非小細胞肺癌中E—cadherin、β—catenin和CXCR4蛋白表達及意義

申敬偉　舒紅

【摘要】 目的 研究上皮鈣粘附蛋白（E-cadherin）、β-連環蛋白（β-catenin）和趨化因子受體4 （CXCR4）在非小細胞肺癌（NSCLC）中的表達和臨床意義。方法 免疫組化SP法檢測73例NSCLC組織及20例正常肺組織E-cadherin、β-catenin和CXCR4表達。結果 E-cadherin表達與β-catenin的異常表達與腫瘤的分化程度及淋巴結轉移相關（P<0.05）；CXCR4表達與腫瘤的TNM分期及淋巴結轉移相關（P<0.05）。E-cadherin與CXCR4及β-catenin表達呈負相關（P<0.05）， β-catenin與CXCR4表達呈正相關（P<0.05）。結論 E-cadherin低表達、β-catenin異常表達和CXCR4高表達都可促進NSCLC的轉移， 且三者在NSCLC轉移中相互作用， 可能成為研究NSCLC轉移機制的新靶點。

【關鍵詞】 上皮鈣粘附蛋白；β-連環蛋白；趨化因子受體4；非小細胞肺癌；免疫組織化學

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.12.017

NSCLC占新發肺癌病例的75%～80%， 很多患者就診時已經發生了遠處轉移。近年來趨化吸引理論逐漸成為研究的熱點。腫瘤細胞的移動是由其所表達的趨化因子受體和靶器官表達的趨化因子所決定[1]。E-cadherin是細胞粘附分子的重要成員， 其表達減少或功能異常與腫瘤的發生、浸潤和轉移密切相關。在腫瘤轉移中， β-catenin的異常表達使胞膜完整性受損， 促進腫瘤細胞生長、侵襲和轉移。本研究探討E-cadherin、β-catenin和CXCR4在NSCLC中的表達， 具體報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2009～2010年中國醫科大學附屬盛京醫院手術切除的NSCLC組織73例， 20例癌旁正常肺組織作為對照。所有病例均無術前放化療史；男38例， 女35例；中位年齡61歲， 年齡≤60歲36例， >60歲37例；鱗癌21例， 腺癌52例；高分化22例， 中分化34例， 低分化17例；無淋巴結轉移38例， 淋巴結轉移35例；Ⅰ～Ⅱ期58例， Ⅲ～Ⅳ期15例。

1. 2 試劑與方法 鼠抗人E-cadherin、β-catenin單克隆抗體及兔抗人CXCR4多克隆抗體購自北京中杉生物技術公司， 免疫組化SP法， 按試劑盒說明書操作。

1. 3 統計學方法 采用SPSS13.0統計學軟件對數據進行統計分析。計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗；相關性采用Spearman等級進行分析。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 E-cadherin、β-catenin和CXCR4在NSCLC中的表達

E-cadherin在正常肺支氣管黏膜及腺上皮細胞胞膜出現棕色顆粒， NSCLC中膜表達明顯減弱， 部分NSCLC無表達。β-catenin在正常肺支氣管黏膜及腺上皮細胞胞膜出現棕色顆粒， NSCLC中膜表達減弱， 胞漿積聚/核異常積聚。CXCR4陽性定位于胞漿， NSCLC中CXCR4陽性率65.75%明顯高于正常肺組織陽性率15.00%。

2. 2 CXCR4、E-cadherin和β-catenin在NSCLC中表達與其臨床病理關系 CXCR4的陽性表達與TNM分期、淋巴結轉移相關（P<0.05）， E-cadherin的陽性表達與分化程度及淋巴結轉移相關（P<0.05）， β-catenin的異常表達與分化程度及淋巴結轉移相關（P<0.05）。見表1。

2. 3 E-cadherin、β-catenin和CXCR4在NSCLC中表達的相互關系 E-cadherin和CXCR4的表達呈負相關（r=-0.343， P<0.05）， CXCR4與β-catenin異常表達呈正相關（r=0.301， P<0.01）， E-cadherin與β-catenin異常表達呈負相關（r=-0.295， P<0.05）。

3 討論

Chen等[2]最近證實CXCR4的高表達與NSCLC的腦轉移相關。本實驗中CXCR4的陽性率65.75%明顯高于正常肺組織的陽性率15.00%， 與相關學者發現上皮性癌乳腺癌原發灶高表達趨化因子受體CXCR4結果一致。CXCR4的表達與年齡、性別、病理類型、分化程度無關（P>0.05）， 與臨床分期、有無淋巴結轉移相關（P<0.05）， 提示臨床分期晚的NSCLC中CXCR4的含量高于分期早的， 有淋巴結轉移的NSCLC中CXCR4的含量高于無淋巴結轉移者， 說明NSCLC臨床分期晚促使CXCR4的含量增高進而促進淋巴結轉移， 其高表達可能是判斷NSCLC是否轉移的一個指標。

本研究中發現E-cadherin低表達與NSCLC淋巴結轉移及分化程度相關（P<0.05）， 提示E-cadherin缺失有促進腫瘤發生和向周圍組織轉移的趨勢。E-cadherin可成為甲狀腺癌[3]轉移和預后判斷指標之一。CXCR4表達與E-cadherin呈負相關， 可能原因是高表達的CXCR4通過自分泌作用使E-cadherin向胞膜的轉運過程減慢而在胞內聚集， 胞膜的E-cadherin表達減少， 依賴于E-cadherin的細胞間正常連接遭到破壞導致細胞間連接松散， 有利于腫瘤細胞脫離而促進轉移。Tucci等[4]發現在皮膚黑色素瘤中E-cadherin表達缺失和CXCR4表達增加與不良預后有關。

本研究發現β-catenin胞膜表達減少， 主要為胞漿和胞核的異常聚集。89.04%的患者β-catenin在胞漿和（或）胞核內異常聚集， 癌細胞膜上的β-catenin向胞質中轉移， 可能導致cadherin/catenin復合體結構破壞和功能障礙， 防止癌細胞轉移的屏障消失， 從而使NSCLC發生和轉移。β-catenin的異常表達與淋巴結轉移及分化程度相關（P<0.05）， 表明β-catenin 功能異常與NSCLC發生、發展和轉移有密切關系， 是肺癌轉移的重要機制。本研究顯示CXCR4 與β-catenin的異常表達呈正相關。

總之， E-cadherin低表達、β-catenin異常高表達與CXCR4高表達都可以促進NSCLC轉移且三者之間相互作用， 聯合檢測E-cadherin、β-catenin及CXCR4有助于判斷NSCLC的轉移潛能和患者的預后。

參考文獻

[1] 王青青， 王建莉. 趨化因子及其受體與腫瘤.中國腫瘤生物治療雜志， 2001， 8（1）：2.

[2] Chen G， Wang Z， Liu XY， et al. High-level CXCR4 expression correlates with brain-specific metastasis of non-small cell lung cancer. World J Surg， 2011， 35（1）：56-61.

[3] 李春生.甲狀腺乳頭狀癌組織E-cadherin蛋白表達及其與頸部淋巴結轉移相關性研究.中華腫瘤防治雜志， 2011， 18（2）：102-104.

[4] Tucci MG， Lucarini G， Brancorsini D， et al. Involvement of E-cadherin， β-catenin， Cdec42 and CXCR4 in the progression and prognosis of cutaneous melanoma. Br J Dermatol， 2007， 157（6）： 1212-1216.

[收稿日期：2015-12-07]