宋星桔,胡丹丹,鐘秀琴,陽愛國,郭 莉,毛光瓊,王 凝,閆 敏,汪 濤,古小彬,楊光友*
(1.四川農業大學動物醫學院,成都 611130;2.四川省動物疫病預防控制中心,成都 610041)
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細粒棘球絳蟲銅鋅超氧化物歧化酶基因的表達與特征分析
宋星桔1,胡丹丹1,鐘秀琴1,陽愛國2,郭莉2,毛光瓊2,王凝1,閆敏1,汪濤1,古小彬1,楊光友1*
(1.四川農業大學動物醫學院,成都 611130;2.四川省動物疫病預防控制中心,成都 610041)
摘要:旨在探討Eg-SOD基因的特征及其在細粒棘球絳蟲上的抗氧化作用。通過原核表達得到重組Eg-SOD,對其進行酶活性測定、免疫印跡、ELISA以及免疫熒光定位分析。經原核表達出的重組Eg-SOD蛋白為可溶性蛋白,以羥胺法測定其酶學活性,可達(464.55±19.99)U·mg-1。免疫印跡結果顯示,該蛋白質能夠被實驗室人工感染細粒棘球蚴的小鼠陽性血清所識別,具有較強的反應原性;ELISA分析顯示,重組Eg-SOD對人工感染細粒棘球蚴的小鼠血清和自然感染包蟲病的綿羊血清檢出率均為100%,而對細頸囊尾蚴的交叉反應為37.5%,提示該蛋白質可以作為潛在的診斷候選分子。免疫熒光定位顯示該蛋白質廣泛分布于成蟲和原頭蚴的組織間隙,以及少量分布于表皮。本研究對Eg-SOD的特點進行了初步的探討,并揭示該蛋白質與蟲體的抗氧化損傷有著密切的聯系。
關鍵詞:細粒棘球絳蟲;銅鋅超氧化物歧化酶;熒光定位
細粒棘球絳蟲(Echinococcusgranulosus)的中絳期幼蟲(細粒棘球蚴)寄生于人和動物的肝和肺等器官內,引起人和動物的細粒棘球蚴病(又稱為囊型包蟲病)。在中國,有25個省、市、自治區有包蟲病病例的報道,其中以西部牧區發病最為嚴重[1-2]。……