【摘要】水質分析中,微生物的檢測是其重要內容,水質分析中的微生物檢測水樣采集后送至檢測室,檢驗中所用的一切用品必須是完全滅菌的,在滅菌前應徹底洗滌干凈。本文簡述了水質檢測質量控制的必要性,對水質分析中實驗室的質量控制以及水質分析中微生物檢測的質量控制進行了論述分析。
【關鍵詞】水質檢測;質量控制;水質分析;微生物檢測;實驗室
1、水質檢測質量控制的必要性
水質檢測在防治水污染、制定水環境標準方面發揮重要作用。水質檢測質量保證是一種保證檢測數據準確可靠的手段,是整個監測過程的重要環節, 建立健全質量體系是實驗室內部進行質量管理的保障,并且質量控制和質量保證貫穿于水質檢測工作的全部過程。而水質分析中水中微生物的檢測是其重要內容,因此對水質微生物檢測質量控制的研究具有重要意義。
2、水質分析中實驗室的質量控制
2.1 實驗設備的質量控制。第一、天平的使用應嚴格遵守操作規程,定期進行檢定。第二、使用PH計,至少要配制兩種標準緩沖液(PH4.0,PH7.0或PH10)來校準PH計。第三、分析用水最好采用去離子水或蒸餾水,反對使用滲透水。第四、電熱滅菌箱應定期(三個月)采用孢子試條或孢子懸浮液來測試其性能,確保操作準確顯在160℃~180℃之間,己滅菌的器皿應有標志區分。第五、高壓滅菌應采用115℃維持20min,高壓滅菌器在滅菌前將壓力蒸汽滅菌化學指示卡放入高壓滅菌器內檢驗其滅菌效果,每次使用要記錄好溫度、氣壓和滅菌時間。第六、膜濾裝置在使用前應將部件組合起來,并檢查有無滲漏,必要時覆以硅酮,以增強過濾排放的效果。使用應徹底清洗。第七、紫外燈應每月定期擦試,每三個月一次使用紫外光度計測量紫外燈,以保持能使用紫外燈放出的紫外光在其最初放出的70%以上。第八、培養箱應每天兩次檢查其使用溫度,培養箱應置于室溫為16℃-27℃范圍的房間最佳。第九、所使用的玻璃器具要求完整無損,清洗后要進行檢查,如果洗后表面有過多水珠附著,必須重洗。
2.2 實驗室環境控制。第一、實驗室要求有良好的通風而且能夠避免灰塵、溫度變化,最終好能要用集中式空調,這樣一來即能減少雜菌污染,又能保證培養箱的穩定操作和減輕培養基、分析天平的受潮問題。第二、設計實驗室,在工作時,使往來通行和訪客的影響能減少到最小程序為原則,并要具專門的區域供配制培養基和無菌操作用。第三、用光滑的最后一道漆覆蓋墻壁,使之易于清洗和消毒,地面要求使指定的材料,做到放滲水、光滑、易于清潔;工作臺高寬適當、臺面要做到防止透水、抗腐蝕、光滑無逢。第四、保持高度標準的清潔空氣??刹捎肦ODAC平皿、細菌密度平皿或拭抹法來監測空氣和臺桌面。
2.3 制成的培養基的質量控制。每次配制好的培養基應記錄有配制人,配制日期,培養基名稱和配制批次、數量、滅菌溫度和所使用時間、PH值以及培養基中是否配有不穩定成分等。并進行無菌檢驗及陽性的陰性對照培養檢查。
3、水質分析中微生物檢測的質量控制
3.1 水質檢測微生物樣品采集的質量控制。(1)水質檢測微生物實驗室先備齊采集微生物樣品的無菌采樣玻璃瓶。許多水體隨時間和空間會發生很大變化,必須制定出合理的采樣規劃。為保證采集的水樣必須有代表性,采樣時固定取水點,同一時間;采水量應為瓶容量的80%,以便在檢驗時充分混勻;采樣時應直接采集,不得用水樣刷洗已滅菌的采樣瓶,并避免手指和其他物品對瓶口的玷污;采樣時不可攪動水底的沉積物;采集管網水的樣品前應對水龍頭進行消毒,方法為用火焰在龍頭表面燒灼片刻(3~5秒),而后放水5~10分鐘。農村生活用水部分水樣為蓄水池,需要備一個干凈的水桶,放入水池中數分鐘,盡量不取表面水,提水后將水灌入無菌瓶中,手注意不要接觸到無菌瓶口和瓶塞。(2)水樣的保存達到減緩微生物繁殖的作用。采用低溫冷藏箱來保存水樣,水樣全部采集后立即送回實驗室;在運輸中,玻璃容器要防止破裂,須有固定措施,防止樣品容器傾倒和樣品溢出。
3.2 水質微生物樣品檢測中的質量控制。(1)檢測菌落總數的質量控制。微生物檢驗操作每一步驟都關系結果的可靠性,均需嚴格執行無菌操作技術,防止人為污染、環境污染和樣品交叉污染。在接種前應將水樣充分搖勻,是水中的細菌均勻分布于水中,水樣稀釋時應小心沿管壁加入,不要觸及管內稀釋液,以防吸管尖外側部分粘附的檢液混入其中,將水樣注入皿內時,從皿側加入,不要揭去皿蓋,最后將吸管直立使水流空,并在皿底干燥處再擦一下吸管尖將余液排出,而不要吹出。為防止產生片狀菌落,水樣加入平皿后,在20分鐘內向皿內傾入營養瓊脂培養基,并立即混合均勻,皿內瓊脂凝固后,不要放置長久后才翻轉培養,而應于瓊脂凝固后,在數分鐘內將平皿翻轉進行培養,這樣可避免菌落蔓延生長。(2)檢測大腸菌群的質量控制。依據生活飲用水國家衛生標準(GB/T5750.12-2006)中推薦的固定底物技術酶底物法來檢測,將一個科立得試劑倒入裝有100ml水樣無菌取樣瓶中,蓋上蓋子,搖勻。將水樣全部倒入51孔或97孔定量盤中,使用專用的程控定量封口機封口,放在36±1℃培養24小時進行檢測,檢測結果對照51孔定量盤法不同陽性結果的MPN值及95%可信范圍??梢酝瑫r定量檢測出大腸菌群和大腸埃希氏菌。這個方法不僅減少了工作量,也避免了使用多管法的逐級稀釋帶來的操作誤差;而且使用濾膜法時肉眼讀數的人為誤差,因此其假陽性率和假陰性率都比傳統方法低。由于24小時內就得到結果,可以很好的用于突發事件應急。
4、結束語
水質分析中微生物在實驗室檢測過程中存在諸多影響質量的因素。因此在水質分析中的微生物檢測過程中實施質量控制必須貫徹檢測的全過程,這樣才能確保檢測結果的時空代表性及實驗室分析測試的精密性和準確性,從而有效保證檢測全過程的質量控制。
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