胡基華 陳靜宇 曹旭 孟力強(qiáng) 姜威 劉宇帥 張淑梅 李晶
(黑龍江省科學(xué)院微生物研究所,哈爾濱,150010) (黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院)
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高產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的粘質(zhì)沙雷氏菌株的誘變選育1)
胡基華陳靜宇曹旭孟力強(qiáng)姜威劉宇帥張淑梅李晶
(黑龍江省科學(xué)院微生物研究所,哈爾濱,150010)(黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院)
摘要以黑龍江省科學(xué)院微生物研究所實(shí)驗(yàn)室保存的1株粘質(zhì)沙雷氏菌S68為出發(fā)菌株,進(jìn)行原生質(zhì)體紫外線、NaNO2和復(fù)合誘變,通過透明圈對比和酶活測定,最終獲得1株產(chǎn)酶量高于原始菌株4.3倍的粘質(zhì)沙雷氏菌誘變菌株,產(chǎn)酶量達(dá)到4.98 μg·h(-1)。確定該菌株最佳誘變方法為復(fù)合誘變,首先進(jìn)行紫外誘變(高度為30 cm,誘變時(shí)間為12 s),再用化學(xué)誘變(0.4 mol·L(-1)NaNO2誘變5 min),經(jīng)驗(yàn)證該誘變菌株遺傳穩(wěn)定。
關(guān)鍵詞粘質(zhì)沙雷氏菌;幾丁質(zhì)酶;誘變
分類號Q93-31
High Chitinase ofSerratiamarcescensStrain Mutation
Hu Jihua, Chen Jingyu
(Institute of Microbiology, Heilongjiang Academy of Sciences, Harbin 150020, P. R. China); Cao Xu, Meng Liqiang, Jiang Wei, Liu Yushuai, Zhang Shumei, Li Jing(Institute of Advanced Technology, Heilongjiang Academy of Science)//Journal of Northeast Forestry University,2016,44(3):106-109.
WithSerratiamarcescensS68 in the Heilongjiang Academy of Sciences Institute of Microbiology Laboratory, we obtained an enzyme production 4.3 times higher than the original strain ofS.marcescensmutant strain by using protoplast ultraviolet, NaNO2and composite mutagenesis, with the enzyme production of 4.98 μg·h-1. We determined that the best methods of mutagenesis of the strain was the composite mutagenesis by first UV mutation (height of 30 cm, for mutagenesis time of 12 s), and then the chemical mutagenesis (0.4 mol·L-1NaNO2mutagenesis for 5 min).
KeywordsSerratia marcescens; Chitinase; Mutation
粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescens)亦稱靈桿菌,是革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌,屬于腸桿菌科克白雷氏菌族中的沙雷氏菌屬,為該屬的代表菌種,多存在于沿海鹽堿土壤中,能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶[1]。
幾丁質(zhì)酶具有多種生理功能,應(yīng)用領(lǐng)域十分廣泛。自Benecke首次報(bào)道了枯草芽孢桿菌(Bacilluschitinovorus)能夠產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶以來,又發(fā)現(xiàn)了許多產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的微生物種類,包括細(xì)菌、放線菌和真菌等。其中對粘質(zhì)沙雷氏菌、褶皺鏈霉菌普安變種(Streptomycesplicatusvar.puanensis)及創(chuàng)傷貝內(nèi)克氏菌(Vibriovulnificus)[2-4]的研究較多。1986年Schlumbaum et al.[5]首次報(bào)道了提純的菜豆幾丁質(zhì)酶具有抗真菌活性。接下來的研究[6]發(fā)現(xiàn),提純的煙草、馬鈴薯、黃瓜等多種植物幾丁質(zhì)酶對立枯絲核菌等20多種病原真菌和非病原真菌的菌絲生長或孢子萌發(fā)具有抑制作用?!?br>