳ、骨橋蛋白、表皮生長因子受體蛋白在胃腺癌中的表達及臨床意義〔J〕.中國老年學雜志,2015;35(8):2214-6.

15楊德生,康玉華,李福春,等.胃腺癌組織再生基因蛋白Ⅳ的表達及臨床意義〔J〕.第二軍醫大學學報,2014;35(7):786-8.

16Nishnupuri KS,Luo Q,Murmu N,etal.RegⅣ activates the epidermal growth factor receptor/Akt/AP-1 signaling pathway in colon adenocarcinomas〔J〕.Gastroenterology,2006;130(1):137-49.

17嚴偉,徐細明,湯俊,等.RegⅣ和CCL7在胃癌中的表達及相關性分析〔J〕.現代生物醫學進展〔J〕.2015;15(26):5063-5.

〔2014-12-16修回〕

(編輯苑云杰)

〔中圖分類號〕R737

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)12-2935-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.053

1遼寧醫學院附屬第三醫院病理科

2遼寧醫學院附屬第三醫院檢驗科

第一作者：肖莉(1971-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事婦科腫瘤及產科危重癥研究。