氣相色譜法測定寬葉纈草揮發油中乙酸龍腦酯含量

【摘要】目的：建立寬葉纈草揮發油中有效成分乙酸龍腦酯的氣相色譜測定法。方法：色譜條件為DB-WAX毛細管色譜柱（0.32mm×25m），程序升溫60℃10℃/min120℃6℃/min140℃10℃/min230℃（5min），分流比為30∶1，FID檢測器，內標為萘。結果：乙酸龍腦酯在0.016～0.250mg范圍內呈線性關系（r=0.99999），加樣平均回收率為104.85%。結論：建立的方法簡便、靈敏、易操作，為寬葉纈草植物資源的開發利用奠定基礎。

【關鍵詞】寬葉纈草；乙酸龍腦酯；氣相色譜法

【中圖分類號】R927.11【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2016）21-0023-03

Determination of Bornyl Acetate in Volatile oil of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq by GC

HU LixiaWANG XiaoxianZHAO Ming*

Wuhan Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine， Wuhan 430022，China

Abstract：Objecive To develop a reliable method for determination of bornyl acetate in volatile oil of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq by gas chromatography. Methods A DB-WAX quartz capillary column was used and the temperature of column （0.32mm×25m） was programmed：程序升溫60℃10℃/min120℃6℃/min140℃10℃/min230℃（5min），The splitting ratio was 1∶[KG-*3/5]30. The FID was used as detector，and the naphthalene as internal standard. Results The standard curve was linear in the concentration range of 0.016～0.250mg/mL.The average recovery was 104.85%. Conclusion The new method can be used for quality assessment of leaves of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq. It was rapid，sensitive， precise with good reproducibility.

Keywords：Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq.；Bornyl Acetate；GC

敗醬科纈草屬植物寬葉纈草（Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq.），在我國南部各省區廣為分布，根及根莖入藥，具有解表散寒，活血調經，祛風除濕，鎮痛解痙的作用[1]。以寬葉纈草根為原料經水蒸氣蒸餾所得精油，為很好的香料和調香劑，在食品飲料、化妝品工業中有廣泛用途[2]。采用GC-MS測定其成分主要為乙酸龍腦酯（bornyl acetate）[3]，具有止瀉、鎮痛、抗炎及解痙的作用[4]。本文建立了以萘為內標，氣相色譜法測定寬葉纈草精油中乙酸龍腦酯的含量，為寬葉纈草生藥質量評價提供依據，并對采集于湖北不同地區的樣品進行了測定。

1儀器與材料

1.1儀器美國安捷倫6890N氣相色譜儀；DB-WAX毛細管柱。

1.2材料藥材分別采集于湖北西部恩施、宣恩、利川、巴東地區，經武漢大學藥學院王有為教授鑒定為敗醬科纈草屬寬葉纈草。乙酸龍腦酯對照品（中國藥品生物制品檢定所）；內標萘（色譜純，國藥集團化學試劑有限公司）；無水乙醇（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）。

2方法

2.1色譜條件色譜柱DB-WAX毛細管柱（0.32mm×25m），程序升溫60℃10℃/min120℃6℃/min140 ℃10℃/min230℃（5min），分流比為30∶1，氫火焰離子化檢測器（FID），進樣口和檢測器溫度為250℃，流速為1mL/min，進樣量1uL。色譜圖見圖1。

2.2標準溶液的制備精密稱取乙酸龍腦酯適量，加無水乙醇制成4.16mg/mL的溶液。

2.3內標溶液精密稱取萘適量，加無水乙醇制成1.01mg/mL的溶液。

2.4供試品溶液的制備精密稱取揮發油50mg置10mL量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，精密量取該溶液和內標溶液各1mL，搖勻，即得。

2.5標準曲線試驗精密吸取對照品儲備液0.038、0.075、0.15、0.3、0.6mL，分別置于10mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻即得濃度為0.016、0.031、0.062、0.125、0.250mg/mL的乙酸龍腦酯溶液；分別精密量取不同濃度溶液和內標溶液各1mL，搖勻。分別進樣測定，每次1uL。以乙酸龍腦酯濃度對乙酸龍腦酯與內標峰面積之比進行線性回歸。結果表明乙酸龍腦酯濃度在0.016～0.250mg范圍內呈良好的線性關系，其線性回歸方程為Y=1.40847X-0.001131 （r=0.99999）。

2.6精密度和重復性試驗對同一供試品溶液連續測定6次，結果乙酸龍腦酯峰面積RSD=0.47%。對同一樣品從取樣開始重復測定6次，結果乙酸龍腦酯峰面積RSD=1.69%。

2.7穩定性試驗精密吸取同一供試品溶液，分別在放置0、2、4、8、12、14h后，依法測定乙酸龍腦酯的峰面積，結果表明同一供試品溶液中被測成分在14h內基本穩定，RSD值為1.82%。

2.8加樣回收率試驗精密稱取已知含量的樣品約50mg，置10mL量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取1mL 5份，精密加入對照品溶液1mL，搖勻。依法測定，測得平均加樣回收率為104.85%。

2.9樣品的測定精密稱取寬葉纈草藥材40g，置揮發油提取器中，加水500mL，提取4h。精密稱取精油50mg，置10mL量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液和內標溶液各1mL，搖勻，量取1uL進樣。依法測定不同采挖時間不同地區的湖北寬葉纈草樣品。結果見表1。

3討論

采用GC法對寬葉纈草揮發油中乙酸龍腦酯進行含量測定，為其質量控制提供了依據，也為寬葉纈草藥材的質量標準建立奠定了基礎。

供試品的制備考察了樣品與內標溶液濃度，確定5uL/mL的樣品溶液與1mg/mL的內標溶液等體積混合成供試品溶液。色譜條件考察了不同分流比、載氣流速與升溫程序，分別確定30∶1的分流比，1mL/min的載氣流速，及60℃、120℃、140 ℃、230℃（5min）的升溫程序進行測定。在此條件下分離效果好，乙酸龍腦酯峰及內標峰與相鄰峰完全分離。

測定結果表明產于湖北不同地區、不同采挖年限的寬葉纈草樣品中乙酸龍腦酯含量存在著差異，而是否與植被分布的生態環境、海拔高度、采挖年限因素有關，有待探討。

參考文獻

[1]

都曉偉，吳軍凱. 纈草屬植物化學成分及藥理活性研究進展[J]. 現代藥物與臨床，2006，21 （1）：10-14.

[2] 陳建華，申會建，聶長明. 湖南山區寬葉纈草的利用價值[J]. 湖南林業科技，1993，20（1）：36-37.

[3] 王立群，熊義濤，陶福華，等. 寬葉纈草揮發油成分分析[J]. 中藥材，1996，22（6）：289-299.

[4] 李曉光，葉富強，徐鴻華. 砂仁揮發油中乙酸龍腦酯的藥理作用研究[J]. 華西藥學雜志，2001，16（5）：78-79.

（編輯：陶希睿）