生肌玉紅膏對深Ⅱ度燒傷模型大鼠創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平影響的實(shí)驗(yàn)研究

董小鵬 于 博

生肌玉紅膏對深Ⅱ度燒傷模型大鼠創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平影響的實(shí)驗(yàn)研究

董小鵬1于 博2

目的 探討生肌玉紅膏對深Ⅱ度燒傷模型大鼠創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平的影響。方法 96只大鼠被隨機(jī)分為3組（A組、B組、C組），每組32只，A、B組均制成深I(lǐng)I度燒傷動物模型，A組傷后給予生肌玉紅膏換藥，B組給予凡士林換藥，C組為正常對照組，比較3組大鼠燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)（3 d、7 d、14 d、21 d）創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平的變化。結(jié)果 與C組比較，A、B組大鼠燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平升高（P＜0．05）；建模后3 d，A，B兩組創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）；在建模后7，14，21 d，A組燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平與B組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。結(jié)論 深Ⅱ度燒傷后創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平升高，不利于創(chuàng)面愈合，生肌玉紅膏對燒傷模型大鼠創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平具有明顯抑制作用，從而有助于促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

生肌玉紅膏；深Ⅱ度燒傷；大鼠；氧化應(yīng)激

氧化應(yīng)激（Oxidative Stress，OS）是指機(jī)體內(nèi)氧化和抗氧化作用間的平衡被打破，傾向于氧化而導(dǎo)致自由基增多、抗氧化力降低的一種狀態(tài)。氧化應(yīng)激可引起機(jī)體處于易損傷狀態(tài)，還能使致病因子的作用加強(qiáng)，被認(rèn)為是導(dǎo)致疾病進(jìn)展的一個(gè)重要因素。生肌玉紅膏為中醫(yī)外科收斂藥，本文主要探討了生肌玉紅膏對深Ⅱ度燒傷模型大鼠創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平的影響，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 藥物與試劑 生肌玉紅膏：由甘肅中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院藥劑科提供。白凡士林膏：南昌白云藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。生理鹽水，為自行配制。二甲酚橙、山梨醇、硫酸、Fe2+：上海國藥集團(tuán)生產(chǎn)。各指標(biāo)測定試劑盒：上海信裕生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。40 ml/kg復(fù)方乳酸鈉林格氏液，為自行配制。戊巴比妥鈉，為美國Sigma公司生產(chǎn)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物 選取健康清潔級成年SD大鼠96只，雌雄各

表1 三組大鼠建模后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平指標(biāo)對比 （ x- ±s）

1.1.3 器材 千分之一電子天平、生化培養(yǎng)箱、紫外分光光度計(jì)、熒光分光光度計(jì)、流式細(xì)胞儀、酒精燈、玻璃瓶、秒表、石棉網(wǎng)、鐵架臺等，均由天津市生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 動物模型建立與換藥 96只實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為A、B、C三組，各32只。A、B組大鼠均制成深I(lǐng)I度燒傷動物模型，制作方法參照相關(guān)文獻(xiàn)［1］進(jìn)行。A組傷處涂生肌玉紅膏，B組涂白凡士林膏，換藥1次/d，連續(xù)28 d。每組分別于燒傷后3 d、7 d、14 d、21 d時(shí)取8只獲取全層創(chuàng)面皮膚組織標(biāo)本，并收集血漿，部分皮膚組織以10%福爾馬林固定后進(jìn)行石蠟包埋保存，剩余新鮮皮膚組織于-80℃冰箱保存。

1.2.2 H2O2、ROS、MDA、GSH、CAT測定 均嚴(yán)格按照測定試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與C組比較，A、B組大鼠燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平升高（P＜0.05）；建模后3 d，A，B兩組創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；在建模后7，14，21 d，A組燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平與B組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

3 討論

氧化應(yīng)激是指機(jī)體在各種有害刺激下，自由基的產(chǎn)生和抗氧化狀態(tài)之間的不平衡狀態(tài)［2］。在氧化應(yīng)激條件下，碳水化合物、脂類和蛋白質(zhì)都成為活性氧族攻擊的目標(biāo)［3］，蛋白質(zhì)可以由糖和脂肪氧化產(chǎn)生的活性羰基化合物修飾，最終形成糖基化終末產(chǎn)物或羰基氧化產(chǎn)物等［4］。多不飽和脂肪酸（如：花生四烯酸）脂質(zhì)過氧化物受活性氧族的攻擊可以形成如MDA等等［5-6］，從而進(jìn)一步成為脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛-賴氨酸等，后者使膜成分之間形成交聯(lián)和聚合，所以導(dǎo)致一系列變構(gòu)、離子遷移、酶活性改變等變化［7］，從而引起細(xì)胞損傷，延遲燒傷的愈合［8］。

本研究選取3組大鼠為研究對象，觀察分析了燒傷創(chuàng)面氧化應(yīng)激的五個(gè)相關(guān)指標(biāo)，其中氧化指標(biāo)3個(gè)（H2O2、ROS、MDA），抗氧化指標(biāo)2個(gè)（GSH、CAT）。結(jié)果表明，與C組比較，A、B組大鼠燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化指標(biāo)水平升高、抗氧化指標(biāo)降低（P＜0.05）；且應(yīng)用了生肌玉紅膏的A組在燒傷后不同時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面氧化指標(biāo)低于B組、抗氧化指標(biāo)高于B組（P＜0.05）。從上述結(jié)果可得出，深Ⅱ度燒傷后創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平明顯升高，不利于創(chuàng)面愈合，生肌玉紅膏對燒傷模型大鼠創(chuàng)面氧化應(yīng)激水平具有抑制作用，從而有助于促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

［1］ 趙春霖，王麗娟，董小鵬，等． 生肌玉紅膏對大鼠深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合過程中羥脯氨酸水平和膠原比例的影響［J］． 中成藥，2013，35（11）：2329-2332．

［2］ 褚啟龍，楊克敵，王愛國． 氧化應(yīng)激與細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展［J］． 衛(wèi)生研究，2003，32（3）：276-279．

［3］ 王秋林，王浩毅，王樹人． 氧化應(yīng)激狀態(tài)的評價(jià)［J］． 中國病理生理雜志，2005，21（10）：2069-2074．

［4］ 楊靜，陳賽貞，王婷． 氧化應(yīng)激致PC12細(xì)胞凋亡的信號傳導(dǎo)途徑的研究進(jìn)展［J］． 中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2011，25（1）：102-105．

［5］ 張斌，夏作理，趙曉民，等． 氧化應(yīng)激模型的建立及其評價(jià)［J］．中國組織工程研究，2006，10（44）：112-114．

［6］ 劉志民，孫亮亮． 氧化應(yīng)激在糖尿病發(fā)病機(jī)制中作用的認(rèn)識［J］．內(nèi)科理論與實(shí)踐，2007，2（3）：153-156．

［7］ 楊麗娟，游育紅． 細(xì)胞受到氧化應(yīng)激后損傷的檢測方法［J］． 醫(yī)學(xué)綜述，2010，16（6）：924-927．

［8］ 葛奎，牛軼雯，謝挺，等． 氧化應(yīng)激對糖尿病大鼠燙傷創(chuàng)面愈合的影響［J］． 同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2008，29（5）：31-34．

Influence of Ointment of Sheng-ji Yu-hong to Oxidation Level of Oxidative Stress of Deep II-degree Burn Rats’ Model

DONG Xiaopeng1YU Bo21 Clinical Medicine College，Gansu University of Traditional Chinese Medicine，Lanzhou Gansu 730000，China，2 Department of General Surgery，Affiliated Hospital of Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou Gansu 730000，China

Objective To explore the influence of Ointment of Sheng-ji Yu-hong to the level of oxidative stress of Deep II-degree Burn Rats’Model． Methods 96 rats were randomly divided into three groups （A group，B group，C group） for 32 rats． A group and B group was taken with deep II-degree burn rats’ model． A group was taken ointment of Sheng-ji Yu-hong，B group for vaseline． C group was control group． The level of oxidative stress in 3 d，7 d，14 d and 21 d were compared． Results Compared with C group，the level of oxidative stress in 3 d，7 d，14 d and 21 d in A group and B group was significantly increased（P＜ 0．05）． The level of oxidative stress had no significant difference between A and B groups（P＞ 0．05）at 3 d after modeling，the level of oxidative stress had a significant difference（P＜0．05）between A and B groups at 7，14，21 d after modeling． Conclusion It was bad for wound healing that the level of oxidative stress was significantly increased． Ointment of Sheng-ji Yu-hong could obviously inhibit the level of oxidative stress of Deep II-degree Burn Rats’ Model for promoted wound healing．

Ointment of Sheng-ji Yu-hong，Deep II-degree burn，Rats，Oxidative stress

R285．5

A

1674-9316（2016）22-0124-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2016．22．074

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81260543）48只，體質(zhì)量為（225.6±17.0）g，混合飼料單籠飼養(yǎng)。

1 甘肅中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；

2 甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院普外科，甘肅 蘭州 730000