BA和KT對香樟莖段腋芽誘導的影響

李素華　韓浩章　張麗華

摘 要：該文以香樟的莖段為外植體，研究了兩種不同濃度的細胞分裂素6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）和激動素（KT）對腋芽誘導和生長的影響。結果表明：在香樟不定芽的誘導和形成過程中，BA較KT具有較大的活性，相同濃度下BA處理不定芽的誘導率、長度和芽上的葉數顯著高于KT處理，而KT處理有利于葉面積的增加；細胞分裂素濃度越高，不定芽的生長速度越快，葉片數量也越多。綜合來看，MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L為香樟腋芽誘導的最佳培養基配方。

關鍵詞：香樟；細胞分裂素；腋芽誘導

中圖分類號 S792.23 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）17-0029-02

Abstract：Taking the Cinnamomum camphora stem segments as explants，the effects of two different concentrations of cytokinin 6-Benzylaminopurine （6-BA） and excited hormone （KT） on bud induction and growth are studied. The results show that 6-BA has greater activity than KT in the camphor adventitious bud induction and formation，the adventitious bud induction rate treatment，length and leaf number of 6-BA is significantly higher than KT treatment under the same concentration. KT is conducive to the increase in leaf area，and higher concentrations of cytokinin， adventitious bud growth was faster，leaf number more. Overall，the best medium for inducing axillary buds of Cinnamomum camphora is MS+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.1mg/L.

Key words：Camphor；Cytokinin；Axillary bud induction

香樟[Cinnamomum camphora（L.） Presl]，為樟科樟屬常綠喬木，全株具樟腦香氣，是提取純天然香料的重要原料，其枝葉茂密、樹形優美，是城市綠化、園林景觀的良好樹種。香樟長期以來以種子繁殖為主，但播種繁殖會導致實生苗后代性狀變異，苗木參差不齊，且育苗周期長等[1-2]，而采用扦插繁育方法，又存在母株材料來源有限、生根難等問題。組織培養繁殖最大的優勢是繁殖系數高，繁殖周期短，幼苗生長整齊一致，而且能夠保持母本的優良特性。近年來，為滿足香樟的良種選育和優質種苗供應的需要，學者對香樟的組織培養已有不少研究，在不定芽誘導過程中普遍采用莖段作為外植體，以添加NAA與BA2種外源激素的MS培養基進行培養，且結論都不一致[3-6]，在一定生長素濃度下KT對不定芽形成的影響也少見報道。為此，筆者以香樟莖段為外植體，通過比較兩種不同的細胞分裂素6-BA和KT對不定芽誘導和生長的影響，以期找到適合香樟腋芽誘導的最佳培養基配方，旨在為香樟新品種的快繁和遺傳育種奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 供試材料于2016年6月上旬采于宿遷學院園林技術實驗中心香樟苗圃地，從7年生的健壯植株的中下部位剪取腋芽尚未萌動的幼嫩枝條作為離體培養材料。

1.2 試驗方法 選擇發育充實且無病蟲害的嫩枝，剪去葉片，切成2～3cm長的莖段，先用毛刷在自來水下清洗表面的塵土，然后用流水沖洗2～3h，放入干凈燒杯中待用。外植體消毒時先用75%的酒精消毒30s，再用2%NaclO滅菌20min，無菌水沖洗3～4次，然后用無菌紙吸干材料表面的水分，切除莖段兩端，最后把長為1～1.5cm帶2～3個腋芽的莖段接種在不同的培養基上。

1.3 培養條件 培養基共設4個處理，分別是處理1：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L；處理2：MS+KT1.0mg/L+NAA0.lmg/L；處理3：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.lmg/L；處理4：MS+KT2.0mg/L+NAA0.lmg/L。培養基均附加蔗糖30g/L，瓊脂7.5g/L，pH值為6.8，培養室溫度為25℃，光照強度為4 000Lx，光照時數為12h/d。每一處理接種30瓶，每瓶3個莖段。

1.4 數據統計與分析 40d后，統計腋芽萌發率（腋芽分化的個數/外植體的腋芽數）、不定芽長度、不定芽上的葉數和葉片長度。采用Excel進行制表，SPSS21.0進行數據分析。

2 結果與分析

外植體接種7d后小葉柄開始脫落、腋芽膨大，40d后各處理生長狀況的統計結果表1，不同處理的不定芽的生長情況見圖1。對試驗結果進行方差分析得出各處理間的誘導率、不定芽長度、不定芽葉數、葉長的F值分別為26.51、203.68、151.95、43.79，均大于F0.01（3，8）=13.90，說明各處理間的4個測定指標均存在極顯著差異，故進一步對統計結果進行多重比較。

從表1可以看出，當NAA為0.1mg/L時，細胞分裂素濃度為2.0mg/L的兩個處理的萌芽率均高于濃度為1.0mg/L的處理。從細胞分裂素種類來看相同濃度下BA較KT對腋芽誘導率更高，其中萌芽率最高的為處理3，與其他3個處理間呈極顯著差異。此外，從試驗中發現處理1、處理3的不定芽生長勢比處理2和處理4旺盛，葉片更幼嫩。從表1、圖1不定芽的長度和葉數來看，添加有BA的兩個處理明顯多于另外兩個處理，這與葉片長度的測定結果相反，培養基中添加有KT的兩個處理的不定芽上的葉片平均長度顯著高于含有BA的處理。

3 結論與討論

本試驗結果表明，在1.0～2.0mg/L濃度范圍內，細胞分裂素濃度越高，越有利于香樟腋芽的誘導，這與王長憲等的報道一致[7]。但不同激素對香樟腋芽誘導也有較大影響，BA與KT相比，相同濃度下前者的誘導率較高。此外，細胞分裂素對不定芽的生長和葉片分化也有較大影響，培養中添加有BA的兩個處理的不定芽長度和葉數顯著高于含有KT的兩個處理，周菊華等在研究外源激素對麝香石竹莖段外植體不定芽形成的影響時指出BA在高頻率誘導不定芽形成的同時，對所形成的不定芽伸長生長、鮮干重增長、干重百分率提高有明顯的促進作用，KT則不然[8]，本研究表明，在香樟不定芽誘導和形成過程中，BA較KT具有較大的活性，其在促進不定芽分化的同時也促進了不定芽的伸長生長。從激素水平來看濃度越高不定芽的伸長速度越快、葉數越多，但2.0mg/LKT較1.0mg/LKT的兩個處理未呈現明顯差異，KT相對于BA有利于葉面積的增加。綜合來看，香樟腋芽誘導的最佳培養基為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.10mg/L，其腋芽誘導率最高、不定芽生長速度最快、葉片較為幼嫩，這對獲得具有形成不定芽能力并可擴繁的叢生芽非常重要。

參考文獻

[1]連芳青，熊偉.樟樹莖段的離體培養和植株再生[J].江西林業科技，1992（3）：20-21.

[2]黃建，閔煒.樟樹幼葉愈傷組織誘導培養基的篩選[J].江西農業大學學報，1993（4）：393-396.

[3]鄒暉，陳永快，王偉英.香樟組培快繁技術研究進展[J].福建農業科技，2009（1）：71-72.

[4]吳幼媚，王以紅，蔡鈴，等.香樟優良無性系快繁技術的研究[J].基因組學與應用生物學，2006，25（1）：60-64.

[5]張椿芳，王建軍，何月秋.香樟莖段組培快繁技術[J].福建林業科技，2015，42（4）：128-132.

[6]何月秋，王建軍.香樟涌金的組織培養和植株再生[J].南方農業學報，2015，46（1）：96-100.

[7]王長憲，劉靜，黃艷艷，等.山東抗寒香樟組培快繁體系的建立[J].山東農業大學學報（自然科學版），2006，37（4）：513-516.

[8]周菊華，鄭曉霞，梁海曼.NAA BA 和KT對麝香石竹不定芽形成的影響[J].上海農業學報，1992（3）：79-83. （責編：張宏民）