變?nèi)~木新病害白粉病病原菌生物學(xué)特性測(cè)定

摘要：本研究測(cè)定了不同條件對(duì)變?nèi)~木[Codiaeum variegatum BI var. pictum（Lodd.）Muen]白粉病分生孢子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明，分生孢子萌發(fā)的適宜溫度為21～24 ℃，最適溫度為24 ℃；最適相對(duì)濕度為80%；在pH為8時(shí)，萌發(fā)率最高；光照對(duì)分生孢子萌發(fā)無(wú)影響；葡萄糖、氯化銨有利于分生孢子的萌發(fā)；分生孢子的致死條件為43 ℃ 10 min。可見(jiàn)變?nèi)~木白粉病菌喜好溫暖、潮濕、偏堿、富含營(yíng)養(yǎng)的環(huán)境。

關(guān)鍵詞：變?nèi)~木[Codiaeum variegatum BI var. pictum（Lodd.）Muen]；白粉病；新番茄粉孢菌；生物學(xué)特性

中圖分類號(hào)：S436.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：0439-8114（2016）21-5548-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.21.027

Biological Characteristics of the Pathogen of Codiaeum variegatum Powdery Mildew

ZHOU Fang-xue，YANG Yong-li，WEI Yun-xie，ZHANG Kai-li，LIU Ya-nan，LIU Xiao-mei

（College of Environment and Plant Protection， Hainan University/Key Laboratory of Protection and Development Utilization of Tropical Crop Germplasm Resources of Ministry of Education Hainan University， Haikou 570228， China）

Abstract： The effects of different conditions on the conidial germination of Oidium neolycopersici were studied. The results showed that，the effective temperature for conidial germination was in the range of 21～24 ℃，and the optimum temperature was 24 ℃. The optimum relative humidity was 80%. The percentage of conidial germination reached the highest at pH 8.0. Light had no effect on conidial germination. Glucose and ammonium chloride were better for the conidial germination. Lethal temperature of conidia was 43 ℃ for 10 min. Obviously the warm，humid，weak alkali，and nutritious environment was favourite for pathogen.

Key words： Codiaeum variegatum； powdery mildew； Oidium neolycopersici； biological characteristics

變?nèi)~木[Codiaeum variegatum BI var. pictum（Lodd.）Muen]又稱灑金榕、灑金柳、變色木等，為大戟科（Euphorbiaceae）變?nèi)~木屬，常綠灌木或小喬木[1]。原產(chǎn)馬來(lái)西亞、印度及太平洋地區(qū)等地。目前，全國(guó)各地均有引種，具有極高的觀賞價(jià)值和藥用價(jià)值，不僅廣泛用于街道、公園、庭院的綠化，還可以用于肺氣上逆癥、癰腫瘡毒、毒蛇咬傷[2]。

已報(bào)道的變?nèi)~木的主要病害有變?nèi)~木炭疽病（Colletotrichum sorauerianum Hori）[3]、葉點(diǎn)霉尖枯病（Phyllosticta ghaesembillae Koorders）[4]等。2014年3月，在海口發(fā)現(xiàn)一種變?nèi)~木新病害——變?nèi)~木白粉病，主要為害嫩葉、嫩枝，發(fā)病初期，先在嫩葉表面、嫩枝上出現(xiàn)白色小粉斑，隨著病菌的繁殖，粉狀霉斑不斷擴(kuò)大并融合增厚，形成不規(guī)則形的大粉斑，逐漸覆蓋整片葉的表面，嚴(yán)重時(shí)，病葉扭曲畸形。后期病部葉面粉層呈灰白色，葉背呈紫色，并逐漸枯萎、脫落。本研究前期對(duì)該病病原菌進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和ITS序列鑒定及致病性測(cè)定，確定病原菌為新番茄擬粉孢菌（Pseudoidium neolycopersici=Oidium neolycopersici），所引起的變?nèi)~木白粉病，屬于國(guó)內(nèi)新寄主記錄病害[5]。本研究測(cè)定了其生物學(xué)特性，以便為后續(xù)調(diào)查該病害的發(fā)生規(guī)律和研究其防治措施提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試白粉病菌

采集典型的發(fā)病葉片，挑取白粉病菌。

1.2 生物學(xué)特性測(cè)定

1.2.1 溫度對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 參照番茄白粉病菌進(jìn)行類似試驗(yàn)[6]。將變?nèi)~木白粉病新鮮病葉上的分生孢子用毛刷刷下，放在經(jīng)酒精浸泡并晾干的洋蔥表皮上，再將洋蔥表皮漂浮在裝有少量無(wú)菌水的培養(yǎng)皿中，然后分別置于4、15、21、24、28和35 ℃的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每處理重復(fù)3次，每隔2 h檢查一次分生孢子萌發(fā)情況。當(dāng)芽管長(zhǎng)度大于孢子長(zhǎng)度的1/2時(shí)，視為萌發(fā)，記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算萌發(fā)率。用SAS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)方差分析。

1.2.2 濕度對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 參照文獻(xiàn)[7]方法，設(shè)置相對(duì)濕度為60%、80%、100%和液態(tài)水4個(gè)處理。其余同“1.2.1”。

1.2.3 pH對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 用 1 mol/L NaOH和HCl配制pH為3、4、5、6、7、8、9、10的溶液。其余同“1.2.1”。

1.2.4 光照對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 設(shè)置全光照、全黑暗、12 h光照/12 h黑暗和8 h光照/16 h黑暗4個(gè)處理。10 h后統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率。其余同“1.2.1”。

1.2.5 碳源和氮源對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 碳源為葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖4種，氮源為氯化銨、L-精氨酸、鉬氨酸3種，配制成2%的溶液。其余同“1.2.1”。

1.2.6 白粉病菌分生孢子致死溫度的測(cè)定 將載有變?nèi)~木白粉菌分生孢子的洋蔥表皮漂浮在小培養(yǎng)皿中，置于41、42、43、44和45 ℃水浴處理 10 min，取出后置于室溫10 min，再置于24 ℃溫箱中，10 h后根據(jù)萌發(fā)率來(lái)確定致死溫度。其余同“1.2.1”。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

從圖1可知，變?nèi)~木白粉病菌的分生孢子在4～35 ℃的條件下均能萌發(fā)，但在4 ℃和35 ℃下萌發(fā)率很低，10 h時(shí)萌發(fā)率僅為10%左右；在15～28 ℃范圍內(nèi)，2 h時(shí)萌發(fā)率約為25%～35%；隨著時(shí)間延長(zhǎng)萌發(fā)率迅速提高，10 h時(shí)萌發(fā)率達(dá)85%以上，其中21 ℃和24 ℃的萌發(fā)率分別達(dá)到93%和98%。可見(jiàn)變?nèi)~木白粉病菌的分生孢子萌發(fā)的適宜溫度為21～24 ℃，最適溫度為24 ℃。

2.2 濕度對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

從圖2可知，在相對(duì)濕度60%～80%以及液態(tài)水的條件下，變?nèi)~木白粉病菌分生孢子均能萌發(fā)。但在相對(duì)濕度為80%時(shí)萌發(fā)率最高，達(dá)90%以上。說(shuō)明變?nèi)~木白粉病菌分生孢子喜歡較潮濕的環(huán)境。

2.3 pH對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

從圖3可知，在pH為3～10之間，變?nèi)~木白粉病菌分生孢子均能萌發(fā)。2 h時(shí)萌發(fā)率約為10%；隨著時(shí)間延長(zhǎng)萌發(fā)率逐漸提高，10 h時(shí)萌發(fā)率達(dá)到80%以上，其中在pH值8的環(huán)境下萌發(fā)率最高，達(dá)93%。說(shuō)明變?nèi)~木白粉病菌分生孢子喜歡偏堿的環(huán)境。

2.4 光照條件對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

從圖4可知，分生孢子在4組不同光照條件處理下均能萌發(fā)，萌發(fā)率均達(dá)90%以上，說(shuō)明不同光照處理對(duì)變?nèi)~木白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響不大。

2.5 碳氮源對(duì)白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

從圖5可知，在供試的4種碳源中，對(duì)葡萄糖利用效果最佳，2 h時(shí)萌發(fā)率為24%，10 h時(shí)萌發(fā)率達(dá)到96%；其次是麥芽糖和果糖，對(duì)蔗糖的利用最差。說(shuō)明單糖更有利于變?nèi)~木白粉病菌的直接利用。

從圖6可知，在供試的3種氮源中，對(duì)氯化銨的利用效果最佳，2 h時(shí)萌發(fā)率為21%，10 h時(shí)萌發(fā)率達(dá)到94%；其次是L-精氨酸的，對(duì)鉬氨酸的利用最差。說(shuō)明無(wú)機(jī)態(tài)的銨態(tài)氮更有利于變?nèi)~木白粉病菌的直接利用。

2.6 白粉病菌分生孢子致死溫度的測(cè)定

從圖7可知，將變?nèi)~木白粉病菌分生孢子分別在40～42 ℃下處理10 min后均能萌發(fā)，但在43 ℃處理10 min后萌發(fā)率為0。可見(jiàn)變?nèi)~木白粉病菌分生孢子致死條件是43 ℃ 10 min。

3 小結(jié)與討論

變?nèi)~木白粉病菌生物學(xué)特性的測(cè)定結(jié)果表明：分生孢子的適宜萌發(fā)溫度為21～24 ℃，最適溫度為24 ℃；在pH為8時(shí)，萌發(fā)率最高；光照條件對(duì)分生孢子萌發(fā)無(wú)明顯影響；葡萄糖、氯化銨有利于分生孢子的萌發(fā)；分生孢子的致死條件為43 ℃ 10 min。可見(jiàn)變?nèi)~木白粉病菌喜歡溫暖、潮濕、偏堿和富含營(yíng)養(yǎng)的環(huán)境。

引起變?nèi)~木白粉病的病原菌新番茄擬粉孢菌（P.neolycopersici=O.neolycopersici）還侵染番茄，引起番茄白粉病[8]。劉淑艷等[6]測(cè)定了番茄白粉病的生物學(xué)特性：分生孢子在15～30 ℃范圍內(nèi)均能萌發(fā)，萌發(fā)的適宜溫度范圍為20～25 ℃，分生孢子萌發(fā)的最適相對(duì)濕度范圍為80%～100%，而在水滴中不能萌發(fā)。該菌對(duì)光照條件要求不高，對(duì)酸堿度要求也不高，在pH 3～12時(shí)均可萌發(fā)；在碳源利用方面，分生孢子對(duì)單糖（甘露糖）及雙糖（半乳糖）利用效果最好；在氮源利用方面，只有硝態(tài)氮（硝酸鉀）有利于分生孢子萌發(fā)；分生孢子萌發(fā)的致死條件為44 ℃ 10 min。

與番茄白粉病菌生物學(xué)特性相比：①變?nèi)~木白粉病菌萌發(fā)溫度更廣（4～35 ℃）；②變?nèi)~木白粉病菌更喜歡在偏堿性（pH 8）環(huán)境中萌發(fā)；③變?nèi)~木白粉病菌分生孢子更容易利用單糖（葡萄糖）、銨態(tài)氮（氯化銨）；④變?nèi)~木白粉病菌在水中也能萌發(fā)，致死溫度低于番茄白粉病菌，為43 ℃ 10 min。可能是與其寄主變?nèi)~木長(zhǎng)期生長(zhǎng)在南方潮濕、氣溫偏高環(huán)境有關(guān)。

根據(jù)變?nèi)~木白粉病菌生物學(xué)特性，可以推測(cè)每年11月至次年3～4月，海南相對(duì)潮濕、溫暖的氣候條件更有利于變?nèi)~木白粉病發(fā)生，在這個(gè)季節(jié)應(yīng)加強(qiáng)修剪，保持通風(fēng)透光以降低該病害的發(fā)生。

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