尼羅紅熒光染色法的優化及應用*

石健　張雯婕　馮汛　胡雨婷　瑤池

(南通大學　江蘇南通 226019)

?

尼羅紅熒光染色法的優化及應用*

石健張雯婕馮汛胡雨婷瑤池

(南通大學江蘇南通 226019)

摘要以自主篩選的小球藻為材料對尼羅紅熒光染色進行條件優化，并用該方法追蹤微藻在污水中的油脂含量變化。實驗發現，微藻只有經過超聲波破碎，染色才會出現熒光，DMSO的添加會增強熒光反應。最終確定其染色條件為：DMSO與藻液體積比為1∶5，超聲波破碎5 min后染色5 min，NR質量濃度1.5 μg/mL。在其應用方面發現，微藻的油脂積累量只有培養基的一半，說明污水不利于微藻油脂的積累；最佳采收時期為平穩期，此時微藻的產量和油脂含量達到最高。

關鍵詞小球藻尼羅紅超聲波污水油脂

0引言

微藻因其生長快速、產量大、油脂含量高成為生物柴油的熱門候選來源[1]。其中，小球藻具有高耐污、高含油特性，可利用污水飼養節約生產成本。因其兼具再生能源與污水處理的特點[2]，小球藻在微藻生物柴油的研究中引起了人們的廣泛關注。雖然已有大量的研究證明小球藻對污水處理的能力，但其在污水中的油脂積累情況卻研究較少。油脂的產量直接決定微藻生物柴油的生產價值，監測污水中小球藻的油脂含量對其工業化生產具有重要意義。

尼羅紅(Nile Red,NR)是一種脂溶性的熒光染料，可以準確地將細胞內脂類物質與其他貯藏物區分開[3], 因此經常被用于檢測動物以及微生物細胞內油脂情況。尼羅紅熒光染色法具有快速、簡便、靈敏，樣品需求量少且能連續活體檢驗等優點[4]，已在多種生物中證明了尼羅紅熒光染色的準確性。……