高脂膳食聯合鏈脲佐菌建立2型糖尿病大鼠模型研究

陳紅濤，覃小菊，呂　冬，張楚楚，董彩梅

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高脂膳食聯合鏈脲佐菌建立2型糖尿病大鼠模型研究

陳紅濤，覃小菊，呂冬，張楚楚，董彩梅

摘要：[目的]探索建立一種穩定簡單的2型糖尿病大鼠模型。[方法]將40只無特定病原體級雄性大鼠采用隨機數字表法隨機分為造模組(30只)和對照組(10只)，造模組高脂飼料喂養后腹腔注射鏈脲佐菌(STZ)，對照組注射等體積緩沖液，監測兩組空腹血糖、體重、飲水量、尿量等。[結果]造模組血糖和飲水量明顯高于對照組(P<0.01)，成功造模25只，造模成功率83.33%。[結論]高脂膳食聯合STZ腹腔注射誘導建立大鼠2型糖尿病模型操作簡單、成功率較高，是一種較理想的造模方法。

關鍵詞：2型糖尿病；動物模型；高脂膳食；鏈脲佐菌；大鼠；血糖

Study on establishment of type 2 diabetic rat model using high fat diet combined with streptozotocin

Chen Hongtao，Qin Xiaoju,Lü Dong，et al

[Shaoyang Medical College (Department of Nursing),Hunan 422000 China]

AbstractObjective:To probe into a stable and simple model of type 2 diabetic rats.Methods:A total of 40 male rats without specific pathogen level were randomly divided into modeling group(30 rats) and control group (10 rats)by using a random number table method,the rats in modeling group were intraperitoneal injected with streptozotocin (STZ) after high-fat diet,while the rats in control group were injected with equal volume of buffer，monitoring the two groups of fasting blood glucose，weight，water intake，urine volume.Results:The blood glucose and water intake of the model group were significantly higher than that in control group(P<0.01)，the number of success establishment of model was 25，and its success rate was 83.33%.Conclusion:High fat diet combined with intraperitoneal injection of STZ to establish the model of type 2 diabetes rats was simple and had higher success rate,which was an ideal method of making model.

Key wordstype 2 diabetes；animal model；high fat diet； streptozotocin；rats；blood glucose

動物實驗是生命科學的重要研究方法，其作為臨床實驗的過渡，從組織病理生理學的高度為臨床護理技術的革新及安全應用提供了理論參考依據[1]。適當可行的動物實驗非常必要，可有效指導護理理論與臨床實踐[2]。國際糖尿病聯盟(IDF)統計顯示，截止2014年全球共有3.87億例糖尿病病人，其中2 型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)占85%～95%[3]。我國2010年調查數據顯示，20歲以上人群中糖尿病總體患病率達到了9.7%，病人總數已超過9 200萬例以上[4]。建立合適的動物模型是研究糖尿病發病機制和臨床防治的基礎。為了開展糖尿病足潰瘍創面護理的動物實驗研究，本研究采用高脂喂養后腹腔注射鏈脲佐菌(STZ)的方法建立了穩定的2型糖尿病大鼠模型。現報道如下。

1材料與方法

1.1實驗動物及材料無特定病原體級雄性大鼠40只，由我校動物實訓中心提供，體質量(200±15)g。高脂飼料(配方：蛋黃2.5%，蔗糖20.0%，豬油10.0%，基礎飼料67.5%)喂養，自由攝食、進水，室溫18 ℃～22 ℃。

1.2制備糖尿病大鼠模型將40只大鼠編號，采用隨機數字表法隨機分為造模組(30只)和對照組(10只)。造模組高脂飼料喂養2個月，禁食16 h后，腹腔注射鏈脲佐菌(STZ)(0.1 M加pH 4.2的枸櫞酸鈉-枸櫞酸緩沖液配制成10 mg/mL溶液)35 mg/kg[5]；對照組普通飼料喂養2個月，腹腔注射等體積的枸緣酸鈉-枸櫞酸緩沖液。1周后，造模組大鼠有多飲、多尿、體質量減輕，空腹血糖≥16.7 mmol/L的大鼠入選為模型[6]。

1.3評價指標2組均于腹腔注射后第3天、第7天、第14天、第21天、第28天分別記錄大鼠體重、平均飲水量，觀察墊料濕度粗測記錄尿量，并取尾靜脈空腹血進行血糖測定。

2結果

2.1一般狀況觀察發現，造模組大鼠逐漸出現活動減少、反應遲鈍、皮毛發黃，第3天出現多飲、多食、多尿等癥狀；對照組大鼠體態活潑，皮毛干凈、有光澤，生長正常。

2.22型糖尿病大鼠模型的制作結果根據入選標準，成功造模25只糖尿病大鼠，造模成功率83.33%。兩組大鼠血糖、體重、飲水量變化見表1、表2。

表1　兩組大鼠腹腔注射后不同時間血糖水平比較±s)　mmol/L

表2　兩組大鼠腹腔注射前后體重、飲水量比較±s)

3討論

糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病，主要由胰島素抵抗和胰島素分泌受損引起的糖、 脂肪和蛋白質代謝紊亂。2型糖尿病的特征初期為胰島素作用抵抗，胰島β細胞漸進性功能障礙，進而發展為胰島素分泌缺陷為主，伴或不伴胰島素作用抵抗[7]。有研究指出，膳食引起的肥胖是當前糖尿病流行的主要決定因素之一[8]。而STZ是亞硝基脲類似物，可通過葡萄糖轉運蛋白2進入胰島β細胞，干擾葡萄糖的轉運，從而誘導DNA的烷基化，導致胰島β細胞壞死[9]。因此，本研究選用高脂膳食聯合STZ腹腔注射誘導建立大鼠2型糖尿病模型，可以模擬胰島素作用抵抗，出現血糖升高、體重減輕等臨床癥狀，同時成本較低，是一種較理想的造模方法。

隨著護理專科的發展，動物實驗已為各護理專科科研的發展發揮了積極的作用。近10余年來動物實驗護理研究論文數量呈現逐年增加的趨勢，且部分研究成果已在臨床取得了較好的應用效果[1]。但護理科研中，實驗動物的選擇與應用目前仍處于初始階段，還應積極進行創造性思維，逐步探索結合護理專業特點的合適可行的動物實驗。本研究屬于糖尿病足潰瘍創面護理動物實驗研究的前期研究，為糖尿病足潰瘍大鼠模型的制備奠定了研究基礎，也是動物實驗在護理研究中的一次有益嘗試。但2型糖尿病病因復雜，涉及遺傳因素與環境因素及其相互作用， 目前尚無一種公認的理想造模方法。不過隨著科學技術及科研水平的不斷發展，2型糖尿病動物模型的制作必將取得更深層次的突破。

參考文獻：

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(本文編輯李亞琴)

(收稿日期：2015-08-07；修回日期：2016-02-20)

中圖分類號：R471

文獻標識碼：A

doi:10.3969/j.issn.1009-6493.2016.07.007

文章編號：1009-6493(2016)03A-0791-02

作者簡介陳紅濤，講師，碩士研究生在讀,單位：422000，邵陽醫學高等專科學校(護理系)(學習單位：湖南師范大學醫學院);覃小菊、呂冬、張楚楚單位：422000，邵陽醫學高等專科學校(護理系)；董彩梅(通訊作者)單位：412200，湖南師范大學附屬湘東醫院。

基金項目湖南省教育廳科學研究項目，編號：13C866；2013年湖南省大學生研究性學習和創新性實驗計劃項目，編號：2013-576。