西門子化學發光測定鐵蛋白標本稀釋方法的探討

石愛新 韋敏秀 藍宇利 李梵川

（廣西省南寧市上林縣人民醫院檢驗科，廣西 南寧 530500）

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西門子化學發光測定鐵蛋白標本稀釋方法的探討

石愛新 韋敏秀 藍宇利 李梵川

（廣西省南寧市上林縣人民醫院檢驗科，廣西 南寧 530500）

【摘要】目的 探討不同的稀釋介質與稀釋方式對化學發光免疫法測定血清鐵蛋白（FER）濃度的影響。方法 使用ADVIACE ntaur CP化學發光分析儀及配套的檢測鐵蛋白試劑（FER），分別對高濃度鐵蛋白標本進行三種不同稀釋介質以及稀釋倍數的稀釋測定，觀察三種不同稀釋介質以及稀釋倍數對測定結果的影響。結果 三種稀釋液10倍稀釋和50倍稀釋測定結果與相應理論值比較，差異都沒有統計學意義（P＞0.05），100倍稀釋測定結果都明顯高于理論值，差異都有統計學意義（P＜0.05 ）。結論 三種稀釋液對鐵蛋白測定不產生基質效應但稀釋方式的選擇是否合適將會對測定結果產生顯著的影響。

【關鍵詞】稀釋；化學發光免疫；鐵蛋白

鐵蛋白既是貧血的檢驗指標，也是一種腫瘤標志物，可用于多種腫瘤的診斷和療效觀察［1］，但由于腫瘤患者標本中的鐵蛋白濃度往往異常升高，常會超出儀器的檢測范圍，西門子CP化學發光測定鐵蛋白的上限是1650 ng/mL，高于此值報＞1650 ng/mL，需要對標本進行稀釋測定才能得出一個確定結果，因此，選擇稀釋液和稀釋倍數就成了一個關健問題。文獻報道各種稀釋介質對化學發光法檢測不同項目基質效應不同［2-3］。

1 材料與方法

1.1 儀器設備：德國西門子全自動化學發光免疫分析儀（ADVIACE ntaur CP）。

1.2 試劑：該儀器配套的檢測鐵蛋白試劑（FER）。批號：012234。

1.3 原料及樣本：質控血清采用儀器試劑配套的高中低值定值質控品，批號分別為：40220測定結果在定值范圍內，三個濃度水平CV均＜5%。

1.4 分析方法：用已知鐵蛋白確定濃度標本稀釋測定鐵蛋白，比較不同基質對結果的影響程度，選擇可接受的稀釋介質；用可接受的稀釋介質稀釋測定鐵蛋白超出線性范圍的標本，觀察熒光值與鐵蛋白濃度的關系，尋求鐵蛋白超出線性范圍標本適合的測定稀釋倍數。

1.5 數據處理：采用SPSS16.0統計軟件進行統計分析，用理論值為對照組，三種稀釋介質稀釋測定結果與理論值的差異配對t檢驗，以P ＜0.05差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 不同稀釋介質測定結果分析：30份已知鐵蛋白確定濃度標本，用西門子通用稀釋液、0.9%氯化鈉溶液、正常人血清分別稀釋測定，結果見表1。三種稀釋液10倍稀釋和50倍稀釋測定結果與相應理論值比較，差異都沒有統計學意義（P＞0.05），三種稀釋介質100倍稀釋測定結果都明顯高于理論值，差異都有統計學意義（P＜0.05）。

表1 三種稀釋介質稀釋標本測定鐵蛋白結果與稀釋倍數理論值結果比較（ng/mL）

2.2 超線性范圍樣品的稀釋測定結果分析：用0.9%氯化鈉溶液作為稀釋介質，對10份鐵蛋白＞1650 ng/mL的標本進行2～128倍比稀釋測定。

3 討 論

鐵蛋白是體內鐵的主要存在形式，相對分子質量445 kD，由24個亞基組成，其亞基成分分成H和L兩類，分量分別為21 kD和19 kD。鐵蛋白主要由網關內皮系統的吞筮細胞釋放出來，當鐵負荷增多時，鐵蛋白升高，在血中半壽期為27～30 h，為肝實質細胞所清除，最近發現，血清鐵蛋白增高與慢性腎臟疾病、心腦血管疾病、血液系統疾病及許多腫瘤性疾病有關，在疾病時鐵蛋白升高，緩解時降低，可作為疾病的動態觀察和判斷療效用。因此，能準確的測定鐵蛋白含量具有重要現實意義。

本研究用0.9%氯化鈉溶液，通用稀釋液，正常人血清作為稀釋介質稀釋測定已知高值鐵蛋白標本，50倍內稀釋測定結果與理論值具有很好的相關性，表明三種稀釋液對鐵蛋白測定并沒有基質效應，都可以選用，但通用稀釋液成本高，正常人血清難以收集，又有被感染風險，測底本也要成本投入，0.9%氯化鈉溶液成本低，易得到，比較實用。

30份已知鐵蛋白確定濃度標本，100倍稀釋測定結果明顯高于理論值，表明過度稀釋不可取，而10份超高值標本2倍稀釋測定結果也明顯高于其他稀釋倍數的結果，表明稀釋倍數不夠也不行。免疫反應遵循著名的海德堡曲線，計算曲線呈“S”形，是非線性的，在非檢測區曲線的上下端都相對走平，對結果產生較大誤差，檢驗報告結果時，要乘上稀釋倍數，所有的互差也同時放大相應的倍數，誤差就會更明顯。所以，化學發光測定的稀釋液和稀釋方式的選擇應慎重。在臨床工作中應結合實際情況多嘗試比較，否則將會對測定結果產生顯著的影響，影響臨床診斷和治療。

參考文獻

［1］ 丁繼敏，范維坷.血清鐵蛋白與惡性腫瘤［J］.國際檢驗醫學雜志，1993，14（4）:152-154.

［2］ 朱毅，張順.電化學發光法檢測高值甲胎蛋白標本的稀釋方法及其溝狀效應［J］.腫瘤防治研究，2011，38（4）:465.

［3］ 趙敏，笪宏華.甲功五項化學發光免疫分析的基質效應對臨床測值的影響［J］，現代生物醫學進展，2012，19（12）:3714-3718.

中圖分類號：R556

文獻標識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）02-0032-01