動(dòng)物防疫樣品采集與運(yùn)送注意事項(xiàng)

趙笙鈞湯仕恩

(1.圣水鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西圣水 723100；2.黎坪鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西黎坪 723100)

動(dòng)物防疫樣品采集與運(yùn)送注意事項(xiàng)

趙笙鈞1湯仕恩2

(1.圣水鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西圣水 723100；2.黎坪鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西黎坪 723100)

本文通過在實(shí)踐中對(duì)采樣的原則和運(yùn)送樣品做一闡述，以利今后在重大動(dòng)物疫病防控工作中發(fā)揮采樣、監(jiān)測(cè)、預(yù)警方面的作用，為重大動(dòng)物疫病防控工作奠定基礎(chǔ)。

采樣原則；運(yùn)送要求

近年來，隨著重大動(dòng)物疫病防控工作措施逐步加強(qiáng)，防控的手段越來越多，動(dòng)物病原學(xué)監(jiān)測(cè)和免疫抗體監(jiān)測(cè)成為常態(tài)，采樣和運(yùn)送樣品過程中如果措施不到位，不僅影響結(jié)果判定，而且可能造成前功盡棄，不利于及早揭示動(dòng)物疫病發(fā)生和免疫效果評(píng)價(jià)。下面就動(dòng)物防疫采樣及樣品運(yùn)送應(yīng)注意的事項(xiàng)做一簡(jiǎn)單介紹。

1 動(dòng)物防疫采樣

1.1 采樣原則

采集檢驗(yàn)樣品是診斷檢測(cè)工作的重要內(nèi)容。采樣的時(shí)機(jī)是否適宜，樣品是否具有代表性，樣品處理、保存、運(yùn)送是否合適及時(shí)，與檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性關(guān)系極大。采集檢驗(yàn)樣品時(shí)，需要符合以下規(guī)定。

1.1.1 適時(shí)采樣

根據(jù)檢測(cè)要求及檢測(cè)對(duì)象和檢測(cè)項(xiàng)目的不同，選擇適當(dāng)?shù)牟蓸訒r(shí)機(jī)十分重要。樣品是有時(shí)間要求的，應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定時(shí)間采樣；有臨床癥狀需要作病原分離的，樣品必須在病初的發(fā)熱期或癥狀典型時(shí)采樣，病死的動(dòng)物，應(yīng)立即采樣。

1.1.2 合理采樣

根據(jù)診斷檢測(cè)要求，須嚴(yán)格按照規(guī)定采集各種足夠數(shù)量的樣品外，不同疫病的需檢樣品各異，應(yīng)按可能的疫病側(cè)重采樣。對(duì)未能確定為何種疫病的，應(yīng)全面采樣。

1.1.3 典型采樣

選取未經(jīng)藥物治療、癥狀最典型或病變最明顯的樣品，如有并發(fā)癥，還應(yīng)兼顧采樣。

1.1.4 無菌采樣

采集檢驗(yàn)樣品初供病理組織學(xué)檢驗(yàn)外，供病原學(xué)及血清學(xué)檢驗(yàn)的樣品，必須無菌操作采樣，采樣用具、容器均須滅菌處理，尸體剖檢需采集樣品的，先采樣后檢查，以免人為污染樣品。

1.1.5 適量采樣

采集樣品的數(shù)量要滿足診斷檢測(cè)的需要，并留有余地，以備必要的復(fù)檢使用。

1.2 采血方法及采血量

從翅靜脈（禽）采血2～3ml，或耳靜脈（前腔靜脈、頸靜脈）（豬、牛、羊）采血5l，置室溫放置約10in（以血液完全凝固為準(zhǔn)），再置冰箱冷藏（4℃）30min，此時(shí)，能清楚看到血清與血凝塊分離，然后分離血清，保存于1.5～2ml離心管中，冷凍保存待檢。

1.2.1 編號(hào)要求

所有送檢樣品統(tǒng)一用阿拉伯?dāng)?shù)字1、2、3、-------編號(hào)（養(yǎng)殖場(chǎng)請(qǐng)保存好原禽號(hào)與送檢編號(hào)對(duì)照表），用油性記號(hào)筆寫在離心管上（或?qū)⒕幪?hào)寫在膠布上，貼在管壁）。書寫要工整清晰。

1.2.2 填寫采樣單

所有送檢樣品要求附帶采樣場(chǎng)場(chǎng)名、免疫情況（免疫程序、免疫疫苗種類、生產(chǎn)廠、免疫劑量等）、采樣對(duì)象等詳細(xì)說明材料。

1.3 組織樣品

如果養(yǎng)殖場(chǎng)出現(xiàn)疫病，在采集血清樣品的同時(shí)，建議應(yīng)同時(shí)采集發(fā)病動(dòng)物的組織樣品，填寫采樣單后，一并送檢。

1.3.1 采樣組織

應(yīng)只要采集實(shí)質(zhì)臟器組織，包括肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、腦（禽）、喉頭、心臟、淋巴結(jié)等。每種樣品不得少于組織器官的1/3。

1.3.2 采樣部位

應(yīng)采集病變與正常組織交界處的組織，以便于診斷觀察。

1.3.3 采樣大小

采集的組織樣品不宜過大，一般采集3×3cm大小的組織用于病原分離與鑒定，同時(shí)在采集一份1.5×1.5cm大小的同一組織置于10%福爾馬林溶液中（1份福爾馬林溶液加9份蒸餾水）用作病理學(xué)診斷。同一動(dòng)物的組織應(yīng)保存于一個(gè)容器中。

2 樣品的處理及運(yùn)送

2.1 樣品處理

采集的樣品應(yīng)一種樣品一個(gè)容器，立即密封，根據(jù)樣品的形狀及檢驗(yàn)要求不同，做暫時(shí)的冷藏、冷凍或其他處理。供病毒學(xué)檢驗(yàn)的樣品，數(shù)小時(shí)內(nèi)可送到實(shí)驗(yàn)室，只作冷藏處理。超過數(shù)小時(shí)的應(yīng)凍結(jié)處理。（凍結(jié)方法：可將樣品放入-30度冰箱內(nèi)凍結(jié)，然后再裝入小冰塊或干冰冷藏瓶（箱）內(nèi)運(yùn)送，亦可將裝入樣品的容器放入隔熱保溫瓶?jī)?nèi)，再放入冰塊，然后按100g冰塊加入食鹽約35g，立即將隔熱瓶瓶口塞緊。瓶?jī)?nèi)溫度可達(dá)-21℃左右）。供細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)或血清學(xué)檢驗(yàn)的樣品，冷藏送實(shí)驗(yàn)室即可。裝樣品的容器應(yīng)貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽要防止因凍結(jié)而脫落，標(biāo)簽標(biāo)明采集時(shí)間、地點(diǎn)、號(hào)碼和樣品名稱并附上發(fā)病、死亡等相關(guān)資料，盡快送實(shí)驗(yàn)室。

2.2 樣品包裝

裝載樣品的容器可選擇玻璃的或塑料的，可以是瓶式、試管式或袋式。容器必須完整無損，密封不漏出液體。裝供病原學(xué)檢驗(yàn)樣品的容器，用前徹底清潔干凈，必要時(shí)經(jīng)清潔液浸泡，沖洗干凈后以干熱和高壓滅菌并烘干。如選用塑料容器，能耐高壓的經(jīng)高壓滅菌，不能耐高壓的經(jīng)環(huán)氧乙烷熏蒸消毒或紫外線距離20cm直射2h后使用。根據(jù)檢驗(yàn)樣品形狀及檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同的容器，一個(gè)容器裝量不可過多，尤其液態(tài)樣品不可超過容量的80%，以防凍結(jié)時(shí)容器破裂。裝入樣品后必須加蓋，然后用膠布或封箱膠帶固封。如是液態(tài)樣品，在膠布或封箱膠帶外還需用熔化的石蠟加封，以防液體外泄。如果選用塑料袋，則應(yīng)用兩層袋，分別用線結(jié)扎袋口，防止液體漏出或入水污染樣品。

2.3 樣品運(yùn)輸

每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的樣品必須單獨(dú)密封于兩層自封口塑料袋中，粘貼單位名稱標(biāo)簽，外包一層脫脂棉后，連同采樣單一并放入稍大一些的自封口塑料袋，置于冰盒或裝有冰袋的泡沫箱。如不能及

時(shí)送檢，應(yīng)將血清凍存于冰箱中。用作病原分離鑒定的樣品應(yīng)密封于密閉容器中，冷藏保存立即送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)。用作病理學(xué)診斷的樣品可在48h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。樣品經(jīng)包裝密封后，必須盡快送往實(shí)驗(yàn)室，延誤送檢時(shí)間，常會(huì)嚴(yán)重影響診斷結(jié)果。因此，在送樣品過程中，要根據(jù)樣品的保存要求和檢驗(yàn)?zāi)康模咨瓢才胚\(yùn)送計(jì)劃。供細(xì)菌檢驗(yàn)、寄生蟲檢驗(yàn)及血清學(xué)檢驗(yàn)的冷藏樣品，必須在24h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室；供病毒檢驗(yàn)的冷藏處理樣品，須在數(shù)小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，經(jīng)凍結(jié)的樣品需在24h內(nèi)送到，24h內(nèi)不能送到實(shí)驗(yàn)室的，需要在運(yùn)送過程中保持樣品溫度處于-20℃以下。送檢樣品過程中，為防止樣品容器破損，樣品裝入冷藏瓶（箱）后應(yīng)妥善包裝，防止碰撞，保持盡可能的平穩(wěn)運(yùn)輸。

[1] 邢清潔.基層動(dòng)物防疫工作中血樣采集注意事項(xiàng)[J].中國獸醫(yī)雜志，2012，48（3）：86-87.

趙笙鈞（1972—），男，大專學(xué)歷，助理獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物防疫、檢疫工作。