SIRT1蛋白在乳腺癌變過程組織中的差異性表達及臨床意義

曹玉文 李玉聰 陳曉文 艷

[摘要] 目的 研究沉默信息調節因子（SIRT1）在女性乳腺增生癌變組織中的表達及其與乳腺癌患者臨床病理特征的相關性。 方法 采用免疫組化的方法對40例癌旁正常乳腺組織、40例乳腺普通型導管增生、32例導管原位癌、80例乳腺浸潤性導管癌組織中SIRT1蛋白的表達進行檢測，分析SIRT1在乳腺良、惡性病變組織中的分布特點。結果 SIRT蛋白在乳腺癌旁正常組織與浸潤性導管癌、原位癌、普通型導管增生兩組之間蛋白表達有顯著差異（χ21=25.13，χ22=8.54，χ23=25.13， P<0.05），UDH、 DCIS、IDC兩兩比較中表達率無明顯差異（χ21=1.14，χ22=2.78，χ23=1.19，P>0.05）， SIRT1蛋白的表達率在淋巴結有無轉移及PR性質上比較有明顯差異性（χ21=4.56，χ22=4.94，P<0.05），而與患者年齡、組織學分級、TNM分期、ER無顯著相關性（χ21=1.68，χ22=0.43，χ23=0.26，χ24=0.60，P>0.05）。結論 該研究提示SIRT1蛋白高表達可能起促癌作用，低表達起到抑癌作用，IRT1蛋白的表達可能會成為乳腺癌細胞發生發展中的重要標志物。

[關鍵詞] SIRT1，乳腺浸潤性導管癌，臨床病理特征

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2016）03（b）-0050-02

[Abstract] Objective To research the expression of silent information regulator （SIRT1） in the female breast cancer tissue and its correlation with the clinical pathologic features in patients with breast cancer. Methods The expression of SIRT1 protein in the 40 cases with cancer surrounding normal breast tissue， 40 cases with breast usual ductal hyperplasia， 32 cases with ？ductal carcinoma in situ and 80 cases with breast invasive ductal carcinoma were detected by the immunohistochemical method， the distribution features of SIRT1 in the benign and malignant breast lesions were analyzed. Results There was an obvious difference in the SIRT protein expression between the cancer surrounding normal breast tissue and infiltrating ductal carcinoma， carcinoma in situ and usual ductal hyperplasia （χ21=25.13， χ22=8.54， χ23=25.13， P<0.05） ， there was no obvious difference in the expression rate of UDH， DCIS and IDC by pairwise comparison（χ21=1.14， χ22=2.78， χ23=1.19， P>0.05） ， there was an obvious difference in the expression rate of SIRT1 protein in the lymph node metastasis or not and PR property， （χ21=4.56， χ22=4.94， P<0.05） ， but it has no obvious correlation with the age， histological grade， TNM staging and ER of the patients，（χ21=1.68， χ22=0.43， χ23=0.26， χ24=0.60， P>0.05）. Conclusion The study reminds that the high expression of SIRT1 protein may promote cancer， the low expression may depress cancer， and the IRT1 protein expression may be an important marker of the occurrence and development of breast cancer cells.

[Key words] SIRT1； Breast invasive ductal carcinoma； Clinical pathologic features

乳腺癌是中國女性最常見的癌癥，死亡率較高[1]。該研究選自石河子大學醫學院一附院病理科2000年1月—2010年9月間乳腺石蠟包埋組織192例，對40例癌旁正常乳腺組織（ANBT）、40例乳腺普通型導管增生（UDH）、32例導管原位癌（DCIS）、80例乳腺浸潤性導管癌（IDC）組織中SIRT1蛋白的表達進行檢測，分析其在乳腺癌變發生、發展過程中的表達趨勢及與臨床病理參數之間的關系，旨在為乳腺癌的早期診斷提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究標本該選自石河子大學醫學院一附院病理科乳腺石蠟包埋組織192例：其中包括乳腺癌旁正常組織40例（取自距離乳腺癌癌組織邊緣4 cm以上， 經病理證實為正常乳腺組織的標本）、普通型導管增生40例、導管原位癌32例、乳腺浸潤性導管癌80例。所有病例均經病理確診，且術前均未行放療、化療和內分泌治療。同時收集及整理乳腺癌患者年齡， 腫瘤組織學分級， 病理分期， 淋巴結轉移以及ER、PR、HER-2的表達情況等主要臨床病理資料。

1.2 組織芯片的制備

所有病例復診后根據HE切片標記出的典型病變范圍， 應用法國ALPHELYS公司生產的型號為MiniCore的Tissue Array全自動組織芯片儀在每張HE切片標記出典型病變對應的蠟塊處取樣， 移至組織芯片蠟塊上。取樣針直徑1 mm， 制成乳腺病變組織（ANBT、UDH、DCIS、DIC）之組織芯片蠟塊。連續4 μm切片， 制備成組織芯片切片備用。按同樣方法制備另一個取自同一份標本且陣列設計相同的組織芯片蠟塊作為副本， 以便進行重復實驗。采用組織芯片免疫組化 Envision法檢測SIRT1蛋白表達的情況。

1.3 結果的判定

綜合考慮陽性細胞百分比及著色強度半定量判定結果：①每例患者均隨機觀察10個高倍視野，在無背景著色條件下，無著色為0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②計數10個高倍視野，陽性細胞在同類細胞中所占百分率<1%為0分，1%～24%為1分，25%～49%為2分，50%～74%為3分，75%～100%為4分；最終結果根據陽性細胞百分比積分與著色強度積分相乘所得總積分判定，總積分0～3分認為是低表達，4～12認為是高表達。

1.4 統計方法

所有實驗數據均采用SPSS 17.0統計軟件進行分析，計數資料用百分比表示，采用χ2檢驗，α=0.05為有差異性標準。SIRT1蛋白表達在乳腺良惡性病變中的陽性率的差異用χ2檢驗，SIRT1的表達與臨床病理學指標的相關性采用分類變量關聯性分析。

2 結果

2.1 乳腺病變組織中SIRT1蛋白的表達情況

SIRT蛋白在乳腺癌旁正常組織與浸潤性導管癌、原位癌、普通型導管增生兩組之間蛋白表達差異有統計學意義（P<0.05），UDH、 DCIS、IDC兩兩比較中表達率差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 SIRT1蛋白的表達與臨床病理特征的關系

在80例乳腺浸潤性導管癌組織中，SIRT1蛋白的表達率在淋巴結有無轉移及PR性質上比較差異有統計學意義（P<0.05），而與患者年齡、組織學分級、TNM分期、ER無顯著相關性，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

3 討論

SIRT1幾乎在所有細胞中都表達，但表現類型會有所區別，其在大腦、心、肺等組織中顯著存在，有學者發現SIRT1表達所產生的蛋白質與人體其他類型的蛋白質一樣，都有兩面性作用，在一些癌細胞中起到抑制細胞發展的作用。但有研究表明SIRT1在如乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、等多類型的癌癥組織中低表達較少、高表達較多，低表達這些組織中起抑制癌細胞發展的作用而高表達有促進癌細胞發展的作用[2-3]。對各種乳腺病變中SIRT1蛋白的表達方式進行研究，結果顯示，SIRT蛋白在乳腺癌旁正常組織與浸潤性導管癌、原位癌、普通型導管增生兩組之間蛋白表達有顯著差異（P<0.05），UDH、 DCIS、IDC兩兩比較中表達率無明顯差異（P>0.05）。表明SIRT1高表達在乳腺的發生、發展的過程中起促進癌細胞發展的作用，低表達為抑癌作用，與相關研究一致，表明SIRT1高表達在乳腺組織癌變過程中表達為促進癌細胞發展的作用[4-5]。

進一步對SIRT1蛋白表達與臨床病理特征的關系進行分析，結果發現，伴有淋巴結轉移乳腺癌患者SIRT1表達水平明顯低于無淋巴結轉移患者。表明低表達的SIRT1促進了乳腺癌的發展，進一步證明了SIRT1在乳腺癌中起抑癌基因的作用[6-7]。同時我們發現PR陽性乳腺癌組織中SIRT1表達水平明顯高于PR陰性乳腺癌，差異有統計學意義（P<0.05），該研究推測SIRT1可能通過PR信號通路參與了乳腺癌的發展，但由于研究樣本量較少，尚需更大樣本量研究進一步予以證實。且我們發現SIRT1表達水平與患者年齡、組織學分級、TNM分期、ER無顯著相關性（P>0.05）。表明SIRT1表達與患者外因無關，因此SIRT1可能是衡量乳腺癌進展和預后的有效生物學指標[8]。

綜上所述，該研究提示SIRT1蛋白高表達水平可能起促癌作用，低表達起到抑癌作用，IRT1蛋白的表達可能會成為乳腺癌細胞發生發展中的重要標志物。由于該研究樣本較小，研究結論還待用更多更大樣本結果驗證。SIRT1如何影響乳腺癌的發生發展的分子機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1] 李云芬，楊曉娟，張婷，等.乳腺癌組織中乳腺癌缺失基因1的表達研究進展[J].現代腫瘤醫學，2013，21（8）：1888-1891.

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[4] 朱春英，郭淑芹，張云良，等.SIRT1在合并2型糖尿病乳腺癌中的表達及意義[J].國際腫瘤學雜志，2011，38（11）：864-867.

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[7] 王剛平，梁云愛，張作峰，等.CD105標記微血管密度及HIF-1α在乳腺癌及癌前病變中的表達及意義[J].中華臨床醫師雜志：電子版，2013，7（16）：30-34.

[8] 朱利利，熊正文，李永申，等.Wnt1蛋白和β-catenin蛋白在乳腺浸潤性導管癌中的表達及意義[J].中國醫師雜志，2013， 15（10）：1330-1333.

（收稿日期：2015-12-09）