柴胡三參膠囊對缺血性心律失常大鼠模型血清前列環素、血栓素A2及CRP的影響

劉建和，王建國，王　敏，劉錦霞，周　正，唐　銀

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柴胡三參膠囊對缺血性心律失常大鼠模型血清前列環素、血栓素A2及CRP的影響

劉建和1，2，王建國3，王敏1，2，劉錦霞3，周正3，唐銀3

1.湖南中醫藥大學第一附屬醫院(長沙 410007)，E-mail：591623614@qq.com；2.湖南中醫藥大學中醫診斷學湖南省重點實驗室；3.湖南中醫藥大學

摘要：目的 探討柴胡三參膠囊對缺血性心律失常大鼠血清中前列環素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)及C反應蛋白(CRP)含量的變化，進一步明確其抗心律失常的作用機制。方法 將實驗大鼠隨機分為空白組、假手術組、模型組、柴胡三參膠囊(青蒿)組(青蒿組)、柴胡三參膠囊(常山)組(常山組)、胺碘酮組、穩心顆粒組，每組10只，觀察各組大鼠結扎后心電圖改變及血清中PGI2、TXA2及CRP含量變化。結果柴胡三參膠囊能夠降低缺血性心律失常的發生率(P<0.05)，升高血清中PGI2水平(P<0.01)，降低TXA2(P<0.05)、CRP(P<0.01)含量。結論 柴胡三參膠囊通過升高血清中的PGI2、降低TXA2及CRP的發揮達到抗心律失常的作用。

關鍵詞：缺血性心律失常；柴胡三參膠囊；前列環素；血栓素A2；C反應蛋白

在心血管系統疾病中，由于各種原因導致的心臟供血不足已是一種病理狀態，而這種病理狀態得不到及時恢復亦會引發一系列的連鎖反應，如各種類型的心肌缺血均可引起心律失常，同時心肌缺血得到治療后，尚有可能發生再灌注損傷，其常見臨床表現形式為惡性心律失常。研究表明炎癥反應及細胞微環境的改變是急性心肌梗死發展的一個重要過程常見的炎癥時相反應蛋白及氧自由基的大量活化反應，不僅與急性心肌梗死(AMI)密切相關，而且與梗死后心律失常與再灌注損傷的發生均存在密切關系。通過對缺血性心律失常大鼠模型的研究，檢測血清中前列環素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)的變化，探討柴胡三參膠囊抗心律失常的機制；檢測血清C反應蛋白(CRP)含量，觀察柴胡三參膠囊對心肌再灌注損傷的抗炎保護作用。

1材料與方法

1.1實驗動物清潔級Wistar大鼠70只，雌雄各半，體重200 g±20 g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供[許可證編號：SCXK(湘)2012-0001，動物合格證號(11400700061625，11400700070275)]。

1.2實驗藥物與試劑柴胡三參膠囊(SHSS)，湖南中醫藥大學第一附醫院制劑室生產提供，柴胡三參膠囊(青蒿)，批號：140403，柴胡三參膠囊(常山)，批號：140820；CRP試劑盒，由武漢貝茵萊生物科技有限公司提供(批號：201412)；前列環素試劑盒，由武漢貝茵萊生物科技有限公司提供(批號：201412)；血栓素試劑盒，由武漢貝茵萊生物科技有限公司提供(批號：201412)。

1.3實驗儀器RWD407型小動物呼吸機，深圳市瑞沃德生命科技有限公司；RM6280型多道生理信號采集處理系統以及圖像識別分析系統，成都儀器廠；光學顯微鏡，上海瀘星光學儀器有限公司。

1.4實驗分組與給藥將大鼠隨機分為7組：空白組、假手術組、模型組、柴胡三參膠囊(青蒿)組(青蒿組)、柴胡三參膠囊(常山)組(常山組)、胺碘酮組、穩心顆粒組，每組10只。分別予以生理鹽水、相應藥物灌胃，連續預給藥14 。給藥量按成人70 g、大鼠200 體表面積換算(公式為D2=D1×R2÷R1)，并按重量調整劑量。

1.5動物模型制備末次給藥30 min后大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.35 mL/100 g)進行麻醉，用生物信號采集器全程記錄Ⅱ導聯心電圖，氣管切開、插管、接呼吸機。打開胸腔，分離心包膜，輕掀左心耳，從左心耳下緣處進針，在肺動脈旁出針，結扎左冠狀動脈前降支，以Ⅱ導聯ST段明顯抬高或T波高聳，肉眼結扎線以下心臟表面區域顏色變暗為成功標志，結扎30 min后再灌注40 min。空白組腹腔只麻醉，不開胸、不結扎，假手術組只開胸不結扎。

1.6血清PGI2、TXA2、CRP的檢測腹主動脈血4 000 r/min離心，取血清，雙抗夾心ELISA法檢測血清PGI2、TXA2、CRP含量。

2結果

2.1心電圖統計分析在喂養及手術期間，因不明原因突然死亡，或麻醉意外，或多次結扎致大出血等死亡的剔除，未進入心電圖統計分析及最后數據統計；術后因惡性心律失常而死亡的大鼠進入心電圖統計分析，但不進入最后的數據統計。在實驗過程中，因室顫死亡13只，其中模型組4只，死亡率44.4%；青蒿組2只，死亡率12.5%；穩心顆粒組1只，死亡率11.1%；胺碘酮組4只，死亡率40.0%，常山組2只，死亡率22.2%。

2.2各組大鼠心律失常情況及評分與模型組相比，室性早搏(VP)、心室顫動(VF)發生次數、心律失常評分均降低，差異有統計學意義(P<0.01)；青蒿組、常山組與穩心顆粒組比較差異無統計學意義(P>0.05)；而胺碘酮組VP、VF發生次數及心律失常評分明顯高于穩心顆粒組，差異有統計學意義(P<0.01)。詳見表1。

表1　各組大鼠心律失常情況及評分

2.3各組前列環素、TXA2、CRP比較與模型組比較，青蒿組、常山組前列環素、TXA2、CRP差異有統計學意義(P<0.01)。詳見表2。

表2　各組前列環素、TXA2、CRP比較(±s)

3討論

目前，醫學界在心律失常的防治上達成的共識作為藥物選擇的首要考慮點，重在治療引起心律失常的病因，而不僅僅是對心律失常的對癥治療。強調病因治療，即改善產生心律失常的機制，比如改善心肌供血、減輕炎癥反應等[1]。從此共識出發，中醫中藥在心律失常的防治上大有可挖掘之處。心悸的基本病機為少陽不和，治法為和解定悸。柴胡三參膠囊是由小柴胡湯加減而來。方中以柴胡為君，達肝入少陽，疏泄肝郁、升發肝氣、和解少陽之邪；配伍黃芩，清泄少陽濕熱之邪，柴胡+黃芩經典和法配伍；臣以法半夏下氣化痰，丹參活血清心，苦參通利清火，青蒿截邪并配合柴胡和解少陽之邪；黨參、甘草緩急益氣，調和諸藥共為佐使。全方合用標本兼治，邪去而正安，又扶正兼祛邪，以達和解穩律之目的。前期研究已表明柴胡三參膠囊抗心律失常療效確切[2-5]。

炎癥反應是急性心肌梗死發展的一個重要過程，其與梗死后心律失常與再灌注損傷的發生均存在密切關系。相關研究表明：心肌細胞和間質的炎癥反應可直接導致膜電位變化[6]。臨床研究則認為CRP可作為急性心肌梗死及梗死后并發嚴重心律失常的預測因子。劉澤軍等[7]研究表明CRP與急性心肌梗死并發室性心律失常的發生率呈正相關，并且認為CRP可作為心肌梗死后并發危及生命的室性心律失常的基礎性參照。周建峰[8]采用胺碘酮治療室性心律失常取得較好療效，并在特發性心律失常、再灌注性心律失常發生率相對低的病例中發現，其血清超敏C反應蛋白含量相對較低。從反面推測超敏C反應蛋白與再灌注心律失常是存在聯系的。

缺血心肌在恢復血流再灌注過程中，PGI2/TXA2比值會較缺血狀態進一步降低，這會加重再灌注損傷，不利于缺血心肌功能的恢復。動物實驗表明：靜脈運用TXA2受體阻斷劑AH23848可減少再灌注后室顫的發生率。冠狀動脈內給予PGI2可減少缺血-再灌注室性心律失常的發生[9]。提示TXA2可誘發再灌注性心律失常，PGI2則具有抗再灌注心律失常作用。

在本實驗中，通過制造缺血性心律失常大鼠模型，檢測血清中CRP及PGI2、TXA2含量變化，結合心電圖統計分析結果表明，心律失常發生率低的柴胡三參膠囊組血清CRP、TXA2含量降低，PGI2含量升高，表明血清前列環素、血栓素及C反應蛋白是柴胡三參膠囊抗缺血性心律失常的作用靶點。

參考文獻：

[1]蔣文平.心律失常藥物治療的點評[J].中國心臟起搏與電生理雜志，2009，19(4)：243-245.

[2] 劉建和，易剛強，程丑夫.柴胡三參湯治療冠心病室性期前收縮臨床研究[J].中國中醫藥信息雜志，2005，12(11)：13-15.

[3] 劉建和，李群，何少平，等.柴胡三參膠囊對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響[J].中國中醫藥信息雜志，2012，11(17)：29-30.

[4] 劉建和，何少平，胡熙苒，等.柴胡三參膠囊對心肌缺血心律失常模型大鼠心肌細胞Ca2+及SERCA2a表達的影響[J].中華中醫藥雜志，2010，25(10)：35-37.

[5] 劉建和，胡熙苒，何少平，等.柴胡三參膠囊對實驗性心律失常保護作用的研究[J].中西醫結合心腦血管病雜志，2010，8(10)：35-38.

[6] Ward CA，Bazzazi H，Clark RB，et al.Actions of emigrated neutrophils on Na(+) and K(+) currents in rat ventricular myocytes[J].Prog Biophys Mol Biol，2006，90(1-3)：249-269.

[7] 劉澤軍，李晚珍，吳禮文.C-反應蛋白與急性心肌梗死并發室性心律失常相關性研究[J].中國醫學創新，2013，10(16)：44-45.

[8] 周建峰.胺碘酮治療心律失常的效果分析及其對血清超敏C反應蛋白的影響[J].中國醫藥指南，2012，11(10)：532-533.

[9]郭志凌.PGI2/TAX2失平衡與心肌缺血-再灌注[J].心血管病學進展，1995，16(5)：266-269.

(本文編輯郭懷印)

Influences of Chaihu Sanshen Capsule on Serum Prostacyclin，Thromboxan A2and C-reactive Protein in Model Rats with Ischemic Arrhythmia

Liu Jianhe，Wang Jianguo，Wang Min，Liu Jinxia，Zhou Zheng，Tang Yin

The First Affiliated Hospital，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，Hunan，China；Hunan Provincial Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Diagnostics，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，Hunan，China

Abstract：ObjectiveTo investigate the influences of Chaihu Sanshen capsule(CSC) on serum prostacyclin (PGI2)，thromboxane A2 (TXA2) and C-reactive protein(CRP) in model rats with ischemic arrhythmia.Methods The rats were randomly divided into blank group，control group，model group，CSC Qinghao group，CSC Changshan group，amiodarone group，Wenxin Keli group.The electrocardiogram changes，the levels of serum PGI2，TXA2 and CRP were observed.Results The incidence of ischemic arrhythmias，the levels of serum TXA2 and CRP reduced while the levels of serum PGI2 increased in CSC group(P<0.05 or P<0.01).ConclusionCSC can increase the levels of serum PGI2 and reduce the levels of serum TXA2 and CRP，which has antiarrhythmic effects.

Key words：ischemic arrhythmia；Chaihu Sanshen capsule；prostacyclin；thromboxance A2；C-reactive protein

基金項目：湖南省科技廳科研項目(No.2013SK3103)；湖南省中醫藥管理局重點課題(No.201303)；湖南省重點實驗室開放基金計劃項目(No.2014XNFZ03)；湖南省科技創新項目投資計劃，編號：[2014]658；2015年湖南省學位與研究生教育教改研究課題(No.JG2015B071)

中圖分類號：R541.7R285.5

文獻標識碼：A

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.11.010

文章編號：1672-1349(2016)11-1216-03

(收稿日期：2015-12-16)

·基礎醫學論著/研究·