曲張鏈菌素產(chǎn)生菌壯觀鏈霉菌NRRL2494菌株遺傳操作體系的建立

宋姣姣，康前進(jìn)，張連茹，吳瑩瑩，3*，白林泉

( 1．廈門(mén)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，天然產(chǎn)物源靶向藥物國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室，福建廈門(mén)361102; 2．上海交通大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，微生物代謝國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海200240; 3．中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所，合成生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海200032)

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曲張鏈菌素產(chǎn)生菌壯觀鏈霉菌NRRL2494菌株遺傳操作體系的建立

宋姣姣1，康前進(jìn)2，張連茹1，吳瑩瑩1，3*，白林泉2

( 1．廈門(mén)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，天然產(chǎn)物源靶向藥物國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室，福建廈門(mén)361102; 2．上海交通大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，微生物代謝國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海200240; 3．中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所，合成生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海200032)

摘要:曲張鏈菌素屬于安莎類(lèi)抗生素，具有顯著的生物活性．在從壯觀鏈霉菌NRRL2494菌株的發(fā)酵產(chǎn)物中分離和鑒定了多組分曲張鏈菌素的基礎(chǔ)上，探索和優(yōu)化了外源DNA通過(guò)接合轉(zhuǎn)移進(jìn)入壯觀鏈霉菌NRRL2494菌株的操作方法和培養(yǎng)條件．以游離型質(zhì)粒pJTU1278為載體，在體外構(gòu)建了一個(gè)曲張鏈菌素酰胺合酶基因svaF敲除的質(zhì)粒，通過(guò)接合轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)入到壯觀鏈霉菌NRRL2494野生型菌株中，所獲得的svaF基因缺失突變株失去了產(chǎn)生曲張鏈菌素的能力．該遺傳操作體系的成功建立和優(yōu)化，使得在體內(nèi)分析和鑒定曲張鏈菌素生物合成基因的功能成為可能，同時(shí)也為建立其他類(lèi)似放線(xiàn)菌的遺傳操作體系提供了參考．

關(guān)鍵詞:壯觀鏈霉菌;遺傳操作體系;曲張鏈……