LC－MS測(cè)定雞肉中的24種β－受體激動(dòng)劑的研究

◎斯廣杰

（浙江華才檢測(cè)技術(shù)有限公司，浙江 諸暨 311800）

LC－MS測(cè)定雞肉中的24種β－受體激動(dòng)劑的研究

◎斯廣杰

（浙江華才檢測(cè)技術(shù)有限公司，浙江 諸暨 311800）

采用LCMS聯(lián)用方法測(cè)定雞肉中的24種β-受體激動(dòng)劑，結(jié)果表明：24種β-受體激動(dòng)劑在0.100～10.000 μg/L范圍內(nèi)線性良好；方法檢出限和方法定量限分別介于0.004～0.025 μg/kg和0.014～0.082 μg/kg。

超高效液相色譜儀；三重四極桿質(zhì)譜儀；雞肉；β-受體激動(dòng)劑

β-受體激動(dòng)劑是一組選擇性β2腎上腺素受體激動(dòng)劑，因能與動(dòng)物機(jī)體內(nèi)絕大多數(shù)組織細(xì)胞膜上的β受體結(jié)合而得名，是一類結(jié)構(gòu)和生理功能上類似腎上腺素和去甲腎上腺素的化學(xué)合成苯乙醇胺類物質(zhì)。歐盟96／22／EC指令中已頒布法規(guī)禁止使用，我國(guó)農(nóng)業(yè)部和國(guó)家質(zhì)檢總局也出臺(tái)規(guī)定禁止在動(dòng)物飼料或生長(zhǎng)過(guò)程中使用這類藥物。因此，建立快速、高靈敏度的雞肉中β-受體激動(dòng)劑檢測(cè)技術(shù)十分必要。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8050聯(lián)用系統(tǒng)。

1.2 分析條件

1.2.1 液相色譜條件

色譜柱:Shim-pack XR-ODS Ⅲ;流動(dòng)相:A相-0.1%甲酸水溶液;B相-甲醇;流速:0.3 mL／min;進(jìn)樣體積: 5 μL;柱溫:40 ℃;洗脫方式:梯度洗脫。

1.2.2 質(zhì)譜條件

離子源:ESI，正離子掃描;霧化氣:3 L／min;碰撞氣:氬氣;脫溶劑管溫度:250 ℃;加熱模塊溫度: 400 ℃;掃描模式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品MRM色譜圖（部分）

部分濃度為0.500 μg／L樣品的色譜圖如圖1所示。

2.2 線性關(guān)系

配制0.100、0.500、1.000、5.000 μg／L和10.000 μg／L不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2中的分析條件進(jìn)行測(cè)定，外標(biāo)法制作校準(zhǔn)曲線，在0.100～10.000 μg／L濃度范圍內(nèi)線性良好（見(jiàn)圖2）。

圖1 部分標(biāo)準(zhǔn)樣品MRM色譜圖(0.500 μg/L)

圖2 部分標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

2.3 精密度實(shí)驗(yàn)

對(duì)0.100、1.000、10.000 μg／L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)6次進(jìn)樣，考察儀器的精密度結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 基質(zhì)加標(biāo)實(shí)驗(yàn)

用空白基質(zhì)按照1.3進(jìn)行處理后加混標(biāo)至濃度為1.000 μg／kg，平行3份樣品測(cè)定回收率和RSD，具體結(jié)果見(jiàn)表2。樣品加標(biāo)回收率在90.10%～104.70%。空白基質(zhì)的色譜圖如圖3所示，標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖如圖4所示。

3 結(jié)論

LCMS-8050聯(lián)用測(cè)定雞肉中β-受體激動(dòng)劑的方法完成24種β-受體激動(dòng)劑的分離。不同濃度的精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.07%～0.40%和0.44%～4.12%，儀器精密

度良好;基質(zhì)加標(biāo)校準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)均大于0.998 1，方法檢出限和方法定量限分別在0.004～0.025 μg／kg和0.014～0.082 μg／kg。該方法分析速度快、重復(fù)性好、靈敏高，適合雞肉中β-受體激動(dòng)劑的高靈敏度檢測(cè)。

表1 部分保留時(shí)間和峰面積重復(fù)性結(jié)果(n＝6)

表2 加標(biāo)樣的回收率結(jié)果(n＝3)

圖3 空白基質(zhì)色譜圖

圖4 加標(biāo)回收色譜圖

[1]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告-18-2008 動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[2]遼寧省衛(wèi)生廳.DB21／3004-2013 牛羊組織中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè) 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].遼寧省地方標(biāo)準(zhǔn)，2013.

[3]中華人們共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB／T22286-2008，動(dòng)物源性食品中多種β-受體激動(dòng)劑殘留量的測(cè)定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

Determination of Twenty－four Kinds of Beta Agonists in Chicken by LC－MS

Si Guangjie
（Zhejiang Huacai Detection Technology Co., Ltd., Zhejiang Zhuji 311800, China）

This paper used the LCMS combined method to determine of 24 kinds of beta receptor agonists in chicken. The results showed that: between 24 kinds of beta agonists in 0.100 to 10.000 μg/L range with good linearity; the method detection limit and the method of quantitative limit were ranged from 0.004 to 0.025 μg/kg and 0.014 to 0.082 μg/kg.

Ultra performance liquid chromatography; Three quadrupole mass spectrometer; Chicken; Beta receptor agonist

R155.5