血細胞分析儀檢測網織血小板（RP）診斷血液相關疾病的意義

韓琳琳

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血細胞分析儀檢測網織血小板（RP）診斷血液相關疾病的意義

韓琳琳

【摘要】目的 研究血細胞分析儀檢測網織血小板（RP）診斷血液相關疾病的意義。 方法 選取我院2012年9月～2014年9月特發性血小板減少性紫癜（ITP）患者32例（觀察A組），再生障礙性貧血（AA）患者35例（觀察B組），急性白血病（AL）35例（觀察C組）和健康者40例（對照D組）。利用血細胞分析儀對他們的血液樣本（RP、血小板等指標）進行檢測。將A、B、C三組的檢測結果分別與對照D組進行比較。結果 觀察A組的RP為（24．01±6．24）%＞C組（9．97±2．86）%＞D組RP（7．20±1．87）%＞B組（4．09±1．91）%，A、B、C三組與D組比較差異有統計學意義（P＜0．05）；比較A、B、C三組患者診斷準確性，A組（93．75%）＞C組（11．43%）＞B組（57．14%），差異有統計學意義（P＜0．05）。結論 利用血液分析儀檢測RP的數量能反映骨髓中巨核系統生成血小板的情況，可提供有價值的監測數據，從而診斷血液相關疾病。

【關鍵詞】血細胞檢測儀；RP；血液疾病

網織血小板（RP）是骨髓中剛剛釋放到外圍血液中還未成熟的血小板，其細胞漿中含有較多的核糖核酸（RNA），這種物質可以被核酸熒光染料染色，從而能利用血細胞分析儀進行檢測[1]。RP可以反映骨髓中血小板的增生程度，判斷血小板的生成情況，是分析血小板生成狀態的有用指標，在血小板減少癥的鑒別和判斷上有較高的價值[2]。本次研究應用全自動血細胞分析儀，在網織紅細胞通道內RP中的RNA會被核酸熒光染色檢測外周血RP，檢查結果發現，RP的絕對值與總血小板數量的比值對鑒別血液相關疾病有一定意義。現將結果報告如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取我院2012年9月～2014年9月ITP患者32例為觀察A組，男11例，女21例，年齡8～58歲，平均（33.87±19.01）歲；AA患者35例為觀察B組，男15例，女20例，年齡5～63歲，平均（33.72±20.72）歲；AL患者35例為觀察C組，男19例，女16例，年齡4～67歲，平均（35.10±10.11）歲；健康者40例作為對照D組，男20例，女20例，年齡4～65歲，平均（35.27±10.09）歲，血小板檢測結果正常，肝功能正常，心電圖正常，排除患有心血管疾病、糖尿病和內分泌疾病等患者。所有患者和健康者在年齡、性別等方面差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

使用流式細胞儀。受檢者早晨應空腹進行檢測，從肘靜脈抽血2 ml，800 r/min離心15 min，取富含血小板的血漿（PRP），PRP與ACD抗凝劑以10：1的比例進行稀釋，再以2 000 r/min離心15 min。去除上層清液，重懸于濃縮血小板懸液200 μl PBS （0.1 mol/L，pH 7.4）中，取15 μl的PBS，將其與熒光素標記的血小板膜糖蛋白單克隆抗體在溫室共同孵育0.5 h后，與濃度為20 ng/ml的噻唑橙RNA染料孵育1 h，檢測10 000個以上的血小板RP。所有血液標本在采集后6 h內完成檢測。

1.3觀察指標

記錄檢測RP的含量并在治療過程中監測RP的絕對值變化。用SPSS 13.0對數據進行分析，各組血液病的RP結果分別與對照D組的結果對比，血小板相關抗體熒光百分率大于正常值范圍上限為陽性，小于正常值范圍上限為陰性。

1.4統計學方法

選用統計學軟件SPSS 19.0對研究數據進行分析和處理，計數資料采取率（%）表示，計量資料采用（±s）表示，組間對比進行X2檢驗和t值檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1ITP、AA、AL患者與正常者RP比較

對四組的檢測結果進行比較，觀察A組的RP含量高于D組，觀察B組RP含量低于D組，觀察C組的RP含量高于D組，比較結果差異均有統計學意義（P＜0.05）。結果見表1。

表1　ITP、AA、AL患者與正常者RP（%）比較

2.2比較 ITP、AA、AL患者診斷準確性

血小板相關抗體PAIgG、PAIgA、PAIgM的熒光百分率正常值分別為（10.48±5.05）、（9.40±4.42）、（7.23±3.14）。A組準確性＞C組＞B組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

表2　比較ITP、AA、AL患者診斷準確性

3　討論

RP是從骨髓中釋放入血的新生血小板，與成熟的血小板相比，它的體積更大更易觀察，更加活躍，蛋白質合成能力強，細胞質中RNA含量多，可被核酸熒光染料染色，是介于骨髓成熟的巨核細胞和成熟的血小板之間，剛從骨髓中釋放出來的未成熟細胞[3]。如果只是單純的血小板計數只能反映外周血中血小板的數量，而不能反映骨髓中血小板的生成情況，RP的計數則能反映血小板的生成情況[4]。

ITP是一種由于免疫反應引起的血小板破壞增加的出血性血液病，以血小板減少，骨髓巨核細胞正常或增多為特征，且育齡期女性的發病率高于男性，在其他年齡階段男女比較無差別[5]。利用血液分析儀測定RP能反映骨髓巨核細胞產生血小板的能力和破壞情況。在此次研究中我們隨機抽取了32例ITF患者，測量他們的RP計數與健康患者的RP計數進行對比，從本次研究數據中可以看出，ITF患者的RP計數明顯高于正常水平。這說明ITF患者血液中的血小板破壞增加，骨髓生成血小板的速率加快，外周血中的新生血小板增多，所以RP計數升高。

AA是一組由于多種原因所致的骨髓造血功能障礙，特征是骨髓造血干細胞增生降低、外周血全血細胞減少，臨床主要表現為貧血、出血和感染等，AA的發病原因與化學藥物、放射線或遺傳因素等有關。其中年齡在15～25歲以及60歲以上的老齡患者較多，男性的發病率高于女性[6]。從本次研究數據中可以看出，35 例AA患者的RP計數明顯低于正常水平，造血干細胞受到抑制，使血小板生成減少，骨髓血小板生成障礙。

AL是造血干細胞的惡性克隆性疾病，患者骨髓中存在著正常的多克造血和白細胞單克隆造血兩類競爭性細胞群，發病時骨髓中異常的原始細胞及白血病細胞大量增殖，積蓄與骨髓和其他造血細胞組織中從而抑制正常造血，臨床表現為貧血、出血、感染等，若未能得到及時治療，患者死亡率很高[7]。此次研究可以看出AL患者的RP計數高于正常水平，患者血小板計數減少，RP計數增加。不同的血液病的骨髓血小板生成情況不同，外周血中RP的計數也會相應變化。對A、B、C三組準確性進行比較，通過檢測RP和血小板相關抗體PAIgG、PAIgA、PAIgM的熒光百分率可以看出，檢測ITP的準確性高于AA和AL，AA的準確性最低。

綜上，可以通過血細胞分析儀檢測網狀血小板計數作為血液相關疾病的早期標準，可提供有價值的監測數據。

參考文獻

[1] 柴曉靜，張曉薇，陸莉，等． 網織血小板在急性白血病中的檢測和臨床意義[J]． 國際檢驗醫學雜志，2012，33（18）：2194-2195．

[2]曾釗宇，張宇，楊潔飛，等． 網織血小板對急性非淋巴細胞性白血病化療患者骨髓造血功能恢復的評估意義[J]． 現代檢驗醫學雜志，2013，28（4）：148-150．

[3]邰文靜． 檢測網織血小板對血小板減少性疾病的臨床應用[J]． 國際檢驗醫學雜志，2015，36（7）：996-997．

[4]張紅梅，楊愛云，丁玉慧，等． 網織血小板及血小板參數在血小板減少性疾病中的診斷價值[J]． 臨床薈萃，2011，26（7）：604-605．

[5]江虹，呂瑞雪，曾婷婷，等． 應用血細胞分析儀檢測網織血小板比率在腫瘤患者化療中的臨床應用[J]． 中華檢驗醫學雜志，2009，32（2）：184-186．

[6]劉艷，王貞，袁百香，等． 網織血小板和血小板相關抗體在特發性血小板減少性紫癜鑒別診斷中的作用比較[J]． 中國實驗血液學雜志，2011，19（4）：979-982．

[7]張延京，王剛． 血小板相關參數在血小板減少性疾病診斷中的臨床意義[J]．臨床和實驗醫學雜志，2013，12（19）：1533-1535．

Significance of Blood Cell Analyzer in the Detection of Blood Related Diseases Diagnosed by Reticulated Platelet (RP)

HAN Linlin, Beijing Anzhen Hospital of Capital Medical University, Beijing 100029, China

[Abstract]Objective To study the significance of blood cell analyzer in the detection of blood related diseases diagnosed by reticulated plateletbook=54,ebook=65(RP). Methods 32 patients with idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) (observation group A), 35 patients with aplastic anemia (AA) (observation group B), 35 patients with acute leukemia (AL) (observation group C) and 40 healthy people (control group D) who were admitted into our hospital from September 2012 to September 2014 were included in the study. Blood samples(RP platelet and other indicators)were detected by blood cell analyzer. The detection results of A, B and C of three groups were compared with those of control group D. Results It was found that RP in the observation group A was (24.01±6.24)% ＞ group C(9.97±2.86)% ＞group D (7.20±1.87)% ＞ group B (4.09± 1.91)%(P ＜ 0.05). The comparison of diagnostic accuracy rates of group A, B and C showed group A(93.75%) ＞ group C (11.43%) ＞ group B(57.14%) (P ＜ 0.05). Conclusion To adopt blood cell analyzer in detection of number of RP can refiect the situation of platelet formation in bone marrow megakaryocytic system, provide valuable monitoring data and diagnose blood related diseases.

[Key words]Blood cell analyzer, RP, Blood disease

doi：10．3969/j．issn．1674-9308．2016．03．034

【文章編號】1674-9308（2016）03-0053-03

【中圖分類號】R446

【文獻標識碼】A

作者單位： 100029 首都醫科大學附屬北京安貞醫院檢驗科