注射用左旋泮托拉唑鈉雜質(zhì)D/F方法學(xué)研究

朱玲（杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)新藥研究院有限公司 浙江杭州 310011）

注射用左旋泮托拉唑鈉雜質(zhì)D/F方法學(xué)研究

朱玲（杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)新藥研究院有限公司 浙江杭州 310011）

建立高效液相色譜方法測(cè)定注射用左旋泮托拉唑鈉的雜質(zhì)D/F，并進(jìn)行了雜質(zhì)定量檢測(cè)的方法學(xué)研究。經(jīng)過驗(yàn)證，此方法的精密度、穩(wěn)定性及線性回歸均良好，平均回收率為99．98%，操作簡(jiǎn)便，可以準(zhǔn)確的對(duì)研制樣品中的雜質(zhì)D/F進(jìn)行控制。

左旋泮托拉唑鈉；方法學(xué)研究；雜質(zhì)檢測(cè)

【DOI】10．19312/j．cnki．61-1499/c．2016．07．090

泮托拉唑鈉（pantoprazole sodium）化學(xué)名為5-二氟甲氧基-2-｛[3,4-二甲氧基-2-（吡啶基）甲基]亞磺酰基｝-1H-苯并咪唑鈉鹽，是一種新型的抗?jié)兯帲苯幼饔门c胃壁內(nèi)質(zhì)子泵，抑制胃酸分泌，可治療胃潰瘍、十二指腸潰瘍等，與傳統(tǒng)的抗酸劑和H2受體阻斷劑相比具有療效高，起效快，副作用小，治療周期短等優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)文獻(xiàn)，泮托拉唑在弱酸性的環(huán)境下，比奧美拉唑以及蘭索拉唑均穩(wěn)定，其生物利用度比奧美拉唑提高7倍，對(duì)胃的壁細(xì)胞的選擇性更專一。其抗?jié)冏饔脙?yōu)于雷尼替丁，而與奧美拉唑相似，但與其他藥物的相互作用那個(gè)少于奧美拉唑和蘭索拉唑。左旋泮托拉唑鈉為我國創(chuàng)新的新藥，尚未見其制劑上市。與消旋體泮托拉唑鈉相比，左旋泮托拉唑制成的制劑不但可以使劑量減半，而且具有更高的藥效。為確認(rèn)制劑成品中雜質(zhì)D/F的限度，并且對(duì)其含量進(jìn)行控制，故建立一套研究雜質(zhì)D/F的外標(biāo)法方法學(xué)。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.主要儀器與色譜柱

Agilent 1260高效液相色譜儀，DAD檢測(cè)器；

METTLER TOLEDO XS105 DualRange 電子天平；

Waters X Bridge C18 （250×4．6mm ，5μm）色譜柱。

2.試劑

乙腈（色譜純），NaOH（分析純），磷酸氫二鉀（分析純），純化水。

3.試驗(yàn)樣品

雜質(zhì)D/F，來源：USP REFERENCE STANDARD， 泮托拉唑鈉，批號(hào)：G0L326。

4.色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，磷酸氫二鉀溶液為A相[0．01mol/L的磷酸氫二鉀溶液（用磷酸調(diào)pH至7．0±0．1）]，乙腈為B相，進(jìn)行梯度洗脫，0～40min：80∶20（A;B）→20∶80（A;B）；40～45min： 20∶80（A;B）→80∶20（A;B）45～55min：80∶20（A;B）。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.雜質(zhì)D/F的檢測(cè)限

取雜質(zhì)D/F樣品，通過逐級(jí)降低濃度，進(jìn)樣測(cè)定，以信噪比S/N＞10計(jì)，雜質(zhì)D/F的最低檢出濃度為26．1ng/ml，最低檢出量為0．52ng。

2.雜質(zhì)D/F的線性

表1 雜質(zhì)D/F的線性

圖1 雜質(zhì)D/F的線性

雜質(zhì)D/F在0．41-1．31μg/ml濃度范圍內(nèi)與峰面積線性良好。

3.雜質(zhì)D/F的回收率

精密稱取雜質(zhì)D/F對(duì)照品10．25mg，于50ml量瓶中，加溶劑（0．001mol/L NaOH：乙腈=50∶50）溶解，超聲，并用溶劑稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1．0ml于10ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液；精密量取0．8、1、1．2ml于100ml量瓶中，同時(shí)稱取約40mg的左旋泮托拉唑鈉原料于同一量瓶中，然后用溶劑稀釋至刻度，搖勻，取20μl注入液相色譜儀，另取雜質(zhì)E對(duì)照品同法測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。

表2 雜質(zhì)D/F回收率測(cè)定

結(jié)果：由以上數(shù)據(jù)顯示雜質(zhì)E的平均回收率為99．98%，RSD為0．75 %。

4.雜質(zhì)D/F溶液的穩(wěn)定性

取雜質(zhì)D/F的對(duì)照品溶液，分別在0、1、4、11、19、22小時(shí)進(jìn)樣檢測(cè)，結(jié)果見表4。

表3 雜質(zhì)D/F溶液的穩(wěn)定性

結(jié)論：樣品在溶劑中22小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

5.雜質(zhì)D/F的精密度

按照所述方法對(duì)樣品中雜質(zhì)D/F的含量進(jìn)行測(cè)定，六批樣品檢測(cè)結(jié)果如下。

表4 雜質(zhì)D/F的精密度

結(jié)論：該方法測(cè)定中雜質(zhì)D/F的精密度良好。

6.雜質(zhì)D/F的歸屬以及分析

雜質(zhì)D/F在本品及原研制劑中均檢出，并在濕熱條件中會(huì)加速增長(zhǎng)，因此在檢測(cè)中根據(jù)雜質(zhì)對(duì)照品以及系統(tǒng)適應(yīng) 性溶液來確定雜質(zhì)D/F的相對(duì)保留時(shí)間。

表5 雜質(zhì)E的歸屬

三、結(jié)論

根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知雜質(zhì)D/F在溶劑（0．01mol/LNaOH：乙腈=50∶50）中穩(wěn)定性良好，精密度良好，平均回收率為99．98%，雜質(zhì)線性良好，可以準(zhǔn)確的對(duì)研制樣品中的雜質(zhì)D/F進(jìn)行控制。

[1] Pantoprazole sodium USP34