林榮萬 賴圣明 黃中超
中山大學附屬第六醫院檢驗科 廣東廣州 510655
尿蛋白三種檢驗方法比較
林榮萬 賴圣明 黃中超
中山大學附屬第六醫院檢驗科 廣東廣州 510655
目的尿蛋白三種檢驗方法比較。方法選取我院2015年3月連續5d隨機采集的300例住院病人尿液標本為研究對象,采用干化學法、加熱乙酸法及基水楊酸法檢測尿液標本,并比較三種檢驗方法的檢查結果。結果干化學法診斷陽性率31.33%高于加熱乙酸法22.33%與磺基水楊酸法陽性率23.33%,有統計學意義(P<0.05)。加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率比較無統計學意義(P>0.05)。干化學法靈敏度95.65%、誤診率12.12%高于加熱乙酸法83.82%、4.31%,特異度87.88%%、漏診率4.35%%低于加熱乙酸法95.69%、16.18%,有統計學意義(P<0.05)。結論尿蛋白陽性結果在臨床上具有重要意義,三種尿蛋白檢驗方法各有優劣,相輔相成,應依據具體情況選擇定性檢查方法,注意質量管理,持續多次驗證,以降低方法學造成的誤診率與漏診率,提高結果準確性。
尿蛋白;干化學法;加熱乙酸法;磺基水楊酸法
醫院中最常用的檢驗項目之一即為尿常規檢查,其可反映身體健康狀況的基本指標,可用于泌尿系統疾病的篩檢[1]。在正常生理狀態下,分子質量<4萬U的低分子蛋白質能夠通過濾過膜,但腎小球濾過膜能夠有效阻止分子質量>4萬U的蛋白質通過,且通過濾過膜的蛋白質可被近曲小管重吸收,因此健康成人每日排出的蛋自質含量極少(30-130mg),一般不能用常規定性方法檢測出來[2]。檢測尿蛋白可早期診斷腎臟及有關疾病引發的腎損害,是泌尿系統疾病實驗室檢查的重要內容,如尿微量白蛋白是臨床應用較多的早期糖尿病腎病診斷指標,可提示腎小球早期損害[3];糖尿病中亦有不同程度的尿微量白蛋白,可提示糖尿病腎病[4],因此,定性分析尿蛋白在臨床診斷中具有重要意義。本研究主要探討干化學法、加熱乙酸法及磺基水楊酸法三種檢驗方法比較。
1.1 標本 收集住院患者送檢的新鮮尿液。
1.2 方法(1)干化學法。測定尿液pH,調至pH在5-6之間。檢測時將試帶浸人尿中立即取出,并吸去多余尿液,于1min內與標準色板比色。(2)加熱乙酸法。大試管1支,加清晰尿液約5ml或至試管高度2/3處。加熱時斜持試管下端,使用酒精燈加熱尿液上1/3段,煮沸即止。然后將試管輕輕直立,置于黑色背景下,觀察煮沸部分是否有渾濁。加酸后再加熱滴加2 -4滴0.85mmol/L乙酸溶液,煮沸后立即觀察結果。(3)磺基水楊酸法。留取2 mI離心后上清尿液于小試管中,滴加2滴10%磺柳酸試劑,形成界面,觀察尿液渾濁度變化、有無沉淀生成,并記錄結果。
1.3 結果判定標準 無渾濁為陰性(-);輕微渾濁,黑色背景下隱約可見為弱陽性±;呈白色云霧狀渾濁陽性+;呈顆粒狀白色渾濁為陽性++;呈絮片狀渾濁或沉淀為陽性+++;大量絮片狀并有凝塊沉淀為陽性++++。
1.4 統計學方法 選用統計學軟件SPSS15.0對研究數據進行分析和處理,計數資料采取率(%)表示,組間對比進行x22檢驗,以P<0.05為有顯著性差異和統計學意義。
2.1 干化學法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法陽性率比較 干化學法診斷陽性率高于加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率,有統計學意義(P<0.05)。加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率比較無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 干化學法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法陽性率比較
2.2 磺基水楊酸法(設為參考方法)、干化學法、加熱乙酸法檢驗結果比較 干化學法靈敏度、誤診率高于加熱乙酸法,特異度、漏診率低于加熱乙酸法,有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 磺基水楊酸法(設為參考方法)、干化學法、加熱乙酸法檢驗結果比較
尿液干化學法是目前臨床上檢測尿蛋白的方法中開展最廣泛方法,,在實驗室尿液檢查占據重要地位,方法較為方便快捷,且速度快,成本低[5],但影響因素較多;如堿性、分泌物、色素、部分鹽類或含有較多細胞成分時,采用尿液干化學法檢測可引起假陽性,且因為溴酚藍只與白蛋白結合,不與黏蛋白、球蛋白等大分子蛋白發生作用,從而對結果準確性產生影響;另外,當樣本量較高時,若檢測不及時,易產生絮狀物或沉淀,影響測定結果,故尿液干化學法只能作為一種過篩試驗,在臨床檢測中有一定局限[6]。加熱乙酸法是是傳統檢測尿蛋白的經典方法,加熱煮沸可使蛋白質凝固變性,再加酸使尿液pH下降達蛋白質等電點,從而促進變性蛋白質的沉淀,并可消除尿液中某些磷酸鹽受熱析出結晶,進而避免混濁的干擾,結果準確,尿蛋白特異性強,干擾因素少,檢出敏感度低于磺基水楊酸法,可作為蛋白質定性實驗的確證實驗,但該法操作繁瑣[7]?;腔畻钏岱ň哂胁僮骱啽?、快速、敏感度高等特點,但干擾因素較多;檢測時易受干擾因素影響,造成假性結果。
本研究主要探討了尿蛋白三種檢驗方法。干化學法診斷陽性率高于加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率,干化學法靈敏度、誤診率高于加熱乙酸法,特異度、漏診率低于加熱乙酸法,三種尿蛋白檢驗方法各有優劣;當尿酸鹽含量較高,尿呈酸性反應,磺基水楊酸法檢測結果比實際情況低,易呈假陽性。使用造影劑時,加熱醋酸法、磺基水楊酸法均會假陽性反應,需選擇干化學法檢測;若大量使用青霉素,磺基水楊酸法易呈假陽性反應;當尿呈強堿性時,加熱醋酸法與磺基水楊酸法呈假陰性反應[8。當尿蛋自僅為一些特殊蛋白質磺基水楊酸法敏感度低。因此,在尿蛋白定性時,應綜合分析各種因素,依據具體情況選擇適宜的方法。王琳[9]等研究三種尿蛋白定性方法的對比評價結果顯示,干化學法陽性率最高,為30.8%,且靈敏度較高,但誤診率較高,加熱乙酸法特異度最高,三種方法各有優缺點,應綜合分析,慎重選擇檢測方法,與本研究結果相符。
綜上,尿蛋白陽性結果在臨床上具有重要意義,三種尿蛋白檢驗方法各有優劣,相輔相成,檢查時應持續多次驗證,以減少誤診率與漏診率,提高結果準確性。
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R446.1
A
1672-5018(2016)07-257-02