須糖多孢菌Saccharopolyspora pogona的核糖體工程改造對丁烯基多殺菌素合成的影響

羅林根，楊燕，魏慧，穰杰，唐瓊，胡勝標(biāo)，孫運軍，余子全，丁學(xué)知，夏立秋湖南師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 微生物分子生物學(xué)國家重點實驗室培育基地，湖南　長沙　410081

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須糖多孢菌Saccharopolyspora pogona的核糖體工程改造對丁烯基多殺菌素合成的影響

羅林根，楊燕，魏慧，穰杰，唐瓊，胡勝標(biāo)，孫運軍，余子全，丁學(xué)知，夏立秋
湖南師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 微生物分子生物學(xué)國家重點實驗室培育基地，湖南長沙410081

羅林根, 楊燕, 魏慧, 等. 須糖多孢菌Saccharopolyspora pogona的核糖體工程改造對丁烯基多殺菌素合成的影響. 生物工程學(xué)報, 2016, 32(2): 259–263.

Luo LG, Yang Y, Wei H, et al. Effect of ribosome engineering on butenyl-spinosyns synthesis of Saccharopolyspora pogona. Chin J Biotech, 2016, 32(2): 259–263.

摘 要:核糖體工程是以微生物的各類抗生素抗性突變?yōu)楹Y選標(biāo)記，高效獲得次生代謝產(chǎn)物合成能力提高的突變株的一種育種新方法。通過核糖體工程技術(shù)，使用鏈霉素對須糖多孢菌Saccharopolyspora pogona進行抗性選育，以獲得高產(chǎn)丁烯基多殺菌素突變菌株。對原始菌株和所獲得的突變菌株代謝產(chǎn)物的研究發(fā)現(xiàn)，相對于原始菌株，其中突變株S13的丁烯基多殺菌素產(chǎn)量提高幅度最大，相比原始菌株提高了1.79倍。經(jīng)質(zhì)譜測定表明，其代謝物中比原始菌株多了一種丁烯基多殺菌素組分Spinosyn α1。對抗性突變株S13的DNA序列進行分析，發(fā)現(xiàn)在編碼核糖體S12蛋白的rpsL基因保守區(qū)域中出現(xiàn)點突變，第314位和第320位的胞嘧啶(C)分別突變?yōu)橄汆堰?A)和胸腺嘧啶(T)，對應(yīng)的氨基酸殘基分別由脯氨酸突變?yōu)楣劝滨０?，丙氨酸突變?yōu)槔i氨酸。研究顯示，突變株S13遺傳穩(wěn)定性良好。

關(guān)鍵詞:核糖體工程，放線菌，丁烯基多殺菌素，鏈霉素，次……