人血白蛋白中鈉離子含量對熱穩定性影響的研究

趙朋朋 靳繼忠 曹大偉 李慶英 董靜

【摘要】目的 采用還原光度法測定本公司生產的人血白蛋白中鈉離子的含量 ，并確定人血白蛋白熱穩定性的最優條件。方法 采用濁度儀對不同鈉離子含量的經過熱穩定性試驗的人血白蛋白后進行澄清度分析。 結果 不同鈉離子含量人血白蛋白熱穩定存在差異。結論 壓濾法生產的人血白蛋白鈉離子含量維持在105～125mmol/L時，其熱穩定性最好。

【關鍵詞】人血白蛋白；熱穩定性

本公司人血白蛋白的生產較之普遍采用的低溫乙醇法中的Cohn6+9 法 [1，2]， 改成一次性進行組分 I+Ⅱ+Ⅲ沉淀。改進后的工藝具有分離周期短、 參數易于控制，熱穩定性好。國內外對于人血白蛋白的熱穩定性均有報道[3，4]，研究發現在蛋白濃度為20%時，pH值、辛酸鈉濃度對穩定性幾乎無影響[5，6]，而鈉離子含量影響明顯，而考慮到實際生產取樣量的限制，均未對鈉離子含量的影響進行詳細研究，同時由于熱穩定性試驗采用肉眼觀察無法真實的反映質量指標，本試驗通過用濁度計進行檢測并統計100批次100個樣品的濁度值，真實反映了鈉離子含量對人血白蛋白熱穩定性的影響，以便達到更好的質控目的。

1 儀器與試藥

儀器

火焰光度計（上海傲譜分析儀器有限公司）；濁度儀（上海昕瑞）；CM-3型澄明度檢測儀（天津藥典標準儀器廠）

試藥：人血白蛋白（山東泰邦生物制品有限公司）

2 方法

從100批次成品中每一批隨機選一支，然后進行鈉離子含量的檢測，然后將100支產品進行50h 50℃加溫，對加溫前后濁度值進行對比。

3 結果

3.1 濁度為1.64 NUT的制品在燈檢時發現可見異物不合格，而在熱穩定試驗后該制品的濁度也在不合格范圍內，但由于可見異物的種類較多，不能簡單的認為可見異物不合格的熱穩定試驗后濁度都會在不合格范圍內。見表1。

3.2 熱穩定實驗前后不合格品增加到4瓶，不合格品中鈉離子的含量主要在高低兩個范圍。見表2。

4 討論

本公司通過壓濾法生產的合格的人血白蛋白濁度均小于2 NUT，而通過試驗可以看出濁度值可以較為準確的反映熱穩定性結果，但是考慮到可見異物的不確定性，濁度檢測可以作為澄清度檢測前的控制指標。

對于本公司工藝生產的制品，鈉離子主要來自于組分I+Ⅱ+Ⅲ沉淀、組分Ⅴ超濾和配制中Nacl的加入，鈉離子的含量對人血白蛋白的穩定性要較大影響，在較低含量56.3 mmol/L～94.5 mmol/L和較高含量133.5 mmol/L～157.7 mmol/L時穩定性較差，2015版藥典對于人血白蛋白鈉離子含量要求是≤160mmol/L[7]，而對于本工藝來說最優的含量范圍為105 mmol/L ～125 mmol/L，不同的工藝存在差異。

【參考文獻】

[1]王 文，張茂宏， 徐從高.Epo和鐵代謝與惡性腫瘤貧血[J].中華血液學雜志， 2 0 0 1 ； 2 2（4）：2 2 2 ～3.

[2]張之南，等.血液病診斷及療效標準[M]，北京：科學出版社，1 9 9 8.3 0～2.

[3]中國生物制品標準化委員會. 中國生物制品規程[M]， 北京：中國醫藥科技出版社，2000.187.

[4]Cohn P .Proceeding of the workshop on albumin[M]. DHEW Pubhcaion，1975.323.

[5]康建瑞. 關于白蛋白熱穩定性及其影響因素的初步分析[J]. 中國輸血雜志，2001，14（5）：281～282.

[6]呂秀華. 人血白蛋白制品濁度與穩定性的分析[J]. 中國生物制品學雜志，2002， l 5（6）：366～368.

[7]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典三部[M]. 北京：中國醫藥科技出版社，2015，244～245.