蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別研究△

常霄巍 巴俊杰

(內蒙古醫科大學藥學院，內蒙古 呼和浩特 010100)

蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別研究△

常霄巍 巴俊杰*

(內蒙古醫科大學藥學院，內蒙古 呼和浩特 010100)

目的：建立蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別方法。方法：薄層色譜法。結果：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色熒光斑點。結論：建立了蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別方法，為提高該蒙藥的質量標準提供了薄層色譜鑒別方法。

蒙藥；齒緣草；薄層色譜鑒別

齒緣草，蒙藥名額布森-瓦德，為紫草科植物石生齒緣草Eritrichium rupestre (Pall.)Bunge 的干燥地上部分，分布于我國的東北、華北和西北的東部，西伯利亞和蒙古也有分布，主產于內蒙古的中西部和甘肅、寧夏等地[1-3]。該藥材收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準》蒙藥分冊，有殺“粘”、清熱、解毒之功能，用于治療瘟熱流感，“協日”人脈癥，“協日”熱，炭疽等[4]，為常用蒙藥。鑒于目前尚未見蒙藥齒緣草薄層色譜鑒別方面的系統研究，本文填補了這方面的研究空白，建立了該蒙藥的薄層色譜鑒別方法，這對提高該蒙藥的質量標準和質量控制水平具有重要意義。

1 儀器、試劑與材料

SLD-1 型薄層色譜攝像儀(天津思利達色譜技術開發公司)，TD-Ⅱ型全自動薄層鋪板器(上海科哲生化科技有限公司)，ZDZ-6型三用紫外分析儀(上海安亭電子儀器廠)，薄層展開槽(上海信誼儀器廠)，薄層色譜點樣管(kimble，3μL、5μL)，預制硅膠G薄層板1(煙臺市化學工業研究所，批號140514，規格200mm×50mm，200mm×100mm，200mm×200mm)，預制硅膠G薄層板2(青島碩遠化工有限責任公司，批號140210，規格200mm×100mm，200mm×200mm)，自制硅膠G薄層板(硅膠為青島海洋化工集團公司，規格200mm×100mm，200mm×200mm)；甲苯、環己烷、乙酸乙酯、甲酸、甲醇、三氯化鋁均為分析純。

對照藥材齒緣草采自內蒙古呼和浩特市武川縣大青山(該產地齒緣草作為對照藥材正在中國食品藥品檢定研究院審批中)。實驗用樣品藥材齒緣草分別采自內蒙古呼和浩特市和林格爾縣、內蒙古包頭市趙長城地區、內蒙古包頭市固陽縣、內蒙古烏海市海南區、內蒙古赤峰市克什克騰旗和寧夏銀川市賀蘭山地區。所采集的藥材均經內蒙古醫科大學藥用植物學教授鞠愛華和蒙藥學教授那生桑鑒定為石生齒緣草。

2 方法與結果

2.1 薄層色譜鑒別方法 :取本品粉末2g，加60%甲醇50mL，加熱回流1h，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30mL使溶解，用石油醚(30～60℃)振搖提取2次，每次20mL，棄去石油醚液，水液加鹽酸5mL，加熱回流1h，冷卻后用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗滌，棄去水洗液，乙醚液揮干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取齒緣草對照藥材同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2015版通則0502)試驗，吸取上述兩種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3 %三氯化鋁乙醇溶液，熱風吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色熒光斑點。

2.2 方法學考察

2.2.1 重復性試驗: 取同一批次的對照藥材，按2.1項下薄層色譜鑒別方法操作，重復做3次，結果顯示效果良好，見圖1。

2.2.2 不同年份對照藥材試驗: 分別取不同年份的對照藥材，按2.1項下薄層色譜鑒別方法操作，結果顯示不同年份的樣品薄層結果一致，見圖2。

2.2.3 樣品鑒別試驗: 取對照藥材和不同產地的樣品，按2.1項下薄層色譜鑒別方法操作，結果顯示不同產地的樣品薄層結果與對照藥材一致，見圖3。

2.2.4 不同廠家薄層板的薄層色譜試驗:取對照藥材、不同產地的樣品和3種不同廠家的薄層板，按2.1項下薄層色譜鑒別方法操作，考察不同廠家薄層板的薄層色譜。試驗表明，不同廠家的薄層板對實驗結果無影響，結果見圖4。

2.2.5 不同溫度的薄層色譜試驗:取對照藥材和不同產地的樣品，在室溫25℃和10℃下，按2.1項下薄層色譜鑒別方法操作，考察不同溫度的薄層色譜，結果表明溫度對實驗結果無顯著影響，見圖5。

2.2.6 不同濕度的薄層色譜試驗:取對照藥材和不同產地的樣品，在濕度75%和濕度20%下，按2.1項下薄層色譜鑒別方法操作，考察不同濕度的薄層色譜，結果表明濕度對實驗結果無顯著影響，見圖6。

3 討論

3.1 供試品溶液制備方法的選擇: 方法1，取對照藥材粉末2g，加60%甲醇50mL，加熱回流1h，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30mL使溶解，用石油醚(30～60℃)振搖提取2次，每次20mL，棄去石油醚液，水液加鹽酸5mL，加熱回流1h，冷卻后用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗滌，棄去水洗液，乙醚液揮干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。

方法2，取對照藥材粉末2g，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮干石油醚，加甲醇-水-鹽酸((12∶7∶1))混合溶液50mL，回流1h，濾過，濾液蒸至近干，加水30mL使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗滌，棄去水洗液，乙醚液揮干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。

方法3，取對照藥材粉末2g，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮干石油醚，加甲醇50mL，回流提取1h，濾過，濾液濃縮至約1mL，作為供試品溶液。

吸取上述供試品溶液各5μL，點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3 %三氯化鋁乙醇溶液，熱風吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結果見圖7，方法1為最佳，故采用該法為供試品溶液制備方法。

3.2 展開系統的選擇:取對照藥材粉末2g，按2.1項下薄層色譜鑒別方法制備供試品溶液和對照藥材溶液，參考《中國藥典》2010年版一部木賊、地棉草、翻白草項下薄層鑒別展開系統[5]，選用3種展開系統展開，分別為展開系統1：環己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)、展開系統2：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2∶1)、展開系統3：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)，結果見圖8，經比較展開系統2較好。

考慮到2的最低熒光點的Rf值較小，不在規定的0.2～0.8 之間，故將展開系統調整為甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)，取得了較好的結果，結果見圖9，故最后選擇的展開系統為甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)。

[1]內蒙古植物志編輯委員會. 內蒙古植物志(第二版)[M]. 第四卷.呼和浩特: 內蒙古人民出版社, 2000,170.

[2] 朱亞民. 內蒙古植物藥志(第二卷)[M]. 呼和浩特: 內蒙古人民出版社, 2000,417.

[3] 白清云. 中國醫學百科全書蒙醫學[M]. 上海:上海科學技術出版社, 1992,212.

[4] 中華人民共和國衛生部藥典委員會. 中華人民共和國衛生部藥品標準(蒙藥分冊)[S]. 1998,29.

[5] 中華人民共和國衛生部藥典委員會. 中國藥典[S].一部. 中國中醫藥科技出版社，2010，63, 127, 383.

2015年11月14日收稿

TLC Identification of Mongolian Medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge

Chang xiaowei Ba junjie

School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010110, China

Objective: To establish the method for TLC identification of mongolian medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge. Methods: Thin layer chromatography (TLC). Results: The same color fluorescent spots are displayed in chromatography of test products and the control product. Conclusion: The method for TLC identification of mongolian medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge has been established in order to improve the quality standard of the Mongolian medicine.

Mongolia medicine; Eritrichium rupestre (Pall.) Bungeo; TLC identification

△國家藥典委員會藥品標準提高項目( 453)

常霄巍(1990 -)，男，漢族，遼寧沈陽人，碩士研究生，主要從事有機藥物合成研究。

R291.2

B

1006-6810(2016)10-0051-04

*通訊作者：巴俊杰(1957 -)，男，蒙古族，內蒙古通遼人，教授，碩士研究生導師，主要從事蒙藥質量控制和有機藥物合成研究。