白鶴藤化學(xué)成分研究

何光發(fā)，彭菲菲，鄧秋怡，譚權(quán)芬，潘潔桃，尹永芹，嚴(yán)優(yōu)芍

(廣東藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

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白鶴藤化學(xué)成分研究

何光發(fā)，彭菲菲，鄧秋怡，譚權(quán)芬，潘潔桃，尹永芹，嚴(yán)優(yōu)芍

(廣東藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

摘要:目的 研究白鶴藤(Argyreia acuta Lour.)的化學(xué)成分。方法 采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、ODS柱色譜、MCI柱色譜、半自動(dòng)制備液相色譜等手段進(jìn)行分離純化，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜解析鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果 從白鶴藤的乙酸乙酯部位和石油醚部位分離得到8個(gè)化合物，分別鑒定為3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸甲酯(1)、3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸乙酯(2)、3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸丁酯(3)、3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸丁酯(4)、木栓醇(5)、木栓酮(6)、菠甾醇(7)、豆甾醇(8)。結(jié)論 化合物1～7首次從該屬植物中分離得到。

關(guān)鍵詞:白鶴藤； 化學(xué)成分； 結(jié)構(gòu)鑒定

白鶴藤(ArgyreiaacutaLour.)為旋花科銀背藤屬(Argyreia)植物，別名白牡丹、銀背藤、銀背葉、綢緞葉。銀背藤屬植物全世界約有90種，中國(guó)約有21種。白鶴藤始載于《本草求原》，《常用中草藥手冊(cè)》、《廣西中草藥》、《云南中草藥》、《嶺南草藥志》等也有記載，在我國(guó)主要分布于廣東、廣西、海南、云南等地，是民間常用中草藥，全藤入藥，味微苦、甘，性平，具有祛風(fēng)除濕、止咳化痰、止血生肌、舒筋活絡(luò)、解毒消癰等功效。有關(guān)白鶴藤的化學(xué)成分，目前報(bào)道的主要有色素、總皂苷、甾體、黃酮和樹(shù)脂糖苷等[1-5]。本文進(jìn)一步對(duì)白鶴藤的化學(xué)成分進(jìn)行研究，分別從乙酸乙酯部位分離得到4個(gè)咖啡酰基奎寧酸類化合物，分別為3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸甲酯(1)、3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸乙酯(2)、3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸丁酯(3)、3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸丁酯(4)，從石油醚部位分離得到4個(gè)甾體類化合物，分別是木栓醇(5)、木栓酮(6)、菠甾醇(7)、豆甾醇(8)，化合物1～7均為首次從該屬植物中分離得到。

1材料與儀器

2450紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)(日本島津公司)；AVANCE 500超導(dǎo)核磁共振譜儀(德國(guó)Bruker公司)；AQUITYUPLC/Q-TOF micro液-質(zhì)聯(lián)用質(zhì)譜儀(美國(guó)Waters公司)；LC-6AD半制備液相色譜儀(日本島津公司)。

Sephadex LH-20葡聚糖凝膠(美國(guó)GE公司)；柱色譜硅膠(100～200、200～300目，青島海洋化工有限公司)；GF254薄層層析用硅膠板(青島海洋化工有限公司)；ODS(50～70 μm，天津鍵合相色譜有限公司)；MCI GEL(CHP 20P，日本三菱公司)。

白鶴藤藥材2013年3月采自廣西玉林，經(jīng)廣東藥科大學(xué)李書(shū)淵教授鑒定為旋花科銀背藤屬(Argyreia)植物白鶴藤(ArgyreiaacutaLour.)。

2提取與分離

取白鶴藤地上部分5 kg，去雜，剪碎，加15倍量體積分?jǐn)?shù)85%的乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，減壓回收乙醇，得到粗浸膏2 kg，浸膏加適量水混懸，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，減壓回收各部位溶劑，得石油醚部位浸膏50 g、三氯甲烷部位浸膏65 g、乙酸乙酯部位浸膏50 g和正丁醇萃取部位浸膏159 g。取乙酸乙酯部位浸膏50 g，進(jìn)行硅膠(100～200 目)柱色譜分離，乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，TLC檢識(shí)，得各組分再反復(fù)經(jīng)Sephadex LH-20、ODS、MCI柱色譜純化，再通過(guò)半制備液相制備得到化合物1(21 mg)、化合物2(20 mg)、化合物3(15 mg)和化合物4(17 mg)。取石油醚部位浸膏50 g，分別經(jīng)硅膠(100～200目、200～300目)柱色譜分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，TLC檢識(shí)，合并相同組分，再進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物5(20 mg)、化合物6(19 mg)、化合物7(50 mg)、化合物8(40 mg)。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：529[M-H]-。13C-NMR譜顯示該化合物含有26個(gè)碳，其中有1個(gè)甲氧基δ52.0。1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1～表2。上述波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]對(duì)照一致，確定化合物1為3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸甲酯(3,4-O-dicaffeoylquinic acid mehtylester)。

化合物2：淡黃色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：543[M-H]-。13C-NMR譜顯示該化合物含有27個(gè)碳，其中δC61.0、14.0提示結(jié)構(gòu)中具有—OCH2和—CH3。1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1～表2。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]對(duì)照一致，確定化合物2為3,4二咖啡酰基奎寧酸乙酯(3,4-O-dicaffeoylquinic acid ethylester)。

化合物3：白色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：571[M-H]-。13C-NMR譜顯示該化合物含有29個(gè)碳，其中δC64.6、30.6、19.2、14.0提示結(jié)構(gòu)中具有—OCH2、—CH2×2和—CH3。1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1～表2。上述波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]對(duì)照一致，確定化合物3為3,5-二咖啡酰基奎寧酸丁酯(3,5-di-Ocaffeoylquinicacid butylester)。

化合物4：白色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：571[M-H]-。13C-NMR譜顯示該化合物含有29個(gè)碳，其中δC64.2、30.5、19.0、14.0提示結(jié)構(gòu)中具有—OCH2、—CH2×2和—CH3。1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1～表2。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]對(duì)照一致，確定化合物4為3,4-二咖啡酰基奎寧酸丁酯(3,4-di-O-caffeoylquinicacid butylester)。

表1化合物1～4的13C-NMR(125 MHz)數(shù)據(jù)

Table 1The13C-NMR (125 MHz) data of compounds 1-4

位置化合物1化合物2化合物3化合物4173.273.673.373.4237.736.736.038.2367.865.968.768.2472.172.865.072.6566.668.264.664.2636.238.136.038.27173.4173.3174.2173.41'/1″125.5/125.3125.9/125.7125.9125.9/125.82'/2″114.8/114.7115.3/115.2114.6/114.3115.3/115.23'/3″145.6/145.5146.1/146.0145.9/145.6146.1/146.04'/4″148.6/148.5149.1/149.0149.0/148.9149.1/149.05'/5″115.8116.3/116.2116.2116.36'/6″121.5/121.4121.9/121.8122.0/121.8121.9/121.87'/7″145.7/145.6147.1/127.0146.1146.18'/8″113.9/113.3114.3/113.8115.2/115.0114.3/113.89'/9″166.9/166.2166.4/165.7166.4/166.2166.9/166.71?52.261.064.664.22?14.330.630.53?19.219.04?14.014.0

表2　化合物1～4的1H-NMR(500 MHz)數(shù)據(jù)

化合物5：無(wú)色針晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：3.99(1H,d)，1.31(3H,s,28-CH3)，1.23(3H,s,27-CH3)，1.19(3H,s,29-CH3)，1.09(3H,s,26-CH3)，1.08(3H,s,30-CH3)，1.03(6H,s,23-CH3,24-CH3)，0.96(3H,s,25-CH3)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：71.9(C-3)，62.3(C-10)，50.5(C-4)，49.0(C-8)，43.6(C-18)，42.8(C-6)，40.4(C-22)，39.9(C-5)，39.0(C-14)，38.9(C-13)，37.9(C-9)，37.0(C-2)，36.9(C-16)，36.5(C-11)，36.0(C-19)，35.5(C-30)，33.5(C-21)，33.0(C-15)，32.7(C-28)，31.3(C-12)，32.3(C-29)，30.7(C-17)，28.8(C-20)，20.7(C-27)，19.2(C-25)，19.0(C-26)，18.4(C-7)，17.4(C-24)，17.0(C-1)，12.9(C-23)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]對(duì)照一致，故鑒定化合物5為木栓醇(friedelin)。

化合物6：無(wú)色針晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：0.72(3H,s,CH3)，0.87(3H,d,J=6.4 Hz,H-23)，0.95(3H,s,CH3)，1.00(3H,s,CH3)，1.01(3H,s,CH3)，1.05(3H,s,CH3)，1.18(3H,s,CH3)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：213.4(C-3)，59.7(C-10)，58.4(C-4)，53.3(C-8)，43.0(C-18)，42.4(C-5)，41.7(C-2)，41.5(C-6)，39.9(C-13)，39.5(C-22)，38.5(C-14)，37.7(C-9)，36.2(C-16)，35.8(C-11)，35.6(C-19)，35.2(C-29)，33.0(C-21)，32.6(C-15)，32.3(C-28)，32.0(C-30)，30.7(C-12)，30.2(C-17)，28.4(C-20)，22.5(C-1)，20.5(C-26)，18.9(C-27)，18.5(C-7)，18.2(C-25)，14.9(C-24)，7.0(C-23)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]對(duì)照一致，確定化合物6為木栓酮(friedelinol)。

化合物7：白色針晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：0.68(3H,d,J=5.4 Hz)，0.84、0.86、1.02、1.58(3H each,s)，3.54(1H,m,H-3)，5.36(1H,m,H-6)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：141.0(C-8)，138.5(C-22)，129.5(C-23)，122.0(C-7)，72.0(C-13)，56.3(C-17)，56.2(C-14)，51.5(C-24)，50.36(C-9)，46.1(C-13)，42.5(C-20)，40.0(C-5,C-12)，39.9(C-4)，37.5(C-1)，34.2(C-10)，32.1(C-25)，31.9(C-2)，29.9(C-6)，29.2(C-16)，26.3(C-28)，23.3(C-15)，21.3(C-1)，21.2(C-11)，20.0(C-27)，19.6(C-26)，12.3(C-18)，12.2(C-19)，12.1(C-29)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]對(duì)照一致，確定化合物7為菠甾醇(spinasterol)。

化合物8：無(wú)色針晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：0.70，1.02(3H each,s)，0.82(3H,d,J=8.5 Hz)，0.85(3H,d,J=4.5 Hz)，0.93(6H,d,J=8.0 Hz)，3.51(1H,m)，5.04(1H,dd,J=19.0,10.5 Hz)，5.18(1H,dd,J=19.0,10.5 Hz)，5.35(H,d,J=6.5 Hz)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：141.0(C-5)，138.6(C-22)，129.5(C-23)，122.0(C-6)，70.1(C-3)，56.3(C-14)，56.2(C-17)，51.5(C-24)，50.4(C-9)，42.4(C-4,C-13)，40.0(C-20)，39.1(C-12)，36.7(C-1)，36.4(C-10)，33.6(C-25)，32.1(C-8)，31.9(C-7)，30.5(C-2)，28.5(C-16)，25.6(C-28)，24.5(C-15)，22.4(C-11)，21.4(C-26)，21.3(C-27)，19.0(C-21)，12.3(C-19)，12.2(C-29)，12.1(C-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]對(duì)照一致，確定化合物8為豆甾醇(tigmasterol)。

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(責(zé)任編輯：陳翔)

Study on chemical constituents fromArgyreiaacutaLour.

HE Guangfa,PENG Feifei,DENG Qiuyi,TAN Quanfen,PAN Jietao,YIN Yongqin，YAN Youshao

(SchoolofTraditionalChineseMedicine，GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangzhou510006，China)

Abstract:Objective To study the chemical constituents of Argyreia acuta Lour. Methods The compounds were isolated by chromatography on silica gel column, Sephadex LH-20 column,ODS column,semi-preparative chromatography，and their structures were identified on the basis of physicochemical properties and spectroscopic data. Results Eight compounds were isolated and identified as 3,4-O-dicaffeoylquinic acid methylester (1),3,4-O-dicaffeoylquinic acid ethylester (2),3,5-di-Ocaffeoylquinicacid butylester (3),3,4-di-O-caffeoylquinicacid butylester (4),friedelin (5),friedelinol (6),spinasterol (7),tigmasterol (8). Conclusion Compounds 1-7 were isolated from Argyreia acuta Lour for the first time.

Key words:Argyreia acuta Lour.; chemical constituents; structural identification

DOI:10.16809/j.cnki.1006-8783.2015112002

中圖分類號(hào):R284.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1006-8783(2016)02-0135-04

作者簡(jiǎn)介：何光發(fā)(1996—)，男，2012級(jí)本科生，Email：2642125159@qq.com；通信作者：尹永芹(1977—)，女，博士，副教授，從事中藥及天然藥物有效成分及其譜效相關(guān)性研究，電話：020-39352179，Email：yongqinyin@126.com。

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81202885)；廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2015A030313585)；廣東省大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(201410573034)

收稿日期：2015-11-20

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-03-31 15:22網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1413.R.20160331.1522.006.html