高效液相色譜儀結(jié)果不確定度分析

摘 要：液相色譜技術(shù)本質(zhì)上是高效的分離分析技術(shù)，隨著專業(yè)技術(shù)水平的提高，其用于檢測的精度也不斷提高。為充分發(fā)揮其所具有的優(yōu)勢，需要對現(xiàn)存的結(jié)構(gòu)不確定度問題進(jìn)行分析，確定各影響因素，并采取措施進(jìn)行優(yōu)化，本文對此進(jìn)行了簡要分析。

關(guān)鍵詞：液相色譜儀；不確定度；檢定

1 高效液相色譜儀結(jié)果不確定度分析

1.1 不確定度分析

高效液相色譜儀結(jié)果不確定度，即被測值不能確定的程度，反應(yīng)了測試結(jié)果的信賴程度，是衡量檢定結(jié)果質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。最終所得檢定數(shù)值與所述結(jié)果越接近，則證明質(zhì)量和水平越高，具有更高的價值。不確定度越大，則證明測量結(jié)果質(zhì)量越低，使用價值越小。與傳統(tǒng)測量誤差表述結(jié)果相比，不確定度可以更準(zhǔn)確的表達(dá)測量值不確定度，表示了各項值與平均值的最大距離。如果檢測結(jié)果為一列數(shù)：A1，A2，…，An，平均值為A，則不確定度為max{|A-Ai|，i=1，2...n}。

1.2 不確定度原因

1.2.1 輸液系統(tǒng)

（1）梯度誤差

主要體現(xiàn)在4個方面，即：兩段輸出信號間距離測量所存不確定度；紫外檢測器對丙酮相應(yīng)非線性造成的不確定度；記錄器記錄信號值產(chǎn)生的不確定度；B溶劑含量不確定度。

（2）泵流量誤差

對于輸液系統(tǒng)檢定，一般應(yīng)用的計量器包括天平、秒表以及容量瓶，根據(jù)泵流量設(shè)定值誤差和流量穩(wěn)定性誤差計算公式，可得知不確定度存在的原因是天平砝碼校準(zhǔn)不當(dāng)，流量的質(zhì)量稱量不準(zhǔn)，以及流動相密度與要求相差較大等。

1.2.2 檢測器

（1）波長示值錯誤

主要體現(xiàn)在2個方面：一方面是固定波長UV檢測器波長示值誤差；另一方面則是可調(diào)波長UV檢測器波長示值錯誤，以及重復(fù)性檢定結(jié)果不確定性。

（2）基線噪聲和基線漂移

一方面是基線噪聲產(chǎn)生的檢定不確定度，保羅記錄儀靈敏度較低原因。另一方面，則是極限漂移檢定產(chǎn)生的不確定度，即起始點(diǎn)、終點(diǎn)測量誤差，和運(yùn)行時間控制造成的不準(zhǔn)確度。

1.2.3 柱溫箱溫度檢定

柱溫箱溫度檢定所用器具主要包括數(shù)字溫度計和數(shù)字電壓表，利用溫度設(shè)定值偏差和控溫穩(wěn)定性計算公式可以確定，出現(xiàn)不確定度的原因，主要是因為多次測量重復(fù)性、溫度設(shè)定值準(zhǔn)確性以及數(shù)字溫度計校準(zhǔn)不確定度，和數(shù)字電壓表校準(zhǔn)不確定度。

2 高效液相色譜儀結(jié)果不確定度分析

2.1 測量過程

溫度控制在15～30℃，相對濕度控制在20%～85%。液相色譜儀為LC-6A型；秒表為J9-1型，分度值小于0.01；分析天平為328a型，測量范圍為0.1～100g，分度值為0.1mg；數(shù)字溫度測量范圍在0～100℃，最小分度值為0.1℃；注射器為10μl、50μl、10ml各一支；容量瓶共包括10個50ml型號，2個250ml燒杯。另外，還需要試劑甲醛、丙酮、異丙醇等。檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括1×10-6、1×10-9g/ml硫酸奎寧/高氯酸水溶液，1×10-4、1×10-7g/ml萘甲醇溶液。利用液相色譜對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢定，要求不確定度在4%以內(nèi)，k=3。并且10μl微量進(jìn)樣器，不確定度應(yīng)控制在1%，k=3。正式測量時，將一定量溶液注射到溶液進(jìn)儀器內(nèi)，通過儀器讀取響應(yīng)值-峰面積，然后選擇標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液組分，將濃度差異小的注射到相同量溶液進(jìn)儀器，得到響應(yīng)值。

2.2 檢定結(jié)果不確定度評定

2.2.1 泵流量設(shè)定值誤差

3 結(jié)語

為提高液相色譜儀檢定結(jié)果的有效性，需要基于結(jié)果不確定度對各影響因素進(jìn)行分析，并且面對不同型號的儀器和計量器具，需要采取相應(yīng)的措施進(jìn)行分析評定，提高評定結(jié)果的有效性。

參考文獻(xiàn)

[1]馬靜芳.液相色譜儀測量結(jié)果不確定度分析與評定[J].科技資訊，2015，（6）：228.

（作者單位：山東魯抗生物制造有限公司）