基于表達譜芯片技術分析老齡化對小鼠卵母細胞發育能力的影響

常　卓，傅祥偉，朱士恩

(1.中國農業大學 動物科技學院，北京 100094；2.北京市畜牧總站，北京 100101)

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基于表達譜芯片技術分析老齡化對小鼠卵母細胞發育能力的影響

常卓1，2，傅祥偉1，朱士恩1

(1.中國農業大學 動物科技學院，北京 100094；2.北京市畜牧總站，北京 100101)

摘要：探討了生殖老化對小鼠卵母細胞后期發育及基因表達水平的影響。結果表明，與青年小鼠相比，老齡小鼠MII期卵母細胞經體外受精后早期胚胎原核形成的時間發生延遲(1 h)，囊胚發育率有顯著差異(61.98% vs.70.95%，P<0.05)。提取老齡和青年CD1小鼠MII期卵母細胞總RNA，使用基因表達譜芯片對其進行分析。結果表明，生殖老化導致1 737個基因表達表現出顯著差異，其中64.9%的基因表達上調，35.1%的基因表達下調，生殖老化導致Hdac10等基因產生極顯著的表達差異，小鼠卵母細胞質量下降，最終影響其后期發育能力。

關鍵詞：卵母細胞；生殖老化；減數分裂；基因表達；小鼠

生物體在機體其它器官老化前生殖機能就已開始退化，即發生生殖老化現象。與雄性哺乳動物不同的是，雌性哺乳動物在渡過其壽命的1/3時已發生生殖老化，生殖機能表現出顯著下降，表現在卵母細胞的數量和質量上，如卵巢早衰、減數分裂中染色體分離異常以及線粒體功能障礙等[1]。而人們對于生殖老化影響卵母細胞后期發育的情況知之甚少。

Hamatani和Pan等人曾通過表達譜芯片技術分析青老年小鼠卵母細胞全基因組表達，但在雜交前使用RNA線性擴增的方法得到cRNA[2，3]。而本實驗不進行RNA線性擴增，免去繁瑣的擴增過程和擴增中可能會導致的核酸污染，更重要的是避免擴增不均一而放大或減小基因表達差異，最終得出不準確的結果。本實驗主要研究生殖老化對小鼠卵母細胞后期發育潛力是否造成影響，并進一步以老齡和青年CD1小鼠MII期卵母細胞為實驗材料進行基因表達譜分析，探索生殖老化影響卵母細胞后期發育的分子機理。……