1例ABO血型正反鑒定不符病例分析

袁曉陽　陳潔

【摘要】 目的 加強對檢測減弱的ABO血型抗原的重視。方法 針對1例異型造血干細胞移植存活后的抗原減弱導致ABO血型正反鑒定不符， 用吸收放散等試驗進行鑒定， 并結合病史進行分析。結果 最終確定ABO血型。綜合考慮為其輸注供體血型的去白洗滌紅細胞。患者康復出院。結論 ABO血型正反定型是否一致很重要， 異型造血干細胞移植的患者， 輸血要謹慎。

【關鍵詞】 ABO血型；血型抗原；造血干細胞移植

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.11.152

一般情況下， 人類血型系統終身保持不變。但和其他紅細胞血型系統相比， ABO系統有其特殊性， 在特定條件下會發生抗原強度減弱、血型改變的情況。如某些疾病狀態可能使紅細胞抗原減弱或產生假抗原；還比如異型造血干細胞移植會因基因型的改變而導致血型表現型的改變。本院今年就曾發現1例由異型造血干細胞移植引起的血型抗原改變， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 患者， 男， 57歲， 2015年7月3日因雙側股骨頭無菌性壞死入本院骨外科行雙髖關節置換術， 術前備血時， 在做常規術前血型檢查的過程中， 發現其ABO血型正反定型不符。經詳細詢問病史， 得知患者28年前因患“白血病”于外院行“造血干細胞移植及大劑量激素治療”， 患者自述AB型， 而移植骨髓為B型， 并且患者在3年前因甲狀腺癌行甲狀腺全切及左側淋巴結清掃術， 輸注過B型去白懸浮紅細胞。

1. 2 試劑與儀器 抗-A， 抗-B標準血清 （北京金豪制藥股份有限公司）；抗D（IgM）單克隆抗體血型定型試劑， A1 、B紅細胞試劑， 不規則抗體篩查紅細胞， 以上試劑由斑珀斯公司提供；A、B、O型標準紅細胞（本實驗室自制）；微柱凝膠正反定型血型鑒定卡（DiaClon ABO/D+revers grouping）及抗人球蛋白配血卡（Dia Coombs）；全自動血型及配血系統（西班牙， WADIANA）；血型血清學離心機（Dianafuge離心機）；血型血清學孵育器（Dianafuge孵育器）；電熱恒溫水浴箱（DK-420型）。

1. 3 方法

1. 3. 1 血型正反鑒定試驗 參照文獻[1]方法采用微柱凝膠正反定型血型法進行檢測， 后又采用試管法復查。

1. 3. 2 吸收放散試驗 將患者紅細胞用生理鹽水洗滌3次， 然后取壓積紅細胞與等量的效價為1：32的抗-A、抗-B標準血清試劑4℃下混合進行吸收試驗；紅細胞放散試驗：用洗滌后的患者壓積紅細胞與抗-A、抗-B標準血清4℃混合1 h后， 洗滌5次， 在紅細胞中加入1/2容量的生理鹽水， 然后在 56℃下搖蕩， 后離心， 以熱放散法獲得放散液， 再用A、B標準紅細胞鑒定抗體。具體方法參照文獻[1]。

1. 3. 3 增強反定型反應 將患者血清分別與A1和B細胞的混合， 在室溫下孵育15～30 min， 無反應后又在4℃下孵育， 離心， 觀察結果。

1. 3. 4 紅細胞直接抗球蛋白（自身對照） 試驗（DAT） 將患者紅細胞生理鹽水洗滌3次后， 用低離子液配制所得5%紅細胞懸液50 μl， 與患者自身血清25 μl， 加入到抗人球蛋白微柱凝膠卡中混勻、孵育、離心， 觀察結果。

1. 3. 5 不規則抗體篩查試驗 采用微柱凝膠抗球蛋白技術測定患者血漿的不規則抗體， 記錄相關結果。

1. 3. 6 交叉配血試驗 采用微柱凝膠抗球蛋白技術， 用正、反定型的兩種血型的獻血員分別對患者進行交叉配血， 以助對其血型鑒定。

2 結果

2. 1 經過1.3.1之方法， 患者ABO血型正反定型的反應格局見表1。結果鑒定ABO血型正反定型不符， 正定型為B型， 反定型為AB型。

2. 2 吸收放散試驗 本試驗已先將抗血清效價稀釋到32倍， 否則抗血清被亞型紅細胞吸收后， 效價下降不明顯。實驗結果， 患者抗A血清效價吸收后較吸收前下降。患者紅細胞的吸收強度較強， 放散液的抗體強度較弱。見表2。

2. 3 增強反定型反應仍表明患者為AB型， 其不規則抗篩試驗和直抗結果均為陰性。用B型獻血員和AB型獻血員分別與患者進行交叉配血， 結果均主次側無凝集無溶血， 配血均為相合。

2. 4 患者血型確定及術中術后輸血情況 綜合患者病史及上述試驗結果， 確定患者ABO血型為AB型， 由于患者年輕時曾異型造血干細胞移植， 因此A抗原非常弱， B抗原正常。患者術中出血500 ml， 左側關節置換切口引出約400 ml， 共引流900 ml左右。考慮其近年有過B型紅細胞輸血史， 故術中給予輸注“B”型去白洗滌紅細胞2個單位， 術后又輸注2個“B”型去白洗滌紅細胞。輸血后患者無不良反應， 手術恢復良好， 術后14 d出院。

3 討論

人類的血型錯綜復雜， 盡管至今已發現 26個血型系統， 僅紅細胞上就有 200多個血型抗原， 但ABO 血型仍是人類血型系統中抗原免疫原性最強的一個血型系統[2]， 因此ABO血型在輸血工作中是最重要的， 具有很大的生物學意義。正常情況下， ABO血型系統的抗原強度不會輕易發生改變[3]。但是， 當患者機體的造血功能減弱， 或某些病理情況發生時， 會導致紅細胞表面血型物質的抗原性減弱， 或者產生假抗原[4]。這種由于紅細胞血型抗原表達發生改變或血清中抗體改變， 會致使血型判斷困難或者判斷錯誤， 不能輕易輸血[5]。

本例中， 患者本身可能在未進行造血干細胞移植前表現為AB型， 而移植B型骨髓后， 致使自身造血干細胞功能改變， 引起機體血型血清學發生變化， 自身紅細胞上的A抗原受到抑制， 因為在給患者做交叉配血試驗時， 用B型供者結果為主、次側均無凝集無溶血， 表明患者可能在造血干細胞移植后的一段時期內表現為B型。并且在3年前輸注過B型懸浮紅細胞， 并無溶血等其他不良反應發生， B型配血是相合的。然而， 這種改變是暫時的， 當患者病情緩解、自身的造血功能開始活躍或生長時， 減弱的血型A抗原也逐步恢復正常表達， 這是一種動態的變化過程。本例中出現的ABO正反定型不符就可說明這一點。當出現正反定型不一致時， 切忌以正定型或反定型一方面結果做為 ABO 血型鑒定的唯一依據。本實驗進行紅細胞直接抗球蛋白試驗、不規則抗體篩查試驗結果表明， 患者機體內可排除可能引起抗體減弱或缺乏以及獲得性假抗原的物質。考慮由于紅細胞抗原減弱或缺乏而導致的ABO正反定型不吻合， 進行的吸收放散試驗證實了這一點， 即患者體內存在有減弱的A抗原。再進一步了解患者情況， 如診斷、年齡、妊娠史、病史、輸血史、用藥史、免疫球蛋白值等， 發現患者曾異型造血干細胞移植， 因為異型造血干細胞移植會因基因型的改變而導致血型表現型的改變[6]， 這為區分是病理情況下引起的 ABO 抗原減弱還是ABO亞型表現出的抗原減弱提供了有效的依據。因此該患者ABO 血型仍可以確定為AB型。但有數據顯示， 27例血型不相合患者的血型分別在移植后25～153 d（中位時間 61 d）轉為供者血型[7]。并且有學者認為， 這種異型造血干細胞移植的患者， 原有紅細胞凝集素逐漸消失[8]， 血型變異在受血者的血型跟供血者的血型一致后， 不會再出現其他變化， 不能再去除疾病或外界刺激等誘因后血型恢復到最初。而本例中， 因為患者并無白血病復發癥狀， 認為由于異型造血干細胞移植， 患者的體內呈現人工嵌合狀態， 2種血型物質都被機體認做自我， 不產生抗體， 所以對其進行AB型供者的交叉配血試驗結果同樣表現為主次側相合。但對其輸血要求格外慎重。考慮其近年輸注過B型懸浮紅細胞， A抗原弱化， 為確保患者輸血安全， 繼續輸注了B型去白洗滌紅細胞4個單位。

綜上所述， 正常人紅細胞上缺乏A或B抗原時， 其血漿中會出現相應的抗體， 這是正反定型試驗的基礎。ABO血型檢查， 一定要做正反定型。多數情況下， ABO血型正反定型是符合的。但由于疾病改變了紅細胞的表面結構， 或血漿蛋白發生變化， 臨床上會遇到正反定型不符合的情況。應根據患者的具體情況， 找出原因及相應的處理方法， 可以最大限度地減少血型鑒定錯誤， 保證實驗的準確性， 避免發生輸血反應。對于異型造血干細胞移植的患者輸血， 要綜合考慮， 可以遵從以下原則： 移植后對于交叉配血主側不合者， 紅細胞輸注受者血型， 血漿輸注供者血型， 至患者原凝集素消失后均改輸供者血型；對交叉配血次側不合， 紅細胞輸注供者血型， 血漿輸注受者血型， 至患者原血型抗原消失后均改輸供者血型；主、次側交叉配血均不合， 紅細胞輸注 O 型， 最好是洗滌紅細胞， 血漿輸注AB型， 最好是濾白的， 至患者原凝集素消失改輸供者血型。血小板最好配型輸注， 不合者輸注AB型。而對于異型造血干細胞移植的患者盡量用其他補液手段代替輸血， 防止即發型溶血反應、遲發型溶血反應、單純紅細胞再生障礙性貧血（PRCA）和過路淋巴細胞綜合征（PLS）， 影響干細胞移植的療效， 甚至危及受者生命。

參考文獻

[1] 黃菲， 李翠瑩， 甘新宇， 等.白血病致 ABO血型抗原減弱 4例. 中國輸血雜志， 2011， 24（1）：67-68.

[2] 高峰.輸血與輸血技術.北京：人民衛生出版社， 2003：189-192.

[3] Dentali F， Sironi AP， Ageno W， et al. ABO blood group and vascular disease： an update. Semin Thromb Hemost， 2014， 40（1）：49-59.

[4] 吳敏華， 陳活強， 蔡葵.惡性血液病引起ABO血型鑒定困難的探討. 實驗與檢驗醫學， 2008， 26（6）：690.

[5] 孫六娜， 羅恒， 蔡振華.急性髓性白血病引起ABO血型改變1例報道.檢驗醫學與臨床， 2012， 9（18）：2396-2397.

[6] 鄭柳.人類 ABO血型變異的原因分析.實用醫技雜志， 2008， 15（9）：1153-1154.

[7] 陳激揚， 王智， 采云.造血干細胞移植術后血型改變 1 例.武警醫學， 2012， 23（6）：523-524.

[8] 毛曉露， 胡麗華. ABO 血型不合的造血干細胞移植引起免疫性溶血的研究進展.臨床血液學雜志， 2010， 23（4）：251-252.

[收稿日期：2015-12-29]