柴胡—黃芩藥對(duì)配伍前后有效成分比較研究

潘 燕，孫立弟

（大連大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116622）

柴胡—黃芩藥對(duì)配伍前后有效成分比較研究

潘 燕，孫立弟

（大連大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116622）

為深入探討柴胡黃芩藥對(duì)配伍機(jī)制，本文對(duì)柴胡黃芩藥對(duì)配伍前后有效成分變化進(jìn)行研究,運(yùn)用HPLC色譜法對(duì)柴胡藥材、黃芩藥材、柴胡單煎液、黃芩單煎液、柴胡黃芩藥對(duì)合煎液中柴胡皂苷a和黃芩苷的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示柴胡皂苷a含量（%）：柴胡藥材（醇提）1.373%，柴胡單煎液1.244%，柴—黃合煎液1.301%；黃芩苷含量（%）：黃芩藥材（醇提）23.987%，黃芩單煎液13.429%，柴-黃合煎液23.300%。合煎液中有效成分的含量高于單煎液中有效成分的含量（以柴胡皂苷a、黃芩苷為指標(biāo)），說明藥對(duì)配伍后會(huì)明顯增加藥材中一些有效成分的溶出。

柴胡；黃芩；柴胡皂苷a；黃芩苷；高效液相色譜法

中藥“藥對(duì)”作為中藥方劑中的最小配伍單元，是以中醫(yī)基本理論為原則，針對(duì)治法選擇性地應(yīng)用與之性味、功用相匹配的兩味中藥，在臨證應(yīng)用中形成一種較為固定的組合形式。“藥對(duì)”理論在相當(dāng)大的程度上反應(yīng)了方劑配伍關(guān)系，是歷代醫(yī)家積累臨證用藥經(jīng)驗(yàn)的升華。

柴胡、黃芩是臨床常用的配伍藥對(duì)，黃芩疏風(fēng)清肺、宣肺止咳，柴胡疏肝和陽、和解表里，二者合用具有清熱疏肝，和解少陽之功效，在臨床上應(yīng)用非常廣泛[1]。

1 材料與儀器

1.1 藥材

柴胡購自安徽省源和堂藥業(yè)股份有限公司，黃芩購自安國市健仁藥材有限公司，經(jīng)大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院高松副教授鑒定均為正品。

1.2 藥品與試劑

標(biāo)準(zhǔn)品：柴胡皂苷a標(biāo)準(zhǔn)品（中國食品藥品檢定研究院），批號(hào)為：11077-200405。

黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品（中國食品藥品檢定研究院），批號(hào)為：110715-201016。

主要試劑：乙腈：色譜純，Tedia，United States of America；甲醇：色譜純，Tedia，United States of America；乙醇：分析純，沈陽市蘇家屯區(qū)化工廠。

1.3 主要儀器

高效液相色譜儀HITACHI L 2000，日本日立；檢測(cè)器HITACHI UV-detector 2-2400；工作站，色譜數(shù)據(jù)工作站N-2000，浙江大學(xué)智達(dá)信息工程研究所。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 藥材提取

柴胡：稱取干燥至恒重的柴胡粉末2.0 g，置于500 mL的圓底燒瓶中，用含5%氨水的70%乙醇溶液回流提取三次，每次1 h，合并三次所得濾液，回收乙醇，將濃縮液分別用正丁醇100 mL萃取四次，合并萃取液，蒸干溶液，得到固體殘?jiān)眉状既芤喝芙猓咳芙夂螅儆眉状既芤憾ㄈ葜?50 mL的容量瓶中，密封保存，制得柴胡藥材樣品。黃芩：稱取干燥至恒重的黃芩粉末0.3 g，用40 mL70%乙醇加熱回流提取3 h，濾液濃縮后置100 mL容量瓶，加入70%乙醇定容至刻度，搖勻。精密量取1 mL于10 mL容量瓶，用甲醇定容，制得黃芩藥材樣品。

2.2 水煎液樣品制備

⑴柴胡-黃芩合煎液：稱取柴胡40.0 g、黃芩30.0 g，混合均勻后，用蒸餾水加熱煎煮提取2次，合并2次提取液，濃縮至折合原藥材濃度1 g/mL，精確量取1 mL置10 mL容量瓶，甲醇定容，制得合煎液樣品。

⑵柴胡單煎液：稱取柴胡40.0 g，處理方法同上，制得柴胡單煎樣品。

⑶黃芩單煎液：稱取黃芩30.0 g，處理方法同上，制得黃芩單煎樣品。

2.3 有效成分HPLC含量測(cè)定

柴胡皂苷色譜條件。色譜柱：Hypersil ODS-2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：乙腈－水（45:55）；柱溫：25℃；檢測(cè)波長：210 nm；流速：1.0 mL/min；分析時(shí)間：40 min。

黃芩苷色譜條件[2]。色譜柱：Hypersil ODS-2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；柱溫：25℃；檢測(cè)波長：280 nm；流速：1.0 mL/min；流動(dòng)相：甲醇－水—磷酸（47:53：0.2）；分析時(shí)間：40 min。

對(duì)照品溶液的制備。柴胡皂苷a：精密稱取柴胡皂苷a標(biāo)準(zhǔn)品2.0 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1 mL含柴胡皂苷a0.20 mg）。黃芩苷：精密稱取黃芩苷對(duì)照品3 mg，加甲醇制得每1 mL含30 ug的溶液，即得。

供試品溶液的制備。分別取制得的藥材樣品、單煎及合煎液樣品，微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，待測(cè)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

HPLC測(cè)定結(jié)果顯示，合煎液中的柴胡皂苷a的含量為1.301%，單煎液中柴胡皂苷a的含量為1.244%；合煎液中黃芩苷的含量為23.300%，單煎液中黃芩苷的含量為13.429%。

對(duì)照品和供試品色譜圖見圖1、圖2、圖3、圖4；實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1、表2。

圖1 柴胡皂苷a對(duì)照品色譜圖

圖2 柴胡單煎液色譜圖

圖3 黃芩苷對(duì)照品色譜圖

圖4 黃芩單煎液色譜圖

表1 供試品中柴胡皂苷a含量

表2 供試品中黃芩苷含量

4 討論

（1）柴胡、黃芩中所含化學(xué)成分多種多樣，本次研究主要以柴胡中的主要有效成分柴胡皂苷a，以及黃芩中的主要有效成分黃芩苷為指標(biāo)，對(duì)藥對(duì)配伍前后的化學(xué)成分變化進(jìn)行研究。

（2）HPLC測(cè)定結(jié)果顯示，合煎液中的柴胡皂苷a的含量（1.301%）略高于單煎液中柴胡皂苷a的含量（1.244%）；合煎液中黃芩苷的含量（23.300%）要明顯高于單煎液中黃芩苷的含量（13.429%）。

（3）研究結(jié)果表明，柴胡－黃芩藥對(duì)配伍后會(huì)明顯增加藥材中一些有效成分的提出，這些組份有可能是藥理學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)的黃芩柴胡配伍后藥效增強(qiáng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。

[1]呂富銀.黃芩常用藥對(duì)淺述[J].世界中醫(yī)藥,2010(9):353-354.

[2]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典:第I部[M].中國醫(yī)藥科技出版社,2010:282.

Study on the Effective Components Changes of the Radix Bupleuri-Scutellaria Baicalensis Herbal Pair before and after Compatibility

PAN Yan,SUN Li-di
(College of Medicine,Dalian University,Dalian 116622,China)

To further investigate the compatibility mechanism of Radix Bupleuri-Scutellaria baicalensis herbal pair,HPLC method was applied to assay the contents of saikosaponin a and baicalin in Radix Bupleuri or Scutellaria baicalensis medicinal materials,their single decoction solution and compound decoction solution.Results showed that the content of saikosaponin a in the Radix Bupleuri is 1.373%,in the single decoction is 1.244%and in the compound decoction is 1.301%;the content of baicalin in the Scutellaria baicalensis is 23.987%,in the single decoction is 13.429%and in the compound decoction is 23.300%.In conclusion,the content of the effective components in the compound decoction exceed the content in the single decoction(the saikosaponin and the baicalin as the index),the dissolved quantity of effective components increased after the compatibility of medicines.

Radix Bupleuri;Scutellaria baicalensis;saikosaponin a;baicalin;HPLC

R285

：A

：1008-2395(2016)06-0078-04

2016-09-05

遼寧省大學(xué)生校外實(shí)踐教育基地建設(shè)項(xiàng)目（20160321）。

潘燕（1972-），女，講師，研究方向：中藥化學(xué)成分的提取分離、分析鑒定。