羅合春(重慶工貿職業技術學院生物化學工程系,重慶 408000)
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綠茶中茶多酚提取工藝的優化分析
羅合春
(重慶工貿職業技術學院生物化學工程系,重慶 408000)
摘要:在各類茶葉中,均包含有一種多酚物質。這是一種具有天然抗毒、基本不存在毒副作用的物質,不僅是茶葉的主要成分,還可以再細分出許多物質,特別是在綠茶中,含量最高。為促進茶多酚物質的有效提取,同時也為了確保人類的健康,業界已經形成了許多種提取茶多酚的工藝方法。本文將通過各類提取工藝的異同,來分析常用提取工藝的優劣。
關鍵詞:綠茶;茶多酚;提取工藝;檢測分析
目前,隨著經濟的發展,茶文化的傳播,越來越多的研究專家對茶葉的成分進行了進一步的探究、鉆研和分析。綠茶中提取的茶多酚,不僅可以通過提高酶的代謝度來達到清除脂肪的目的,還是一種公認的純天然抗氧化劑,可以廣泛的應用于食品、醫藥、保健、護膚、日用、工藝生產當中,給茶文化產業帶來的經濟效益和經濟價值是相當可觀的。
1.1綠茶的有效成分
綠茶除了可以飲用外,還可以將綠茶中的茶籽、茶梗等副產物加工、提取、運用到其它茶制品當中,進而增加茶業的經濟效益。綠茶中的茶多酚是溶解于水中的一種化合物,是無害的、天然的、食用的抗氧化劑,綠茶中茶多酚的含量為15%,增加了綠茶的鮮美度、色澤度,口感度。醫學統計,綠茶中茶多酚具有抗菌、抗癌、健康、降脂降血壓、降膽固醇、減肥、美容等功效,綠茶中的茶多酚也廣泛運用于日化、醫藥、保健、食品等的產業當中。
1.2綠茶加工的重要性
綠茶最早起源于唐,歷史悠久,很早就被人們廣泛利用。一直以來,我們只會選用鮮嫩茶葉來加工沏茶飲用,而廢棄了茶樹上的茶梗、修剪的枝葉、大片茶葉、茶籽等,給環境造成了極大的污染,造成資源的極大浪費。如果合理利用廢棄的副產物,既可為茶園施肥,還可進行加工提取出很多活性物質,變廢為寶,使綠茶資源得到充分的利用。
1.3綠茶加工的研究現狀
很多年以來,我們合理利用綠茶中的茶多酚,運用于醫學、保健、日用、食品當中,甚至很多人用綠茶的茶梗作為家中凈化空氣的產物,有的用于枕頭的枕芯,有些專家利用茶多酚研究生產出針對各類人群的食療產品,比如:針對糖尿病患者、冠心病患者所引起的心腦血管、高糖高脂、心率過快等問題進行了研究,利用茶多酚的提取生產出一批食療飲品,為保健類行業奠定了堅實的基礎,給市場經濟帶來了前所未有的效益。
2.1茶多酚的浸提工藝
綠茶中茶多酚是溶解于水的一種天然有機化合物,是有多種酚類化合物組成的,性質極其穩定,不溶于氯,遇到堿性化合物,會變成灰褐色氧化。研究表明,綠茶中浸提茶多酚可分為:沉淀法、吸附法、溶劑法、超聲波微波提取。
2.2茶多酚的分析和檢測
經過業界多年來的研究證實,針對從綠茶中提取后的茶多酚,有多種檢測方法,通常使用的辦法主要有:溶劑提取、離子沉淀、分離制備等。檢測固定的綠茶中的茶多酚,酚中含有多類酚化合物,在一定環境下,與金屬產生化學反應,使其變了顏色,在堿性條件下檢測綠茶中的茶多酚的重復性,可以檢測出綠茶中茶多酚的含量,一般不超過15%,茶多酚具有極強的還原性,遇到金屬和有機試劑會發生色澤的變化,茶多酚的不飽和,在310-320和210-240(紫外光波)之間的區域都有著很好的吸收度。因而紫外光光波在200-300之間時,所檢測出的茶多酚含量是最標準的。紅外光譜法,主要是檢測綠茶中茶多酚的含量,并做定量分析,是利用茶多酚中的分子結構C-O,C-H,O-H基團的振動和吸收進行分析和檢測。首先,利用紅光光譜,針對已經確定的綠茶樣品進行掃描,可以得到在紅光光譜下綠茶樣品的掃描圖,然后可以據此來分析確定茶多酚含量的數值。另外還有一些辦法,主要是檢測和分析茶葉中氧化氫和茶多酚的化學反應。
2.3綠茶中茶多酚的應用
綠茶中的茶多酚具有很好的功能性、心理活性,研究專家對其進行了研究和應用,取得了很多意想不到的成果,實現了綠茶中茶多酚在各個區域、乃至海內外的廣泛使用。多用于醫藥保健業、日化業、美容業、食品業等的行業。綠茶中的茶多酚是一種天然無害的食用的抗氧化劑。研究證明,茶多酚具有抗癌、抗菌、保健、降壓、降血糖、降脂、減肥、美容等的生理作用,因此可將綠茶中檢測和提取的茶多酚應用于降血壓降血糖劑、抗癌抗菌藥物、美容產品、心腦血管保健劑等的醫藥保健領域。此外,根據醫藥學界的調查和研究,綠茶中的茶多酚可以延緩老年癡呆,同時降低各種精神病發生的風險。此外,綠茶中的茶多酚還可以作為食品中的添加劑使用,國家在這方面也是有相關法律法規的。在水產、食品中廣為使用,茶多酚在抑制氫化氧的過程中,終端人體內的脂肪,抑制了油脂酸敗,所以常常被添加到食品(如巧克力、奶油、蛋糕、食用油脂等)當中,可起到保鮮的作用,同時還可提高質量。茶多酚在日化、水產中的應用也是如此。
3.1實驗材料及設備
主要材料和試劑包括綠茶、葡萄糖、纖維素酶、無水亞硫酸納、硫酸銨粉末、苯酚、纖維素鈉等各類化工材料。
設備:高速藥物粉碎機、電子計數天平、電子天平(BS-221S、B-123S)、pH計(FE21/EL21)、國家標準檢驗篩(61目)、電熱恒溫震蕩水槽(DKZ1系列)、循環水蒸空泵(SHZ-IIIP)、可見分光光度計(WFJ7100)。
3.2實驗方法
粉碎過篩的綠茶末3g放入160ml的去離子水中,容器為三角玻璃杯,然后再放入一定量的纖維素酶液,最后放在40℃左右的溫開水容器中計時,時間大概5min左右取出、過濾,澄清綠茶,提高液體的清澈度,備用。按照上述單因素實驗的程序,分別進行五次實驗,取平均值計算茶多酚的含量,可以得到這樣的結論:纖維素的濃度(U/G),得到的水平值為:13.1、14.2、13.5、16.7、25.1;酶作用時間,得到的水平值為:11、21、31、41、51、61;酶作用的溫度,得到的水平值為:21、31、41、51、61。由此可見,通過以上實驗方法提取綠茶中的茶多酚,其結果沒有明顯差異。
3.3結果及分析
經過3.2.1的實驗得知,以葡萄糖液為例,得到的方程式為Y=0.9336X-0.1282,相關系數為R2=0.9985。通過前述實驗,可以看出:茶多酚的含量多少與其纖維素的含量多少成正比。纖維素的含量越高,茶多酚的含量也就越高。隨著纖維素液的增加,綠茶中茶多酚的含量也會增加,反之會下降。主要的原因是,茶葉是一種固體物,擴散到纖維素液中,不會全部溶解反應,同時也限制了酶的反應接觸面積。在酶濃度較低的情況下,酶與茶葉完全結合在一起,隨著酶濃度的提高,茶葉與酶不會達到飽和狀態,從而限制了酶的作用。所以說,在固定或特定濃度的茶葉中,還存在著酶用量的多少,如果超過了酶用量的最佳值,酶資源就會被廢棄或浪費掉。因此,控制纖維素濃度的值在16.5U/G最為適宜。
除上述情況外,纖維素酶的數量,也影響著茶多酚的提取量。從實驗中得知,纖維素酶液含量越濃,綠茶中茶多酚的含量會越多,當時間達到固定的范圍內,茶多酚的含量就會保持一個相對穩定的值。也可以這樣認為:隨著酶解時間的拖延,茶葉被有效的破解、反應,茶多酚溶解到茶葉水中,茶水中茶多酚的溶解越來越濃,在20min左右,由反應生成的葡萄糖、纖維二糖等產物的積累,纖維素酶溶液的濃度的增加,限制了酶作用的反應,綠茶中茶多酚濃度的變化,所以說,纖維素酶時間應在20min左右。此外,在實驗過程中,纖維素酶的溫度高低,也決定著是否能提取更多的茶多酚。隨著纖維素酶溫度的增加,綠茶中茶多酚的含量也會越來越多,當溫度達到50℃左右時,茶多酚的含量也會達到飽和,停留在一個固定的值范圍內,所以說纖維素酶的溫度適宜在50℃左右。
4.1實驗材料及設備
綠茶、單寧酶、培養基、檸檬酸緩沖、無食子儲備液、無食子酸丙脂、酒石酸亞鐵、粉碎機、計數器、計數天平、可分光光度計、震蕩水槽、霉菌培養箱、壓力蒸汽滅菌器、恒溫箱子。
4.2實驗方法
在無細菌的環境中,綠茶中放入孢子懸液,均勻攪拌,放入霉菌箱子里等待發酵。發酵完之后,提取粗酶液,再在粗酶液中倒入活性炭均勻攪拌,放入冰箱待用。等脫色后,過濾,除菌,置于冰容器中,依序過濾酶液后得到粗酶液,然后加入硫酸銨粉末,最后將沉淀物用檸檬酸緩沖溶解,從而提取出茶多酚。
4.3結果及分析
經過實驗,無食子酸的方程式Y=1.0237X-0.0075,葡萄糖的方程式Y=0.0025X-0.0176,谷氨酸的方程式Y=3.9442X-0.4721,三種結果表明測定范圍線性關系都較為穩定。單寧酶濃度為0—3.89U/范圍內,綠茶中茶多酚的含量隨著酶增添的多少而變化,酶增添的越多,茶多酚的含量越高,當酶增添到更多時,茶多酚會發生含量的減少。綠茶中茶多酚的含量與單寧酶作用時間有關,酶作用時間越長,綠茶中茶多酚的含量會越高,當酶時間在30-50之間時,茶多酚的含量顯示最佳狀態。綠茶中茶多酚的含量與單寧酶作用的溫度有關,酶溫度越高,綠茶中茶多酚的含量越高,但溫度在19-39之間時,茶多酚的含量會飽和,含量率增長速度較慢。通過上面的實驗分析,綠茶中茶多酚的提取,在溫度55℃左右的條件下,加入5.3U/g的單寧酶,浸提時間為38min,在三次實驗后,綠茶中茶多酚的平均值達到71.60mg/g,結果最為穩定。
綜上所述,雖然從綠茶中提取茶多酚有很多種方法,但經過統籌分析,較為優化的提取工藝是:利用150ml的有機溶劑,提取時間控制在20-40min,所需溫度掌握到50-70℃。在這樣的條件下,所能提取出來的茶多酚純度最高、數量最高,而且,這一提取過程,成本低廉、操作簡易,便于控制、風險很低,是非常優化的茶多酚提取工藝。
參考文獻
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作者簡介:羅合春(1963-),男,重慶萬州人,研究生,副教授,研究方向:生物分離純化技術的推廣和教學。