Ang2mRNA在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義

過(guò)團(tuán)文

Ang2mRNA在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義

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目的 觀察Ang2mRNA在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞的表達(dá)并對(duì)其臨床意義做出簡(jiǎn)要評(píng)價(jià)。方法 選擇白血病患者80例，根據(jù)患者臨床表現(xiàn)、免疫分型、細(xì)胞形態(tài)學(xué)以及遺傳學(xué)特征等分為初治組、復(fù)發(fā)組、難治組、緩解組，各20例，另?yè)袢?0名健康體檢者設(shè)為對(duì)照組。對(duì)比各組之間Ang2mRNA表達(dá)水平差異，并對(duì)其臨床意義做出簡(jiǎn)要評(píng)價(jià)。結(jié)果 初治組患者Ang2mRNA水平為5.46，復(fù)發(fā)組為1.54，難治組為8.66，初治組Ang2mRNA水平顯著高于對(duì)照組與緩解組（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組與難治組Ang2mRNA水平亦高于對(duì)照組與緩解組(P＜0.05)；初治組、復(fù)發(fā)組與難治組之間Ang2mRNA水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。患者初治時(shí)白細(xì)胞計(jì)數(shù)中位數(shù)為11.88，范圍為0.29～417，血紅蛋白中位數(shù)為76.54，范圍為2.8～125，外周血原幼稚細(xì)胞比例中位數(shù)為40.01，范圍為0～99，白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、外周血原幼稚細(xì)胞比例不存在顯著相關(guān)性。結(jié)論 Ang2mRNA表達(dá)水平在不同患者中具有顯著差異，可將其作為判斷緩解率的有效標(biāo)準(zhǔn)。

Ang2mRNA；急性髓系白血病；骨髓細(xì)胞；表達(dá)

急性髓系白血病主要表現(xiàn)為大量白血病細(xì)胞增殖、聚集在骨髓造血組織中，抑制正常造血功能的發(fā)揮，是一種發(fā)生于造血干細(xì)胞內(nèi)的惡性增殖性疾病[1]。近年來(lái)其發(fā)生率與病死率都呈現(xiàn)出急劇上升趨勢(shì)。隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，大部分患者經(jīng)化療等治療后可以達(dá)到完全緩解，但仍有患者會(huì)表現(xiàn)出復(fù)發(fā)并發(fā)展成為難治性白血病，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[2]。深入了解其發(fā)病機(jī)制，優(yōu)化治療方案對(duì)提高患者預(yù)后生存質(zhì)量有著重要意義。本文討論主要圍繞Ang2 mRNA在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義展開(kāi)，資料整理如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次觀察對(duì)象全部為2012年1月～2015年3月在進(jìn)賢縣人民醫(yī)院接受治療的急性髓性白血病患者，共80例，年齡16～56歲，平均年齡（42.7±8.3）歲，其中男56例，女24例；根據(jù)患者臨床表現(xiàn)、免疫分型、細(xì)胞形態(tài)學(xué)以及遺傳學(xué)特征等分為初治組、復(fù)發(fā)組、難治組、緩解組，各20例。另?yè)袢?0名對(duì)照組成員為同期來(lái)本院接受常規(guī)檢查的健康者。入院對(duì)患者進(jìn)行統(tǒng)一檢查，根據(jù)其細(xì)胞形態(tài)學(xué)、臨床表現(xiàn)、免疫分型等特征結(jié)果全部符合急性髓性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。各組觀察對(duì)象的一般基線資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 主要試劑與儀器 試劑：由天津TBD公司生產(chǎn)的人淋巴細(xì)胞分離液；由日本Takara公司生產(chǎn)提供的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒以及SYBR Green 1熒光定量PCR試劑盒；由廣州英俊公司生產(chǎn)提供的合成引物；由美國(guó)Sigma公司生產(chǎn)提供的瓊脂糖粉；由大連寶生物公司提供的100-2000bpDNA標(biāo)準(zhǔn)品。

儀器：離心機(jī)（北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司DT5-1B型）、PCR儀（上海啟前電子科技有限公司基因擴(kuò)增儀QIQIIAN-A100型）、紫外分光光度計(jì)（上海奧析科學(xué)儀器有限公司UV1902PC型）、凝膠圖像光密度分析儀（北京麥思奇高科技有限公司MSD-2000型）。

1.3 方法 分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，提取總DNA，并對(duì)DNA質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，同時(shí)對(duì)擴(kuò)增效率一致性進(jìn)行檢測(cè)，并使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次數(shù)據(jù)使用SPSS16.0軟件進(jìn)行處理，呈非正態(tài)分布的計(jì)量資料使用中位數(shù)表示，并用Mann-WhitneyUtest比較；采用log-rank檢驗(yàn)比較生存率；CoxRegression進(jìn)行單因素分析以及多因素分析。檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組中Ang2 mRNA表達(dá)情況 根據(jù)檢測(cè)結(jié)果可以看出，初治組患者Ang2 mRNA水平較高，顯著高于對(duì)照組與完全緩解組；復(fù)發(fā)組與難治組Ang2 mRNA水平亦高于對(duì)照組與緩解組；初治組、復(fù)發(fā)組與難治組之間Ang2 mRNA水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

表1 各組中Ang2 mRNA表達(dá)情況對(duì)照表（n）

2.2 Ang2 mRNA表達(dá)與臨床特征 檢驗(yàn)結(jié)果顯示，與患者初治時(shí)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、外周血原幼稚細(xì)胞比例等不存在顯著相關(guān)性見(jiàn)表2。

表2 Ang2 mRNA表達(dá)與臨床特征分析表

3 討論

白血病是危害人類(lèi)健康的常見(jiàn)惡性腫瘤，其中急性髓性白血病是其最常見(jiàn)類(lèi)型，臨床統(tǒng)計(jì)采用化療方式能夠使60%～80%的患者得到完全緩解，但是大部分患者會(huì)因?yàn)槟退幮远鴱?fù)發(fā)進(jìn)而轉(zhuǎn)變?yōu)殡y治性白血病，嚴(yán)重影響生命安全。

血管生成素是分泌型生長(zhǎng)因子，其中臨床研究較為深入的有兩種即Ang1、Ang2。其中在存在血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的情況下，Ang2能夠在血管不穩(wěn)定狀態(tài)下引起血管內(nèi)皮細(xì)胞及周?chē)|(zhì)對(duì)生長(zhǎng)因子的敏感性有所增強(qiáng)，起到促血管生成的作用，幫助血管重建；當(dāng)Ang2獨(dú)立存在時(shí)，其可以阻斷Ang1對(duì)血管的穩(wěn)定作用，減少血管數(shù)目，退化血管并發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡[4-5]。其在機(jī)體內(nèi)主要在血管重塑活躍的部位以及高度增生的腫瘤組織中進(jìn)行表達(dá)，可被視為是一種腫瘤血管生成的信號(hào)，當(dāng)其表達(dá)水平顯著在增加時(shí)，可能表示腫瘤處于快速增長(zhǎng)或轉(zhuǎn)移階段[6-7]。張勇等學(xué)者研究指出[8]，初治或復(fù)發(fā)的急性髓性白血病患者機(jī)體Ang2具有較高的陽(yáng)性表達(dá)率，本次觀察結(jié)果亦可以看出復(fù)發(fā)組與難治組患者表達(dá)水平較高，與其結(jié)果基本一致。本研究認(rèn)為其在機(jī)體內(nèi)的表達(dá)水平變化情況極大的反映了病情的變化，臨床可以通過(guò)其表達(dá)水平的變化情況預(yù)測(cè)病情變化，并以此作為調(diào)整治療方案的依據(jù)，有效提高患者預(yù)后效果。

綜上所述，可以將Ang2水平獨(dú)立作為急性髓系白血病病情發(fā)展的觀察指標(biāo)，有利于臨床治療的推進(jìn)。

[1] 劉理想.Ang2mRNA在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義[D].南方醫(yī)科大學(xué),2010.

[2] 武文斌.急性髓系白血病Kindlins和血管生成素表達(dá)研究[D].北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院),2011.

[3] 李超.誘導(dǎo)緩解化療方案治療老年急性髓系白血病的療效及預(yù)后[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2013,33(11):2659-2660.

[4] 谷大偉,馬莉.生存素與CD34在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞中的表達(dá)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,28(1):51-56.

[5] 許娜,周旋,肖小珍，等.急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞中上皮鈣黏著蛋白和β-連環(huán)蛋白的基因表達(dá)水平及其臨床意義[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2014,17(9):1013-1016,1020.

[6] 黃曉,王榮華,李冬云，等.急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞相關(guān)分子標(biāo)志物表達(dá)研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志,2014,22(5):1193-1198.

[7] 王艷茹,毛平,杜傳清，等.應(yīng)用焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)MEG3基因在急性髓系白血病中的甲基化狀態(tài)[J].廣東醫(yī)學(xué),2012,33(14):2101-2103.

[8] 張勇,孔佩艷,曾東風(fēng)，等.骨髓TPO及受體c-MPL表達(dá)變化在急性髓系白血病化療中的意義[J].腫瘤防治研究,2012,39(5):511-514.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.11.022

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