強生Vitros 5600全自動生化免疫分析儀免疫急診項目的性能評價

林麗云劉小君劉愛勝

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強生Vitros 5600全自動生化免疫分析儀免疫急診項目的性能評價

林麗云①劉小君②劉愛勝③

［摘要］目的：對強生Vitros 5600全自動生化免疫分析儀免疫急診項目進行性能驗證，為患者急診檢驗項目提供準確和快捷的結(jié)果。方法：按照美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）評價標準及美國強生公司提供的驗證方案對生化免疫分析儀免疫急診項目肌紅蛋白（Mb）、肌鈣蛋白I （TropI）、N端腦利鈉鈦前體（NTproBNP）及總β人絨毛膜促性腺激素（T-βHCG）等進行精密度、準確度、線性范圍、參考區(qū)間及攜帶污染率等檢測指標進行驗證，以評價其檢測性能。結(jié)果：生化免疫分析儀檢測Mb、TropI、NTproBNP及T-βHCG批內(nèi)精密度CV值為0.58～2.02%，均＜2.5%，批間CV值為1.43～3.15%，均＜5.0%；正確度相對偏倚為-3.52～4.21%；檢測范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好，r2值在0.9836～0.9998，斜率（a）在0.9865～1.0207；攜帶污染率為0.096～0.180%；參考區(qū)間驗證符合率R均≥95%。結(jié)論：Vitros 5600全自動生化免疫分析儀檢測免疫急診項目的各項檢測指標性能良好，符合急診免疫檢驗工作的需求。

［關(guān)鍵詞］全自動生化免疫分析儀；急診項目；免疫；性能；評價

林麗云，女，（1983- ），本科學歷，主管技師。深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，從事臨檢和生化免疫工作。

［First-author’s address］ Clinical Laboratory of the Second People’s Hospital of Longgang District， Shenzhen， Guangdong，518129， China.

目前，隨著檢驗醫(yī)學的飛速發(fā)展，醫(yī)院急診檢驗工作量的不斷增加，為了滿足臨床的需要及為患者提供更高效率的服務，醫(yī)院購置了強生Vitros 5600全自動生化免疫分析儀，按照（美國）臨床實驗室標準化協(xié)會（clinical and laboratory standards institute，CLSI）規(guī)定，并參照強生公司提供的驗證方案，于2015年11月至2016年1月對該儀器的免疫急診檢測項目的檢測性能進行驗證［1-2］。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

使用的強生Vitros 5600全自動生化免疫分析儀、試劑、一次吸頭、校準品及質(zhì)量控制品均由美國強生公司提供。

1.2 標本來源

收集深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院住院和門、急診患者新鮮血清，且均無溶血、脂血及黃疸的標本，所有標本及時處理及時檢測，60 min內(nèi)檢測完畢。

1.3 驗證方法

按照儀器作業(yè)指導書對儀器進行系統(tǒng)維護保養(yǎng)及定標，嚴格按儀器的操作規(guī)程和試劑說明書操作，待室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)后對標本進行檢測，并于檢測過程中不定時地插入室內(nèi)質(zhì)控物進行質(zhì)量監(jiān)控，確保整個分析過程中儀器處于在控的良好狀態(tài)。

（1）精密度。精密度評估使用同一批號的試劑，重復測定免疫低、高值質(zhì)控品。批內(nèi)精密度1 d內(nèi)重復測定20次，批間精密度測定1次/d，連續(xù)測定20 d，分別計算其平均值（x-）、標準偏差（S）和變異系數(shù)（CV），根據(jù)精密度CV值判定精密度是否符合要求。

（2）準確度。用校準品校準檢測系統(tǒng)后，對低、高值定值質(zhì)控品進行檢測，對各自檢測結(jié)果與定值質(zhì)控品的靶值進行比較，計算相對偏倚（%），計算公式1：

（3）線性范圍。依照CLSI的EP6-A［3］文件的要求，收集超出廠商所給線性上/下限10%～20%的高濃度樣品（H）和低濃度樣品（L），收集不到高/低濃度樣品添加高濃度的分析物/稀釋，但體積均不超過總體積的1/10，按5H、4H+1L、3H+2L、2H+3L、1H+ 4L和5L的關(guān)系配制，每個項目測定3次，計算平均值（x-），與理論值進行相關(guān)分析，若r2＞0.95，斜率（a）在（1.00±0.03）范圍內(nèi)，則可判斷測定方法在實驗所涉及的濃度范圍內(nèi)線性良好。

（4）攜帶污染率。取1份高濃度標本連續(xù)測定3次（H1、H2、H3）；再取1份低濃度標本連續(xù)測定3次（L1、L2、L3）。按攜帶污染率公式2計算：

（5）參考區(qū)間。選取健康志愿者（無已知疾病，無任何用藥，體重在正常范圍）男性、女性各30名進行檢測；依照CLSI的C28-A［4］文件的要求觀察測定結(jié)果與試劑說明書上聲明的參考區(qū)間符合情況，計算出符合率（R），R＞90%為合格。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，計量資料結(jié)果以均值±標準差（±s）表示，率以百分數(shù)（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 精密度

Vitros 5600分析儀檢測低值、高值肌紅蛋白（Myoglobin）、超敏肌鈣蛋白I（TropI）、N端腦利鈉鈦前體（NTproBNP）及總β人絨毛膜促性腺激素（T-βHCG）批內(nèi)精密度分別為0.63%～2.02%和0.58%～1.96%；批間精密度分別為1.70%～3.15%和1.43%～2.91%，批內(nèi)和批間精密度均為良好，其結(jié)果見表 l、表2。

2.2 準確度

Vitros 5600分析儀分別檢測低、高值Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG相應的定值質(zhì)控品結(jié)果與靶值的相對偏倚為-3.52%～4.21%，均在Vitros 5600分析儀允許范圍之內(nèi)，結(jié)果見表3。

表1 Vitros 5600分析儀批內(nèi)精密度評估結(jié)果(n=20)

表2 Vitros 5600分析儀批間精密度評估結(jié)果(n=20)

表3 Vitros 5600分析儀準確度偏倚值結(jié)果(%)

2.3 線性范圍

通過實際測定和分析，各項目的測定值與理論值都十分相近，相關(guān)系統(tǒng)數(shù)r2值為0.9836～0.9998，斜率（a）為0.9865～1.0207，在檢測區(qū)間內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4 攜帶污染率

Vitros 5600分析儀分別測定Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG的攜帶污染率極低，為0.096%～0.180%，與廠商提供的相一致，結(jié)果見表4。

表4 Vitros 5600分析儀攜帶污染率評價試驗結(jié)果(%)

2.5 參考區(qū)間驗證

通過檢測男性、女性各30名健康體驗者血清樣本，參照廠商提供的參考區(qū)間，Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG各項目參考區(qū)間的符合率R分別為96.7%、95%、98.3%及96.7%，均≥95.0%，均符合儀器廠商要求。

3 討論

Vitros 5600分析儀是強生公司研發(fā)的一款集干、濕化學以及化學發(fā)光3種分析技術(shù)于一體適用于急診檢驗的新一代檢測儀器。該儀器的免疫分析模塊為異相免疫分析平臺，運用先進的化學發(fā)光檢測技術(shù)，具有準確度高、重復性好、線性范圍廣、孵育時間短、靈敏度高、檢測范圍寬及檢測項目多等特點。然而，不同實驗室的工作人員操作習慣、水質(zhì)、溫度及濕度等檢測條件有很大差異［5］。因此，按照IS015189［6］“醫(yī)學實驗室一質(zhì)量和能力的專用要求”的規(guī)定，設(shè)備應在安裝時及常規(guī)使用中顯示出能夠達到規(guī)定的性能標準，并且符合相關(guān)檢驗所要求的規(guī)格。臨床實驗室必須對于檢測系統(tǒng)的性能參數(shù)進行驗證［7-8］。

精密度是定量測定中最基本的性能指標，本研究驗證了Vitros 5600分析儀檢測免疫急診項目低值、高值的質(zhì)控品批內(nèi)精密度分別為0.63%～2.02%和0.58%～1.96%；批間精密度分別為1.70%～3.15%和1.43%～2.91%，批內(nèi)和批間精密度均良好，均小于廠商說明書給定的允許范圍。表明該儀器在本室檢測環(huán)境中系統(tǒng)重復性符合要求，能滿足臨床免疫急診檢驗的質(zhì)量標準。

正確度是通過對定值的質(zhì)量控制品或校準品進行測定并計算其偏倚（%），若測定結(jié)果在廠商規(guī)定的限值之內(nèi)，正確度可被確認。按照CLSI EP15-A文件和國際標準化組織（ISO）15189文件中對正確度的評價要求，可以通過比對定值的校正品來對系統(tǒng)的正確度進行驗證。本實驗室測定低、高定值質(zhì)控品檢測結(jié)果與靶值的偏倚介于-3.52%～4.21%，均在儀器檢測允許范圍之內(nèi)，表明該儀器檢測系統(tǒng)檢測Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG正確度性能符合要求。

在確保使用原裝配套試劑的前提下，本研究驗證的測量線性范圍與廠商提供的線性范圍相近，相關(guān)系性數(shù)r2值為0.9836～0.9998，斜率（a）為0.9865～1.0207，均在廠商提供線性范圍之內(nèi)，與黃志基等［9］的研究結(jié)果相符，這種差異并不明顯，可能與不同實驗室的工作人員的操作、技術(shù)及環(huán)境等外部因素差異不明顯有關(guān)。

本研究嚴格按照CLSI C28-A2文件要求，在儀器在控的狀態(tài)下進行Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG參考區(qū)間的驗證。Vitros 5600分析儀檢測本地區(qū)健康人群血清Myoglobin、TropI、NTproBNP 及TβHCG含量在儀器推薦的生物參考區(qū)間范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)均≥95.0%，符合廠商提供的參考區(qū)間。

攜帶污染是評價標本檢測前、后受其他標本污染嚴重程度的指標［10-15］。由于Vitros 5600分析儀在加樣和檢測前，都會自動沖洗加樣針，且在測試過程使用了一次性吸頭和反應杯，極大降低了發(fā)生攜帶污染的潛在風險。本研究的驗證結(jié)果表明，Vitros 5600分析儀檢測Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG的攜帶污染率極低，為0.096%～0.180%，符合儀器廠商要求［16］。

4 結(jié)語

Vitros 5600分析儀檢測Myoglobin、TropI、NTproBNP及T-βHCG的方法學性能良好，符合有關(guān)文件的規(guī)定和要求，能為臨床快速提供準確、可靠的檢驗結(jié)果，能夠滿足急診檢驗工作的需要。

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①深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科 廣東 深圳 518129

②深圳市光明新區(qū)人民醫(yī)院檢驗科 廣東 深圳 518106

③深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院檢驗科 廣東 深圳 518109

［文章編號］1672-8270（2016）05-0038-04 ［中圖分類號］ R446.6

［文獻標識碼］A

DOI:10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.05.013

作者簡介

收稿日期：2016-01-20

The performance evaluation of emergency immunological parameters in Johnson Vitros 5600 fully automatic biochemical analyzer

LIN Li-yun， LIU Xiao-jun， LIU Ai-sheng

China Medical Equipment，2016，13（5）:38-41.

［Abstract］ Objective: To have the performance verification of Johnson Vitros 5600 fully automatic biochemical analyzer （hereinafter referred to as Vitros 5600 analyzer） emergency immunological parameter is to provide more accurate and more efficient service for the patients in emergency inspection items. Methods: According to the clinical laboratory standards institute （CLSI） evaluation criterion and Johnson validation plan， we verified the precision， accuracy， linear range， reference range， and carry pollution rate detection indexes of Myoglobin， Troponin I （TropI）， N-terminal brain natriuretic titanium （NTproBNP） and total beta human chorionic gonadotropin （TβHCG） about the Vitros 5600 analyzer emergency projects evaluated the performance of the analyzer. Results: The batch precision CV of Myoglobin， TropI， NTproBNP and TβHCG tested by Vitros 5600 analyzer is 0.58～2.02%， ＜ 2.5%， and the inter assay CV is 1.43～3.15%， ＜ 5.0%. Accuracy relative bias is -3.52～4.21%. Linearity relationship is good within the scope of testing， r2is 0.9836～0.9998， and the slope （a） is 0.9865～1.0207. Carry pollution rate is 0.096～0.180%. Reference range verification coincidence rate is R≥95%. Conclusion: The detection index performance of Vitros 5600 analyzer detecting immune emergency projects is good. It can meet the demand of emergency immune inspection work.

［Key words］Biochemical immunity analyzer； Emergency projects； Immune； Performance； Evaluation