新生兒輸血獲得性巨細胞病毒感染的前瞻性研究

劉紅玲　勞富娟

摘要：目的 探討輸血獲得性巨細胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染在新生兒重癥監護病房（neonatal intensive care unit，NICU）中的發生率，提出預防措施。方法 第一階段收集我院NICU 114例其母為CMV-抗體陰性的接受輸血的新生兒。第二階段，另外檢測了28例其母為CMV抗體陽性或陰性的、出生體重<1250g的接受新生兒。所有的142例新生兒均在最后一次輸血后的第6～12w每周1次和每月1次做病毒培養。結果 142例研究對象中126例（126/142，88.7%）新生兒血清CMV抗體陰性，16例（16/142，11.3%）新生兒血清CMV抗體陽性發生了CMV感染。結論 新生兒輸血獲得性CMV感染發生率和死亡率高。建議新生兒，尤其是低出生體重兒給予血清CMV-特異性抗體陰性、少白細胞的成分輸血（紅細胞、血小板及血漿），不能輸注白細胞。

關鍵詞：輸血獲得性巨細胞病毒感染；新生兒；低出生體重兒

輸血被認為是新生兒CMV感染的一種來源。其母親為CMV血清抗體陰性低出生體重兒或接受多次輸血的新生兒是輸血獲得性CMV感染的最高危人群。新生兒輸血獲得性CMV感染高發生率及高死亡率使得各醫療機構的輸血科意識到預防其發生的重要性。盡管使用冰凍去甘油化血液及其制品，或CMV抗體陰性的血液及其制品可以有效防止輸血獲得性CMV感染的傳播，但其成本昂貴。

本研究的目的是證明輸血獲得性CMV感染在NICU中的發生率，從而介紹有效可行的方法來預防這一輸血并發癥。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究分2個階段。第一階段，選取從2013年10月～2014年6月入住我院NICU的新生兒（包括正常出生體重兒和低出生體重兒），我們使用酶聯免疫吸附試驗檢測母體、臍帶或新生兒血清的CMV-特異性IgG抗體。選取了114例其母親血清CMV-IgG抗體陰性的輸過血的新生兒作為研究對象。所有受試新生兒的父母簽署輸血知情同意書及本研究知情同意書。由于CMV感染的陽性率很低，第二階段，我們選取了28例出生體重<1250g早產兒（包括其母血清CMV抗體陽性及陰性的早產兒）作為研究對象。所有的研究對象僅給予母乳喂養或經過消毒的配方乳喂養。母親血清CMV-抗體陽性，母乳需經過病毒滅活（加熱）再喂給新生兒。

1.2病毒培養 每個研究對象從最后一次輸血開始6～12w，每周取尿標本做病毒培養，每月取咽拭子標本做病毒培養，每月取血清標本做病毒培養。尿標本和咽拭子標本在單層人胚胎肺細胞及含有2%的牛血清培養基上接種并復制。每2w檢測一次培養基上的由CMV所產生的典型的細胞病變效應。

1.3血清學檢查 備好CMV及其對照抗原將其置于試管中。然后用0.1ml碳酸鹽緩沖液稀釋0.05mlCMV及其對照抗原使其為pH 9.6，含有0.02% NaN3將其置于37℃環境中4h，然后用0.5%的鹽水沖洗3次。加入0.05ml牛血清，使其為pH7.2，含有0.5%牛血清白蛋白（bovine serum albumin， BSA），0.02NaN3。置于37℃環境中30min，去除過量的抗體。

用酶聯免疫吸附試驗測定血清CMV-特異性IgG。如果以前血清CMV-特異性IgG陰性，本次檢測陽性的新生兒，再次取血清標本檢測來排除假陽性。如果CMV-IgG陽性同時也檢測血清CMV-特異性IgM。

1.4備血及血液制品 所有的血液制品來源于濰坊市中心血站自愿獻血者。紅細胞來源于Rh血型供血者與受血者相同的O型新鮮血液（6d之內的血液）。新鮮冰凍血漿來源于Rh血型供血者與受血者相同的AB型新鮮血液。血小板不需特殊準備。所有研究對象均沒有輸注白細胞制劑。

2 結果

第一階段，54例為其母親為血清CMV-特異性抗體陰性的新生兒（54/114，47.1%）。64例新生兒（64/114，56.1%）父母完成了隨訪。30例新生兒（37/114，32.5%）在出院后失訪，沒有完成其后的標本采集及CMV-特異性抗體的檢測，無法獲知是否因為輸血而導致輸血獲得性CMV感染。13例（13/114，11.4%）在新生兒期死亡。我們排除了失訪和死亡研究對象。12例低出生體重兒（<1250g）且輸注CMV-特異性抗體陰性血液的新生兒沒有參與本研究。紅細胞制劑供血者：均數（9.7±8.6），范圍1～24人。血漿供血者：均數（6.5±9.3），范圍0～32人。第二階段，另外28例新生兒全部完成隨訪，其中12例（12/28，42.9%）其母親血清CMV-特異性抗體陰性，16例（16/28，57.1%）其母親血清CMV-特異性抗體陽性。在所有供血者中42.5%（296/696）其血清CMV-特異性抗體陽性。

僅2例新生兒發生了CMV感染，2例新生兒血標本中的IgM均對CMV發生反應，其中1例其母親為血清CMV-特異性抗體陰性，1例其母親為血清CMV-特異性抗體陽性。接受1單位CMV感染的成分輸血，新生兒（其母為血清CMV-特異性抗體陰性）發生獲得性CMV感染的幾率約為0.16%；接受CMV-特異性抗體陽性的成分輸血，發生獲得性CMV感染的幾率約為0.37%。本研究中新生兒一般情況及輸血性獲得性CMV感染的發生率見表1。

本研究的第一階段有1例輸血獲得性CMV感染的新生兒，出生體重1110g，孕齡30w，其母為血清CMV-特異性抗體陰性。此新生兒病情復雜患有壞死性小腸結腸炎，手術切除了狹窄的乙狀結腸。在生后的11w出現CMV感染癥狀，表現為肝臟腫大、黃疸、肝功能明顯受損。此新生兒先后接受了紅細胞成分輸血（來源于15位供血者）和血漿輸注（來源于12位供血者），其中，7位紅細胞供血者及6位血漿供血者血清CMV-特異性抗體陽性。

本研究的第二階段13例其母為血清CMV-特異性抗體陽性的新生兒中有1例發生了輸血獲得性CMV感染。此例新生兒出生體重890g，孕齡27w，剖腹產兒，生后沒有母乳喂養。可以排除母嬰傳播性CMV感染。在其住院期間，由于壞死性小腸結腸炎而手術切除了一段小腸，還患有支氣管肺發育不良及持續胎兒循環。在生后8w時出現CMV感染表現，以呼吸道和消化道癥狀為主，氣促、發紺、間質性肺炎表現，黃疸、肝脾腫大等。本患兒在生后10w死亡。此患兒在接受過紅細胞成分輸血（來源于20位供血者）、血小板成分輸血（來源于30位供血者）和血漿輸注（來源于30位供血者）。其中，9位紅細胞供血者、13位血小板供血者和18位血漿供血者血清CMV-特異性抗體陽性。

本研究顯示新生兒（其母血清CMV-特異性抗體陽性）輸血獲得性CMV感染發生率明顯低于Yeager[1] and Adler[2]的研究。Alder等的研究發現約24%（7/29）其母血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒（<1250g）發生輸血獲得性CMV感染。而本研究中一般情況均衡科比的新生兒輸血獲得性CMV感染發生率僅為2.4%（1/41），兩組比較（P<0.01，χ2檢驗）。Yeager等研究顯示約24%（10/41）血清CMV-特異性抗體陰性的新生兒接受>1次紅細胞成分輸血或>50ml的全血就有可能發生輸血獲得性CMV感染，而本研究顯示僅1.4%（1/62）的發生率，兩組比較，差異有明顯統計統計學意義（P<0.001，χ2檢驗）。

3 結論

盡管本研究中輸血獲得性CMV感染的發生率與Yeager和Adler的研究比較差異有顯著統計學意義。另外3項研究顯示輸血獲得性CMV感染發生率有明顯的地區差異。Lamberson等[3]研究報道：其母為血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒輸血獲得性CMV感染的發生率為1.8%（7/386）。Smith等[4]報道：其母為血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒（<1250g）輸血獲得性CMV感染的發生率為8.7%（2/23）。Bayer等[5]報道：其母為血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒（<1500g）輸血獲得性CMV感染的發生率為6.9%（2/29）。

輸血獲得性CMV感染的發生率各報道有較大差異的原因不是很明確。本研究中供血者血清CMV-抗體陽性率為42.5%，Yeager等的研究中為45.3%，Alder等的研究中為34%。在所有研究中供血者的年齡差異沒有統計學意義。

有關研究證明血清CMV-特異性IgM陽性的供血者（提示近期有CMV感染）傳染性較強。是否所有血清CMV抗體陽性的血細胞成分輸血供血者均能傳播CMV感染不明確。接受血清CMV-特異性抗體陽性血液次數和數量的多少可能是導致輸血獲得性CMV感染的關鍵因素。如果一個新生兒在短時間需要接受多次紅細胞成分輸血或較多單位的成分輸血，輸血獲得性CMV感染發生的危險性較高。在本研究中很少有新生兒接受同一個供血者的血液或血液制品。僅30例血清CMV-特異性抗體陰性的新生兒在整個治療過程中接受>50ml 血清CMV特異性抗體陽性血液，而且治療過程持續數月之久。2例發生輸血獲得性獲得性CMV感染的新生兒均在生后的一個月內接受>50ml的血清CMV抗體陽性的輸血。

輸血獲得性CMV感染與所輸注的成分輸血的血液成分相關聯性強。血清CMV抗體陰性的血液或去白細胞的血液成分輸注大大減少輸血獲得性CMV感染的發生率。

D.G.NJERU等[6]研究報道，供血者中血清CMV-IgG和IgM陽性率分別為97.0%和3.6%。女性陽性率要高于男性。因此，許多學者建議女性在受孕前要檢測血清CMV特異性抗體，在受孕前清除體內的CMV，以防母嬰傳播。由于供血者CMV-特異性抗體的高陽性率，實際上幾乎所有的供血者均有可能暴露于CMV。即使血清CMV-抗體陽性的感染者，CMV也會在白細胞內處于休眠狀態。因此，減少或去除白細胞的成分輸血會減少輸血獲得性CMV感染的發生。對于高危人群，包括低出生體重兒、艾滋病患者、放化療所致骨髓移植的腫瘤患者及腎移植患者要輸注血清CMV-特異性抗體陰性、少白細胞的成分輸血（紅細胞、血小板及血漿），不能輸注白細胞。

參考文獻：

[1]Yeager AS， Grumet FC， Hafleigh EB， et al. Prevention of transfusion-acquired cytomegalovirus infections in newborn infants[J].J Pediatrics，2008，108：287-287.

[2]Adler SP， Chandrika T， Lawrence L， et al. Cytomegalovirus infections in neonates acquired by blood transfusions[J].Pediatric Infectious Disease Journal，2003，22：114-118.

[3]Lamberson H， McMillan J， Weiner L， et al. Nursery acquired cytomegalovirus （CMV） infection[J].Tranfusion，2003，29：418.

[4]Simth D， Wright P， Estes W， et al. Posttransfusion cytomegalovirus （PTCMV） infection in neonates weighting less than 1250 grams[J].Transfusion，2004，29：430.

[5]Bayer WL， Buckley SE，Jenkins DC， et al.Acquired cytomegalovirus infections in transfused， premature neonates[J].Blood，2003，74：（suppl 1）：232.

[6]D.G.NJERU， W.O.MWANDA， G.W.KITONYI. Prevalence of Cytomegalovirus Antibodies in Blood Donors at the National Blood Transfusion Center[J].East African Medical Journal，2009，9：（Suppl）：S58.

編輯/趙恒德