2型糖尿病腎病患者血清中Trx，Txnip的變化及意義

方曉琳，楊海波，李憲，張一諾，袁麗吉化集團(tuán)公司總醫(yī)院內(nèi)分泌科，吉林吉林　132021

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2型糖尿病腎病患者血清中Trx，Txnip的變化及意義

方曉琳，楊海波，李憲，張一諾，袁麗
吉化集團(tuán)公司總醫(yī)院內(nèi)分泌科，吉林吉林132021

［摘要］目的探討硫氧還蛋白（Trx），硫氧還蛋白相互作用蛋白（Txnip）與2型糖尿病腎病患者的關(guān)系。方法用ELISA法檢測(cè)T2DM組（96例）及同期門(mén)診健康體檢者D組（23例）人群血清中Trx，Txnip水平，其中按照尿微量白蛋白與尿肌酐值的比值（ACR），將T2DM組分為A組（＜30 mg/g，35例），B組（30～300 mg/g，37例），C組（＞300 mg/g，24例），同時(shí)檢測(cè)糖化血紅蛋白（HbA1c）、空腹血糖（FPG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、總膽固醇（TC）、體重指數(shù)（BMI）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）。結(jié)果糖尿病組患者血清中Trx的水平較健康對(duì)照組顯著降低（P＜0.01），Txnip的水平較健康對(duì)照組明顯升高（P＜0.05），A組與B組兩因子水平未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），B組與C組比較兩因子有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），糖尿病組ACR和Trx正相關(guān)（r=0.706，P＜0.001），和Txnip負(fù)相關(guān)（r=-0.607，P＜0.001）。結(jié)論Trx和Txnip表達(dá)與DN的病變發(fā)展有關(guān)，有可能作為檢驗(yàn)DN的敏感指標(biāo)，為早期診斷糖尿病腎病及分期提供方法。調(diào)節(jié)二者表達(dá)及活性可成為糖尿病腎病診治的新思路。

［關(guān)鍵詞］2型糖尿病；糖尿病腎病；硫氧還蛋白；硫氧還蛋白相互作用蛋白；尿微量白蛋白/肌酐值

糖尿病腎病（DN）是糖尿病的一種微血管并發(fā)癥，引起尿毒癥的比例較高，在我國(guó)，約占25%，其中氧化應(yīng)激在DN發(fā)病進(jìn)程中舉足輕重，研究人員發(fā)現(xiàn)［1］，硫氧還蛋白相互作用蛋白（Txnip）參與糖尿病的形成，甚至其血管并發(fā)癥的產(chǎn)生及進(jìn)展，而硫氧還蛋白（Trx）系統(tǒng)［1］可以與Txnip特異結(jié)合，甚至抑制如ASK1等凋亡信號(hào)達(dá)到對(duì)腎臟組織的保護(hù)作用，該研究通過(guò)觀(guān)察2型糖尿病腎病及健康人群血清中Trx，Txnip的變化，為指導(dǎo)臨床診治提供思路。報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取住院的96例T2DM患者，而研究對(duì)象全部符合1999年WHO提出的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，按照尿微量白蛋白與尿肌酐值的比值（ACR），將T2DM組分為A組（＜30 mg/g，35例），B組（30～300 mg/g，37例），C組（＞300 mg/g，24例），B組（微量白蛋白尿期）和C組（大量白蛋白尿期）為糖尿病腎病組，同時(shí)選擇健康體檢者為正常對(duì)照D組（23例）。

1.2排除病例標(biāo)準(zhǔn)

①合并惡性腫瘤；②合并腦腫瘤等神經(jīng)系統(tǒng)疾病；③合并有心血管系統(tǒng)疾病；④合并有免疫系統(tǒng)疾病；⑤合并有肝腎功能不全及既往應(yīng)用過(guò)激素。健康體檢者入選標(biāo)準(zhǔn):排除輔助檢查資料不全，及已經(jīng)確診與氧化應(yīng)激有關(guān)的疾病。

1.3研究方法

血清Trx，Txnip的檢測(cè)采用上海邦景實(shí)業(yè)有限公司Trx，Txnip的ELISA試劑盒，其中Trx試劑盒批內(nèi)變異系數(shù)＜9%，批間變異系數(shù)＜15%，Txnip試劑盒批內(nèi)變異系數(shù)＜9%，批間變異系數(shù)＜11%。臨床指標(biāo)中ACR測(cè)定采用西門(mén)子HBA1C/ACR分析儀，生化指標(biāo)搜集空腹血糖（FPG），尿素氮（BUN），肌酐（Cr），甘油三酯（TG），低密度脂蛋白膽固醇（LDL），總膽固醇（TC），體重指數(shù)（BMI）=體重/身高2（kg/m2），同時(shí)采集性別，年齡，糖尿病病史資料。對(duì)比各組間Trx，Txnip及臨床指標(biāo)的數(shù)據(jù)，Trx，Txnip和部分指標(biāo)做相關(guān)性分析。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

全部數(shù)據(jù)錄入計(jì)算機(jī)，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，應(yīng)用軟件為SPSS 18.0，各組間對(duì)照對(duì)于方差齊者采用方差分析和t檢驗(yàn)，對(duì)于方差不齊者采用秩和檢驗(yàn)，部分指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析。

2　結(jié)果

2.1各組臨床指標(biāo)

Trx，Txnip的比較:A，B，C，D各組年齡（歲）分別為（52.34±9.86），（52.54±8.25），（52.42±6.24），（52.91± 5.69），男/女構(gòu)成比例分別為（18/17），（18/19），（11/ 13），（10/13），經(jīng)比較，年齡性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），A，B，C組分別與D組中Trx，Txnip濃度的比較，A，B，C組Trx濃度降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），Txnip濃度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。A，B，C組間BMI（kg/m2）分別為（25.67±2.89），（26.82±2.80），（27.05±2.68），病程（年）分別為6.36±5.10，10.00±6.16，11.02±7.03，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)3組 BMI，糖尿病家族史，TG，LDL，TC，F(xiàn)PG，HBA1C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），B組與A組相比，BUN，Cr，Trx，Txnip差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），C組與A，B組比較，BUN，Cr，Trx濃度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而Txnip濃度降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），B組與A組比較，B組糖尿病病史長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C組與B組比較，糖尿病病史差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2A，B，C組中患者ACR水平與其他指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性研究

A組中ACR與Trx呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=-0.403，P＜0.05），與Txnip，病史，F(xiàn)PG，BUN，Cr，TG，LDL，TC，HBA1C，BMI無(wú)相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。B組中 ACR與 Trx，Txnip，病史，F(xiàn)PG，BUN，Cr，TG，LDL，TC，HBA1C，BMI無(wú)相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。C組中ACR與BUN呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=-0.459，P＜0.05），與Trx，Txnip，病程，F(xiàn)PG，Cr，TG，LDL，TC，HBA1C，BMI無(wú)相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3整體糖尿病組中ACR水平與其余指標(biāo)的相關(guān)分析

整體糖尿病組ACR與Trx呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.706，P＜0.001），與Txnip呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=-0.607，P＜0.001），與HbA1c，病程呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.238、0.262，P＜0.05），與BUN呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.246，P＜0.05），Cr呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.489，P＜0.01），與糖尿病家族史，TG，LDL，TC，F(xiàn)PG，BMI無(wú)明顯相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1　各組臨床指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（x-±s）

3　討論

硫氧還蛋白系統(tǒng)是普遍存在于不同有機(jī)體的抗氧化還原系統(tǒng)，對(duì)于維持機(jī)體氧化還原反應(yīng)平衡作用巨大，Txnip是Trx的內(nèi)源性抑制劑，目前關(guān)于二者在糖尿病腎病患者血清中的動(dòng)態(tài)表達(dá)鮮有報(bào)道，該實(shí)驗(yàn)以尿微量白蛋白與尿肌酐的比值（ACR）為分組，觀(guān)察DN各階段血清中兩種因子的變化，該次研究發(fā)現(xiàn)，A，B，C組患者血清Trx低于D組（P＜0.01），而Txnip高于D組（P＜0.05），說(shuō)明腎臟在高糖環(huán)境下Txnip有所增加，并且與Trx結(jié)合［2］，減少 Trx濃度，另一方面Txnip介導(dǎo)氧化應(yīng)激，生成大量MDA等氧化應(yīng)激物質(zhì)消耗Trx，另外某些學(xué)者發(fā)現(xiàn)［1］，當(dāng)腎臟不穩(wěn)定的血流通過(guò)機(jī)械感受效應(yīng)作用于內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)，同樣引起Txnip加速表達(dá)，通過(guò)Txnip/ Trx/ASK1途徑引起內(nèi)皮細(xì)胞炎癥，造成腎單元破壞。

該實(shí)驗(yàn)糖尿病組患者血清中，A組及 B組 Trx，Txnip濃度未見(jiàn)差異，而C組Trx濃度明顯高于A(yíng)組和B組，Txnip濃度明顯低于A(yíng)組和B組，考慮可能存在以下原因:①有國(guó)內(nèi)學(xué)者研究提出［3］，在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中，Trx mRNA表達(dá)減少，說(shuō)明氧化應(yīng)激產(chǎn)生的活性氧自由基造成Trx mRNA含量下降.隨著DM病程的延長(zhǎng)，視網(wǎng)膜Trx mRNA表達(dá)升高，不排除是Trx系統(tǒng)由于功能下降引起的代償，同時(shí)糖尿病視網(wǎng)膜病變患者的血清中，Trx含量與糖尿病視網(wǎng)膜病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，由于糖尿病視網(wǎng)膜病變與糖尿病腎病存在相似的發(fā)病機(jī)制和病程，這一點(diǎn)可以作為此實(shí)驗(yàn)結(jié)果的依據(jù)。②當(dāng)糖尿病腎病患者進(jìn)入大量蛋白尿期，許多患者開(kāi)始系統(tǒng)的藥物治療，一些關(guān)于糖尿病的研究表明［4］某些藥物如白芍總苷，貝那普利、曲尼司特、DPP4抑制劑等可引起Trx加速表達(dá)，Txnip表達(dá)下降，上述觀(guān)點(diǎn)可成為糖尿病腎病大量蛋白尿期Trx增多，Txnip減少的理論基礎(chǔ)。

該次試驗(yàn)中同時(shí)發(fā)現(xiàn)糖尿病組中ACR與HbAlc及病程呈正相關(guān)。可以認(rèn)為隨著HbAlc升高，病程延長(zhǎng)，腎臟損害越重，與大部分研究結(jié)論相同。A組ACR和Trx為負(fù)相關(guān)。C組ACR與BUN為負(fù)相關(guān)，不排除實(shí)驗(yàn)誤差，日后需深入研究明確有無(wú)意義毋庸諱言，由于該次實(shí)驗(yàn)樣本量不足，入選病例存在一定的隨機(jī)性，整體實(shí)驗(yàn)流程相對(duì)簡(jiǎn)練，也不排除合并其他疾病的干擾，同時(shí)有鑒于腎臟結(jié)構(gòu)功能的特殊性及醫(yī)學(xué)倫理學(xué)條件限制而無(wú)法取活體腎臟進(jìn)一步檢驗(yàn)，多方面研究存在一定困難，且實(shí)驗(yàn)誤差與系統(tǒng)誤差的影響也無(wú)法排除，故有待日后針對(duì)上述不足進(jìn)一步擴(kuò)充臨床樣本，多方面取材，成熟而深入地設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究流程并完善實(shí)驗(yàn)相關(guān)軟硬件水平及質(zhì)量，更嚴(yán)格地遏制誤差，以取得更客觀(guān)、更科學(xué)、更具價(jià)值的臨床結(jié)論以期指導(dǎo)臨床。

綜上，Trx和Txnip表達(dá)與DN的病變發(fā)展有關(guān)，有可能作為檢驗(yàn)DN的敏感指標(biāo)，調(diào)節(jié)二者表達(dá)有望成為治療糖尿病腎病的熱點(diǎn)。

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［中圖分類(lèi)號(hào)］R587.1

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1672-4062（2016）06（a）-0050-02

DOI:10.16658/j.cnki.1672-4062.2016.11.050

收稿日期:（2016-03-02）

［作者簡(jiǎn)介］方曉琳（1986-），女，吉林吉林人，醫(yī)學(xué)碩士，吉化集團(tuán)公司總醫(yī)院內(nèi)分泌科主治醫(yī)師，主要從事糖尿病及其并發(fā)癥研究工作。