乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA臨床檢驗分析的應用價值探討

溫小云 方先松 邱芳

乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA臨床檢驗分析的應用價值探討

溫小云 方先松 邱芳

目的 研究乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA臨床檢驗的結果分析，探討其臨床應用價值。方法 選取350例乙肝病毒標記物模式不同的血清作為研究標本，測定乙肝病毒DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達情況，并分析其表達相關性。結果 除HBsAg+、HBcAb+外，在乙肝表面抗原陽性的各種模式中，乙肝病毒DNA在前S1抗原陽性中的陽性表達率均明顯高于其在前S1抗原陰性中的陽性表達率，差異具有統計學意義（P<0.05）。結論 HBV-DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達具有明顯的相關性，前S1抗原的陽性表達情況可以準確地提示HBV-DNA在乙肝患者中的復制情況，值得臨床檢驗推廣應用。

乙肝病毒標記物；血清標本；乙肝病毒DNA；臨床檢驗分析

乙型肝炎在我國的發病率逐年升高，嚴重影響人群健康，乙型肝炎的傳統診斷主要采用乙型肝炎病毒的標志物：乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體、乙肝核心抗體的檢測[1]。由于抗原變異、檢測方法、靈敏度等因素的影響，傳統的診斷方法無法判斷攜帶者并確診[2]。因此結合HBV-DNA的復制情況進行綜合診斷，對于減少誤診漏診具有十分重要的意義[3]。測定HBV-DNA水平的熒光定量PCR技術要求高、昂貴，近年來乙肝表面前S1抗原反映HBV-DNA復制情況的研究逐漸深入[4]，本研究選取350例乙型肝炎病毒標記物模式不同的血清作為研究標本，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標本選取了2014年6月～2015年6月贛南醫學院第一附屬醫院門診及體檢收集的350例乙型肝炎病毒標記物模式不同的血清標本，其中男162例，女188例，平均年齡（37.78±2.37）歲。所有患者均無嚴重的心血管疾病、腎病、糖尿病等疾病。

1.2 儀器與方法 酶標儀為奧地利產安圖（anthos）2010、洗板機為奧地利產安圖(anthos)fluido、PCR擴增儀為

ABI7300，HBV-M檢測試劑盒購自英科新創（廈門）科技有限公司，PreS1抗原檢測試劑盒購自上海復星長征醫學科學有限公司，HBV-DNA檢測試劑盒購自中山大學達安基因股份有限公司。采集患者的血液標本后立即進行血清的分離，無法及時檢測的標本置于－20℃的條件下保存。采用酶聯免疫吸附試驗法對乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體、乙肝核心抗體、前S1抗原進行檢測；采用熒光定量PCR法對乙肝病毒

DNA進行檢測，檢測水平低于1×102拷貝數/mL時為乙型肝炎病毒陰性，否則為陽性。比較乙型肝炎病毒DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原各種模式中的表達情況并分析其相關性。

1.3 統計學方法 采用SPSS16.0統計學軟件對實驗過程中采集得到的數據進行統計學處理，計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗；P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

HBV-DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達及相關性分析，除HBsAg+、HBcAb+外，在乙肝表面抗原陽性的各種模式中，乙肝病毒DNA在前S1抗原陽性中的陽性表達率均明顯高于其在前S1抗原陰性中的陽性表達率，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 HBV-DNA與前S1抗原抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達及相關性

3 討論

乙型肝炎是備受關注的全球衛生問題，我國是乙型肝炎大國，近年來的發病率逐年升高，嚴重影響患者的生命健康。乙型肝炎病毒是一種DNA病毒，可以通過血液、性接觸、呼吸道等多種途徑傳播，對人群健康產生極大的威脅，因此乙型肝炎的臨床診斷與治療十分重要[5]。

乙型肝炎病毒的表面標記物（即乙肝5項）的檢測診斷方法被廣泛地應用，但乙肝5項只能在一定程度上判斷患者有無病毒的感染及體內是否有抗體的產生，且由于抗原變異、特異性、檢測試劑的靈敏度、檢測方法的靈敏度等因素，使得傳統的乙肝5項診斷方法無法判斷患者是否為攜帶者，易造成漏診或誤診，影響醫療安全[6]。熒光定量PCR法能夠定量檢測患者體內乙型肝炎病毒DNA的水平，可以準確地衡量乙型肝炎病毒的感染與增殖情況，但PCR法對操作者的技術要求非常高，測量儀器價格高昂等因素限制了PCR法的臨床診斷應用[7]。隨著研究者對于乙型肝炎病毒表面標記物研究的不斷深入，近年來前S1抗原診斷方面的作用備受關注。有研究表明，前S1抗原在一定程度上能夠反映乙型肝炎病毒感染與復制增殖的情況，乙型肝炎病毒的侵入及在宿主細胞內的復制與前S1蛋白之間有著密切的聯系，前S1蛋白在乙型肝炎病毒的感染、增殖以及宿主產生免疫反應等方面有著非常顯著的作用[8]。本實驗中，在乙型肝炎表面抗原陽性的各種模式中，乙型肝炎病毒DNA在前S1抗原陽性中的陽性表達率均明顯高于乙型肝炎病毒DNA在前S1抗原陰性中的陽性表達率，差異具有統計學意義（P<0.05）。這表明乙肝病毒DNA與前S1抗原在乙型肝炎表面抗原陽性各種模式中的表達具有明顯的相關性，前S1抗原的陽性表達情況可以準確地提示乙肝病毒DNA在乙型肝炎患者中的復制情況，能夠很好的彌補傳統診斷方法漏診與誤診方面的不足，且測定成本較低、操作簡單，比熒光定量PCR法直接測定DNA含量有更實際的推廣性。

綜上所述，傳統的診斷方法乙型肝炎5項易造成漏診誤診，而前S1抗原的陽性表達情況可以準確地提示HBV-DNA在乙肝患者中的復制情況，有效避免漏診誤診、成本低、方法簡單，值得臨床檢驗分析上推廣應用。

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[2] 陳永剛，肇玉博，楊文濤.HBV血清標志物聯合Pre-S1抗原或水平及血清標志物關系的探討[J].中華醫院感染性雜志，2012，22(5):907-909.

[3] 鮑淑華，樓正青，高麗華.乙肝病毒標記物陽性表型血清標本HBVDNA水平分析[J].中華全科醫學，2014，11(6):977-978.

[4] 申煥君，陳敬銀，張中偉，等.慢性乙型肝炎患者HBV血清標志物與HBV-DNA的相關性分析[J].傳染病信息，2013，26(2):111-114.

[5] 張平和，林國躍，王萍，等.HBV前S2蛋白檢測與HBV-DNA和乙肝二對半模式相關性研究[J].醫學綜述，2011，17(1):139-140.

[6] 李彩東，吳斌段，正軍，等.乙型肝炎病毒基因分型與HBV-DNA水平及血清標志物關系的探討[J].中華醫院感染性雜志，2012，22(5):907-909.

[7] 蔡蘭蘭，李振雪，樊冰.乙肝病毒前S1抗原與乙肝血清標志物及HBV-DNA的相關性分析[J].醫學檢驗，2010，7(19):91-92.

[8] 胡淑芬，梁嘉琪，高慧，等.熒光定量聚合酶鏈反應定量檢測乙型肝炎病毒-DNA與酶聯免疫吸附試驗定性檢測乙型肝炎病毒血清標志物的對比分析[J].實用醫技雜志，2010，17(11):1012-1014.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.3.040

江西 341000 贛南醫學院第一附屬醫院輸血科 （溫小云 邱芳）贛南醫學院第一附屬醫院檢驗科 （方先松）