火龍果總黃酮提取工藝優(yōu)化

孫艷 楊志偉

摘要：【目的】優(yōu)化火龍果總黃酮提取工藝條件，為火龍果的綜合開發(fā)與利用提供參考依據(jù)。【方法】以紅皮紅肉種火龍果為試驗(yàn)材料，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化火龍果總黃酮的乙醇回流提取工藝，并通過響應(yīng)面法優(yōu)化其超聲波輔助提取工藝，確定最佳提取工藝條件。【結(jié)果】乙醇回流提取火龍果總黃酮的最佳工藝條件為：乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、提取溫度80 ℃、料液比1∶25、提取時(shí)間2 h，在此條件下火龍果總黃酮提取量為18.07 mg/g；超聲波輔助提取火龍果總黃酮的最佳工藝條件為：超聲波功率250 W、乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、料液比1∶25、提取溫度80 ℃、超聲波時(shí)間20 min，在此條件下火龍果總黃酮提取量為19.58 mg/g。【結(jié)論】超聲波輔助提取法操作簡單、耗時(shí)短、提取效率高，效果優(yōu)于乙醇回流提取法，可用于火龍果總黃酮的工業(yè)化提取。

關(guān)鍵詞： 火龍果；總黃酮；提取工藝；正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)；響應(yīng)面法

中圖分類號(hào)： R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：2095-1191（2016）06-1001-08

0 引言

【研究意義】火龍果又稱紅龍果、青龍果、仙蜜果等，為仙人掌科（Cactaceae）量天尺屬（Hylocereus undatus）植物，原產(chǎn)于墨西哥及美洲中南部的熱帶森林地區(qū)，是一種熱帶亞熱帶新型水果（Nerd et al.，2002），目前在我國海南、廣西、廣東、貴州、福建等地已有一定規(guī)模種植。火龍果富含蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、有機(jī)酸、維生素及水溶性膳食纖維等，礦物質(zhì)元素含量也較豐富，尤其是鉀、鈣、鎂、磷、鐵含量較高（陳杰等，2004；Villalobos-Gutiérrez et al.，2012），具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。已有研究表明，火龍果果肉及果皮中含有的多酚類和黃酮類物質(zhì)具有抗氧化、清除自由基等作用，并可抑制BF16黑色素瘤細(xì)胞的生長（Wu et al.，2006）。因此，研究火龍果中總黃酮的提取工藝，對(duì)火龍果的深入開發(fā)利用具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】目前，國內(nèi)外關(guān)于火龍果中黃酮類化合物的研究主要集中在其含量測定及抗氧化活性分析方面。郭璇華等（2010）優(yōu)化火龍果莖中黃酮類化合物的分光光度法測定條件及其分離提取條件，結(jié)果表明，最佳分離提取條件為：乙醇體積分?jǐn)?shù)70%、料液比1∶40、提取溫度75 ℃、提取時(shí)間3 h；火龍果莖干品中黃酮類化合物的含量為0.49%。王曉波等（2011）通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化乙醇回流提取火龍果皮總黃酮的工藝條件，并評(píng)價(jià)火龍果皮乙醇提取物的抗氧化活性，結(jié)果表明，在最佳提取工藝條件（乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、料液比1∶30、溫度80 ℃、時(shí)間0.5 h）下提取兩次，火龍果皮總黃酮的提取率為10.9 mg/g；火龍果皮中總黃酮具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性。Kim等（2011）研究表明，火龍果果肉和果皮中均分布有不同含量的酚類物質(zhì)及黃酮類化合物，其中果皮提取物具有更高的清除自由基活性。王曉波等（2012）的研究結(jié)果表明，火龍果皮總黃酮對(duì)羥基自由基有一定的清除效果，對(duì)菜籽油有明顯的抗氧化作用，且呈量效關(guān)系。羅小艷和郭璇華（2014）采用紫外—可見分光光度法測得火龍果花中總黃酮含量為0.747%。【本研究切入點(diǎn)】黃酮類化合物具有抗炎、抗過敏、抗腫瘤、抗?jié)兊茸饔茫€有抑菌抗病毒、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、降血脂活性等功效（Porfírio et al.，2014；段浩平等，2014），但目前對(duì)火龍果總黃酮提取多采用乙醇回流法，尚未見利用超聲波輔助提取的相關(guān)研究報(bào)道。【擬解決的關(guān)鍵問題】以紅皮紅肉種火龍果為試驗(yàn)材料，分別采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法優(yōu)化火龍果總黃酮的乙醇回流提取工藝和超聲波輔助提取工藝，確定火龍果總黃酮的最佳提取工藝條件，為火龍果的綜合開發(fā)與利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)選用廣西產(chǎn)的紅皮紅肉種火龍果，購自南寧市五里亭綜合批發(fā)市場，于4 ℃下貯藏備用。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品購自中國食品藥品檢定研究院，乙醇、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、硝酸鋁均為國產(chǎn)分析純，購自廣東光華科技股份有限公司。主要儀器設(shè)備：紫外分光光度計(jì)（UV-2102PC，上海尤尼柯公司）、水浴鍋（HH-S2，金壇市醫(yī)療儀器廠）、智能溫控雙頻超聲波合成萃取儀（XH-2008DE，北京祥鵠科技發(fā)展有限公司）、粉碎機(jī)（FW100，天津市泰斯特儀器有限公司）、電子天平（FA2204，上海市安亭電子儀器廠）。

1. 2 火龍果總黃酮提取工藝流程

火龍果→清洗去皮→真空冷凍干燥、粉碎→乙醇回流提取（超聲波提取）→抽濾→定容→火龍果總黃酮提取液。

1. 3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

參考鄭義等（2014）的方法，試驗(yàn)重復(fù)操作3次，取其平均值，以蘆丁質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（C）、吸光值為縱坐標(biāo)（A），繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為A=0.0120C-

0.0032（R2=0.9997）。

1. 4 總黃酮含量測定

取2.0 mL火龍果提取液置于25.0 mL容量瓶中，按照蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線方法操作。根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算火龍果總黃酮含量，計(jì)算公式如下：

總黃酮提取量（mg/g）=C×V×n/m

式中，C為從回歸方程計(jì)算得到的火龍果黃酮類化合物質(zhì)量濃度（mg/mL）；V為提取液定容體積（mL）；n為稀釋倍數(shù)；m為火龍果粉質(zhì)量（g）。

1. 5 乙醇回流提取火龍果總黃酮最佳工藝條件確定

1. 5. 1 單因素試驗(yàn) 選取乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比、提取時(shí)間4個(gè)因素進(jìn)行單因素試驗(yàn)，水平梯度分別設(shè)置為：乙醇體積分?jǐn)?shù)50%、60%、70%、80%和90%，提取溫度50、60、70、80和 90 ℃，料液比1∶10、1∶15、1∶20、1∶25和1∶30，提取時(shí)間0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0和4.0 h。

1. 5. 2 正交試驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，提取時(shí)間2.0 h后對(duì)總黃酮提取量影響不明顯，故選取乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比3個(gè)影響總黃酮提取量的主要因素進(jìn)行L9（33）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，優(yōu)化火龍果總黃酮的乙醇回流提取工藝。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

1. 6 超聲波輔助提取火龍果總黃酮最佳工藝條件確定

1. 6. 1 單因素試驗(yàn) 超聲波提取試驗(yàn)各單因素水平梯度分別為：提取溫度50、60、70、80和90 ℃，料液比1∶10、1∶15、1∶20、1∶25和1∶30，超聲波時(shí)間5、10、15、20、25和30 min，乙醇體積分?jǐn)?shù)50%、60%、70%、80%和90%。

1. 6. 2 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn) 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，利用Design-Expert 8.0.6軟件，選擇影響火龍果總黃酮提取效果的料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度3個(gè)因素為自變量，以總黃酮提取量為響應(yīng)值進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。響應(yīng)面因素水平如表2所示。

1. 7 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0、Design-Expert 8.0.6及Excel 2007對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 乙醇回流提取火龍果總黃酮單因素試驗(yàn)結(jié)果

2. 1. 1 提取溫度對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖1可知，提取溫度為50～80 ℃時(shí)，隨著提取溫度的不斷升高，分子的擴(kuò)散及滲透速度加快，火龍果總黃酮提取量也不斷增加；當(dāng)提取溫度為80 ℃時(shí)，總黃酮提取量達(dá)最大值，顯著高于其他提取溫度的總黃酮提取量（P<0.05，下同），之后隨著提取溫度的繼續(xù)升高，其總黃酮提取量反而降低。這是因?yàn)樘崛囟冗^高時(shí)，破壞了黃酮類物質(zhì)結(jié)構(gòu)，同時(shí)提取溶劑乙醇嚴(yán)重?fù)]發(fā)。因此，提取溫度選擇80 ℃較合適。

2. 1. 2 提取時(shí)間對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖2可以看出，提取時(shí)間為0.5～2.0 h時(shí)，火龍果總黃酮提取量隨提取時(shí)間的延長而逐漸增加，且存在顯著性差異；超過2.0 h后，總黃酮提取量增加不顯著（P>0.05，下同），可能是黃酮類化合物基本提取完全。綜合考慮，乙醇回流提取2.0 h較合適。

2. 1. 3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖3可知，乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)火龍果總黃酮提取量有顯著影響，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為50%～80%時(shí)，總黃酮提取量隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大而不斷增加，乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%時(shí)，總黃酮提取量達(dá)最大值，超過80%后，提取量有所下降。這可能是乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%時(shí)，溶劑極性與火龍果黃酮類物質(zhì)極性相似，根據(jù)相似相溶原理，黃酮類物質(zhì)溶出較多（董雯雯，2008）；之后乙醇體積分?jǐn)?shù)繼續(xù)增大，一些糖類、色素、脂溶性物質(zhì)等大量溶出，導(dǎo)致黃酮類物質(zhì)溶解度下降，從而總黃酮提取量明顯降低（林珊等，2012）。因此，選擇80%乙醇為提取溶劑較合適。

2. 1. 4 料液比對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖4可知，料液比為1∶10～1∶25時(shí)，隨著料液比的不斷減小，黃酮類化合物逐漸增加，不同料液比的總黃酮提取量之間有顯著差異，料液比為1∶25時(shí)，總黃酮提取量達(dá)最大值；之后隨著料液比的繼續(xù)減小，總黃酮提取量反而下降，且會(huì)給后續(xù)處理帶來不利，同時(shí)造成資源浪費(fèi)。綜合考慮，料液比以1∶25為宜。

2. 2 乙醇回流提取火龍果總黃酮工藝條件的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化分析

從表3可以看出，3個(gè)因素對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響為：乙醇體積分?jǐn)?shù)（A）>料液比（C）>提取溫度（B）。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化得到乙醇回流提取火龍果總黃酮的最佳工藝條件為A2B2C2，即乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、提取溫度80 ℃、料液比1∶25。由于優(yōu)化得到A2B2C2在L9（33）試驗(yàn)組中未出現(xiàn)，因此在最佳條件下進(jìn)行3次平行驗(yàn)證試驗(yàn)，測得火龍果總黃酮平均提取量為18.07 mg/g，高于正交試驗(yàn)組合中任意一組。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定的條件為乙醇回流提取火龍果總黃酮的最佳工藝。

2. 3 超聲波輔助提取火龍果總黃酮單因素試驗(yàn)結(jié)果

2. 3. 1 超聲波時(shí)間對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖5可知，超聲波20 min，火龍果總黃酮提取量不斷增大，繼續(xù)延長超聲波時(shí)間，總黃酮提取量無明顯變化，同時(shí)超聲波時(shí)間延長，提取溶劑揮發(fā)越嚴(yán)重。因此，超聲波時(shí)間以20 min為宜。

2. 3. 2 提取溫度對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖6可知，不同提取溫度的火龍果總黃酮提取量有顯著性差異。當(dāng)?shù)陀?0 ℃時(shí)，隨著提取溫度不斷升高，總黃酮提取量顯著增大；提取溫度為80 ℃時(shí)，總黃酮提取量達(dá)最大值，之后提取溫度升高，提取量降低。因此，提取溫度選擇80 ℃為宜。

2. 3. 3 料液比對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 由圖7可知，料液比高于1∶20時(shí)，不同料液比的火龍果總黃酮提取量有顯著性差異，降低料液比，總黃酮提取量不斷增大；料液比為1∶20時(shí)，總黃酮提取量達(dá)到峰值，此后隨著料液比的繼續(xù)降低，總黃酮提取量無顯著變化。因此，確定最佳料液比為1∶20。

2. 3. 4 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響 從圖8可以看出，乙醇體積分?jǐn)?shù)過高或過低均不利于火龍果黃酮類物質(zhì)的提取，乙醇體積分?jǐn)?shù)低于80%時(shí)，總黃酮提取量隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大而顯著提高，乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%時(shí)，總黃酮提取量達(dá)到峰值；繼續(xù)增大提取溶劑體積分?jǐn)?shù)，由于沸點(diǎn)降低，乙醇嚴(yán)重?fù)]發(fā)，黃酮類物質(zhì)不能徹底提取，而導(dǎo)致提取量降低。因此，以80%乙醇為提取溶劑較好。

2. 4 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助提取火龍果總黃酮的工藝條件分析

2. 4. 1 回歸方程模型的建立和顯著性檢驗(yàn) 采用Design-Expert 8.0.6中的Box-Behnken進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，優(yōu)化出的17組試驗(yàn)安排及試驗(yàn)結(jié)果見表4，得到總黃酮提取量（Y）與乙醇體積分?jǐn)?shù)（X1）、提取溫度（X2）、料液比（X3）的二次多元回歸方程模型為：Y=-169.802+

2.4419X1+1.9231X2+1.5387X3+0.0106X1X2-0.0129X1X3+

5.9630×10-3X2X3-0.0190X12-0.0183X22-0.0214X32。

從圖11可以看出，固定乙醇體積分?jǐn)?shù)不變，最優(yōu)點(diǎn)在料液比1∶20、提取溫度80 ℃附近。圖中等高線為橢圓形，表明料液比與提取溫度的交互影響顯著，對(duì)火龍果總黃酮提取量的影響較大。提取溫度的坡度比料液比更陡峭，沿提取溫度軸向等高線也更為密集，說明提取溫度對(duì)總黃酮提取量的影響較料液比更明顯。

對(duì)上述數(shù)學(xué)模型進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表5。由表5中P可以看出：模型<0.0001，表明該模型極顯著；失擬項(xiàng)0.2451>0.05，不顯著。決定系數(shù)R2=0.9895，校正后的R2=0.9759，表明模型對(duì)試驗(yàn)擬合度高，能夠較準(zhǔn)確地反映出各因素與響應(yīng)值間的關(guān)系（Sin et al.，2006）。因此，可用此模型對(duì)火龍果總黃酮提取量進(jìn)行預(yù)測。由表5回歸模型的方差分析可以看出，一次項(xiàng)X2和X3、二次項(xiàng)X12和X22、交互項(xiàng)X1X2、X1X3和X2X3對(duì)總黃酮提取量的影響均達(dá)極顯著水平（P<0.01）；一次項(xiàng)X1和二次項(xiàng)X32的影響不顯著。

2. 4. 2 響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果分析 由圖9可知，固定料液比不變，提高乙醇體積分?jǐn)?shù)和提取溫度，火龍果總黃酮提取量先升高后降低，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%、提取溫度為80 ℃時(shí)，總黃酮提取量最大。響應(yīng)曲面為開口向下的凸形曲線，提取溫度與乙醇體積分?jǐn)?shù)交互作用的等高線為橢圓，表明二者對(duì)總黃酮提取量的交互作用明顯。等高線在沿提取溫度軸向上分布比較密集，表明提取溫度對(duì)總黃酮提取量的影響較乙醇體積分?jǐn)?shù)影響更顯著。

如圖10所示，固定提取溫度不變，火龍果總黃酮提取量隨料液比的減小而升高，隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大呈先升高后降低趨勢，在料液比1∶20、乙醇體積分?jǐn)?shù)80%附近達(dá)響應(yīng)值的最高點(diǎn)。圖中等高線呈橢圓，表明二者交互作用較明顯，對(duì)總黃酮提取量的影響顯著。沿乙醇體積分?jǐn)?shù)軸向等高線變化密集，沿料液比軸向等高線較稀疏；響應(yīng)曲面上，乙醇體積分?jǐn)?shù)坡度比料液比坡度陡峭，說明乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取量的影響相對(duì)料液比更明顯。

2. 4. 3 提取工藝條件的確定及可靠性驗(yàn)證 通過回歸方程模型，以響應(yīng)值最大為指標(biāo)進(jìn)行提取條件的最優(yōu)化，可得到超聲波輔助提取火龍果總黃酮的最佳理論工藝參數(shù)：料液比1∶23、提取溫度79 ℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)78%，在最佳工藝條件下模型預(yù)測的最大總黃酮提取量為19.73 mg/g。為操作方便，確定最佳提取工藝為：超聲波功率250 W、乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、料液比1∶25、提取溫度80 ℃、超聲波時(shí)間20 min，在此條件下進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，總黃酮平均提取量為19.58 mg/g，與預(yù)測值的相對(duì)誤差為0.73%，偏差較小。表明該模型可用于優(yōu)化火龍果總黃酮的超聲波輔助提取工藝。

3 討論

目前，國內(nèi)外對(duì)于植物中黃酮類物質(zhì)的提取工藝研究較成熟，提取方法也很多，如水提法、有機(jī)溶劑提取法、微波輔助提取法、超聲波輔助提取法、超臨界流體萃取法、加壓流體萃取法、生物酶提取法等（Ganzler et al.，1990；郭雪峰和岳永德，2007；龐玉新等，2014）。有機(jī)溶劑提取法常選用乙醇、甲醇、石油醚、乙酸乙酯、氯仿和乙醚等有機(jī)溶劑（尹芹等，2012），其中乙醇具有無刺激性氣味、成本低、無毒、不會(huì)造成環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)，常用作黃酮類物質(zhì)的提取溶劑。

本研究分別采用乙醇回流提取法和超聲波輔助提取法提取火龍果總黃酮，結(jié)果表明，以80%乙醇為提取溶劑，在提取溫度80 ℃、料液比1∶25的條件下回流提取2 h，火龍果總黃酮提取量為18.07 mg/g；以80%乙醇為提取溶劑，在超聲波功率250 W、料液比1∶25、提取溫度80 ℃的條件下超聲波提取20 min，火龍果總黃酮提取量為19.58 mg/g。對(duì)比這兩種方法發(fā)現(xiàn)，雖然提取溶劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比3個(gè)因素水平均相同，但超聲波輔助提取法所需時(shí)間明顯縮短，且得到的火龍果總黃酮提取量稍高于乙醇回流提取法。高溫條件下過長時(shí)間的提取不僅造成溶劑揮發(fā)、浪費(fèi)資源、增加耗能，還可能破壞火龍果中黃酮類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。超聲波輔助提取的作用機(jī)理主要是利用超聲波的熱效應(yīng)、機(jī)械粉碎作用及空化作用，對(duì)火龍果進(jìn)行超聲處理，可以使其內(nèi)部組織的溫度迅速升高，加快活性物質(zhì)的溶出；超聲波的機(jī)械粉碎作用主要破壞火龍果的組織結(jié)構(gòu)，引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷，從而加強(qiáng)組織細(xì)胞內(nèi)活性物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解，以提高火龍果黃酮類化合物的提取量（李欣和王步軍，2010）。此外，超聲波輔助提取法操作簡單，容易控制。可見，超聲波輔助提取法在實(shí)用性及經(jīng)濟(jì)性上均明顯優(yōu)于乙醇回流提取法，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，不僅符合綠色生產(chǎn)的工業(yè)要求，還能夠提高生產(chǎn)效率及生產(chǎn)效益，故對(duì)于火龍果總黃酮的提取宜采用超聲波輔助提取法。

本研究對(duì)比分析傳統(tǒng)的乙醇回流提取法和超聲波輔助提取法提取火龍果總黃酮的效果，確定了總黃酮提取的最佳工藝條件，可為火龍果資源的進(jìn)一步研發(fā)和利用提供一定的參考依據(jù)；但目前有關(guān)其黃酮類物質(zhì)的分離純化及結(jié)構(gòu)分析的研究尚未見文獻(xiàn)報(bào)道，故下一步可對(duì)火龍果中總黃酮的結(jié)構(gòu)鑒定等問題進(jìn)行深入探究。

4 結(jié)論

超聲波輔助提取法操作簡單、耗時(shí)短、提取效率高，效果優(yōu)于乙醇回流提取法，可用于火龍果總黃酮的工業(yè)化提取。

參考文獻(xiàn)：

陳杰，龐江琳，李尚德，陳嘉曦，莫麗兒，揭新明. 2004. 火龍果的微量元素含量分析[J]. 廣東微量元素科學(xué)，11（5）：56-57.

Chen J，Pang J L，Li S D，Chen J X，Mo L E，Jie X M. 2004. Analysis on contents of trace elements in pitaty[J]. Guangdong Trace Elements Science，11（5）：56-57.

董雯雯. 2008. 銀杏葉黃酮類化合物的提取與分離技術(shù)的研究[D]. 青島： 山東科技大學(xué).

Dong W W. 2008. Research on extraction and separation technology of flavonoids from Ginkgo biloba[D]. Qingdao：Shandong University of Science and Technology.

段浩平，張冬英，龔舒靜，秦向東. 2014. 苦蕎茶黃酮類成份及茶渣營養(yǎng)成份研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，27（3）：1260-1263.

Duan H P，Zhang D Y，Gong S J，Qin X D. 2014. Study on total flavonoids of buckwheat（Fagopyrum tataricum） tea and nutrients of tea residue[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences，27（3）：1260-1263.

郭璇華，戴文娟，梁博，李智儒. 2010. 分光光度法測定火龍果莖中黃酮類化合物的含量[J]. 中國食品添加劑，（2）：210-213.

Guo X H，Dai W J，Liang B，Li Z R. 2010. AlCl3 spectrophotometric determination of flavonoids in pitaya stems[J]. China Food Additives，（2）：210-213.

郭雪峰， 岳永德. 2007. 黃酮類化合物的提取·分離純化和含量測定方法的研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 35（26）：8083-8086.

Guo X F，Yue Y D. 2007. Research advances in extraction，isolation，purification and content determination of methods flavonoids[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences，35（26）：8083-8086.

李欣，王步軍. 2010. 兩種苦蕎黃酮提取方法的優(yōu)化及含量測定[J]. 食品科學(xué)，31（6）：80-85.

Li X，Wang B J. 2010. Optimization of two extraction techniques of total flavonoids from tartary buckwheat and HPLC determination based on the two extraction techniques of total flavonoids[J]. Food Science，31（6）：80-85.

林珊，林梅芳，吳嬌瑜，盧玉棟，吳宗華. 2012. 竹筍殼黃酮類化合物的提取及其抗氧化活性的研究[J]. 應(yīng)用化工，41（3）：465-468.

Lin S，Lin M F，Wu J Y，Lu Y D，Wu Z H. 2012. Study on the extraction and antioxidant activity of flavonoid compounds from shells of bamboo shoots[J]. Applied Chemical Industry，41（3）：465-468.

羅小艷，郭璇華. 2014. 紫外—可見分光光度法測定火龍果花中總黃酮的含量[J]. 食品研究與開發(fā)，35（23）：108-111.

Luo X Y，Guo X H. 2014. Determination of total flavonoids in pitaya flower by UV-Vis spectrophotometry[J]. Food Research and Development，35（23）：108-111.

龐玉新，張新蕊，于福來，張影波，官玲亮，王丹，胡雄飛. 2014. 大飛揚(yáng)總黃酮提取工藝優(yōu)化及抗氧化活性測定[J]. 廣西植物，35（1）：115-119.

Pang Y X，Zhang X R，Yu F L，Zhang Y B，Guan L L，Wang D，Hu X F. 2014. Determination of extraction process and antioxidant activity of the total flavonoids from Euphorbia hirta[J]. Guihaia，35（1）：115-119.

王曉波，何曉燕，王梅，劉冬英，陳海珍. 2011. 火龍果皮總黃酮提取與體外抗氧化作用研究[J]. 食品工業(yè)科技，32（11）：156-159.

Wang X B，He X Y，Wang M，Liu D Y，Chen H Z. 2011. Study on extraction and antioxidative activity offlavonoids in the peel of pitaya[J]. Science and Technology of Food Industry，32（11）：156-159.

王曉波，鐘嬋君，劉冬英，陳海珍. 2012. 火龍果皮總黃酮對(duì)油脂抗氧化作用的研究[J]. 食品研究與開發(fā)，33（3）：19-23.

Wang X B，Zhong C J，Liu D Y，Chen H Z. 2012. Antioxidation of flavonoids in the peel of pitaya on edible[J]. Food Research and Development，33（3）：19-23.

尹芹，楊小清，潘佳偉，閆雨，韓偉. 2012. 中藥黃酮類化合物新型提取、分離方法的研究進(jìn)展[J]. 機(jī)電信息，（35）：6-9.

Yin Q，Yang X Q，Pan J W，Yan Y，Han W. 2012. Research progress of new methods for the extraction and separation of flavonoids compounds[J]. Mechanical and Electrical Information，（35）：6-9.

鄭義，邵穎，陳安徽，張娜娜. 2014. 益智仁總黃酮超聲輔助提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性[J]. 食品科學(xué)，35（6）：44-49.

Zheng Y，Shao Y，Chen A H，Zhang N N. 2014. Optimization of ultrasonic-assisted extraction and antioxidant activities of total flavonoids from Alpinia oxyphylla fruits[J]. Journal of Food Science，35（6）：44-49.

Ganzler K，Szinaiz I，Salgo A. 1990. Effective sample preparation method for extracting biologically active compounds from different matrixes by a microwave technique[J]. Journal of Chromatography A，520：257-262.

Kim H J，Choi H K，Moon J Y，Kim Y S，Mosaddik A，Cho S K. 2011. Comparative antioxidant and antiproliferative activities of red and white pitayas and their correlation with flavonoid and polyphenol content[J]. Journal of Food Science，76（1）：38-45.

Nerd A，Sitrit Y，Kaushik R A，Mizrahi Y. 2002. High summer temperatures inhibit flowering in vine pitaya crops（Hylocereus spp.）[J]. Scientia Horticulturae，96：343-350.

Porfírio D A，F(xiàn)erreira R D Q，Malagutti A R，Valle E M A. 2014. Electrochemical study of the increased antioxidant capacity of flavonoids through complexation with iron（II）ions[J]. Electrochimica Acta，141：33-38.

Sin H N，Yusof S，Sheikh Abdul Hamid N，Rahman R A. 2006. Optimization of hot water extraction for sapodilla juice using response surface methodology[J]. Journal of Food Engineering，74（3）：352-358.

Villalobos-Gutiérrez M G，Schweiggert R M，Carle R，Esquivel P. 2012. Chemical characterization of Central American pitaya（Hylocereus sp.） seeds and seed oil[J]. CyTA-Journal of Food，10（1）：78-83.

Wu L C，Hsu H W，Chen Y C，Chiu C C，Lin Y I，Annie Ho J A. 2006. Antioxidant and antiproliferative activities of red pitaya[J]. Food Chemistry，95（2）：319-327.

（責(zé)任編輯 羅 麗）