動(dòng)物源食品中同時(shí)檢測(cè)磺胺類、沙星類藥物殘留量的方法
——高效液相色譜法的研究

江詩(shī)韻

（惠州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測(cè)中心，廣東惠州 516008）

動(dòng)物源食品中同時(shí)檢測(cè)磺胺類、沙星類藥物殘留量的方法
——高效液相色譜法的研究

江詩(shī)韻

（惠州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測(cè)中心，廣東惠州 516008）

研究了高效液相色譜法紫外檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定動(dòng)物源食品雞肉中7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物含量的方法，采用色譜柱為C18（atlantis），4.6mm×250mm×5μm，流動(dòng)相為磷酸溶液—乙腈（85+15，v/v），紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm，流速 1.0mL/ min，進(jìn)樣量50μL，7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物在0.1～0.4mg/L 范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，在添加濃度為0.08mg/kg、0.12 mg/kg、0.16 mg/kg 時(shí)，7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的回收率80%左右，RSD小于5%。本方法操作簡(jiǎn)單、快速、精密度高、線性范圍寬，適用于雞肉中7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的同時(shí)測(cè)定。

磺胺；沙星；檢測(cè)；高效液相色譜法

“民以食為天，食以安為先”。近年來(lái)，食品質(zhì)量安全事件常有發(fā)生，很多商家為了謀取最大利益，在飼養(yǎng)畜禽動(dòng)物時(shí)濫用抗生素藥物，易造成畜禽產(chǎn)品的嚴(yán)重污染，通過(guò)食物鏈可在人體內(nèi)蓄積，導(dǎo)致人體過(guò)敏反應(yīng)并產(chǎn)生抗藥性等副作用[1]。

發(fā)展靈敏高、速度快、價(jià)格低的藥物殘留檢測(cè)技術(shù)是保障食品安全的關(guān)鍵之一。隨著時(shí)代的進(jìn)步，科技水平也不斷地提高，目前超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀在同時(shí)檢測(cè)多種類別藥物殘留方面具有重大貢獻(xiàn)，但由于儀器過(guò)于昂貴，不能得到普及，而傳統(tǒng)的儀器分析方法前處理過(guò)程復(fù)雜、效率低下，不能適用于大通量檢測(cè)樣本的分析。目前，磺胺類藥物和沙星類藥物的測(cè)定，多采用高效液相色譜法，氣相色譜法，毛細(xì)管電泳法，薄層色譜法，酶聯(lián)免疫法，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等。本實(shí)驗(yàn)建立了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定動(dòng)物源食品中磺胺類和沙星類藥物殘留的方法。該方法操作簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定、精密度高。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與裝置

美國(guó)AgilentHPLC，1200 series（美國(guó)安捷倫科技）；勻漿機(jī)，1109812（上海維誠(chéng)儀器有限公司）；電子天平，BS224感量為0.0001g（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；SKR電子天平，42050804E感量為0.01g（廈門巨林儀器有限公司）；高速冷凍離心機(jī)，TGL-16M（湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；渦旋振蕩器，MS1 MiniShaker（德國(guó)IKA公司）；氮吹儀，LB-W（青島路博恒業(yè)環(huán)保科技有限公司）。

1.2 主要試劑與材料

恩諾沙星/ENR、環(huán)丙沙星/CIP、沙拉沙星/SAR、達(dá)氟沙星/DAN、磺胺嘧啶/SD、磺胺間甲氧嘧啶/SMM、磺胺地索辛/SDM、磺胺二甲嘧啶/SM2、磺胺甲氧噠嗪/SMP、磺胺喹惡啉/SQ、磺胺甲噁唑/SMZ；乙腈（色譜純）：德國(guó)Merck公司；乙酸（分析純）：天津市富宇精細(xì)化工有限公司；磷酸（85%分析純）：天津市福晨化學(xué)試劑廠；無(wú)水硫酸鈉（分析純）：天津市福晨化學(xué)試劑廠。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取11種藥物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用甲醇溶解定容，配制成100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于-20℃冰箱中保存，可使用6個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別取適量的儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相0.05%（V/V）磷酸溶液+乙腈（85+15，v/v）稀釋制備成2.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液，4℃冰箱中保存，可使用3個(gè)月。

1.4 色譜分析條件

色譜柱：Atlantis：C185μm 250mm×4.6mm；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；進(jìn)樣量：50μL；柱溫：35℃；流速：1mL/min；梯度洗脫程序見(jiàn)表1。

表1 洗脫梯度

1.5 前處理方法

稱取5.00g雞肉樣品于50mL帶塞的離心管中，加入15mL 1%乙酸乙腈，進(jìn)行勻漿機(jī)高速勻漿，另取10mL 1%乙酸乙腈于另外一個(gè)離心管中，進(jìn)行清洗勻漿機(jī)刀頭，將其倒入前一個(gè)離心管中，合并兩次提取液，均勻混合，加入3～5g無(wú)水硫酸鈉，4000r/min離心5min，取其上清液10mL于15mL的離心管中，用氮吹儀吹近干，加入2mL流動(dòng)相0.05%（V/V）磷酸溶液+乙腈（85+15，v/v），溶解殘?jiān)鹗幓旌希D(zhuǎn)入1.5mL離心管中，8000r/min離心5min，取其上清液過(guò)0.22μm的針筒濾膜于進(jìn)樣瓶中待用。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)器的選擇

本實(shí)驗(yàn)單獨(dú)采用紫外檢測(cè)器，其中11個(gè)峰按先后順序分別是：磺胺嘧啶、環(huán)丙沙星、磺胺二甲嘧啶、達(dá)氟沙星、磺胺甲氧嗪、恩諾沙星、磺胺間甲氧嘧啶、沙拉沙星、磺胺甲噁唑、磺胺地索辛、磺胺喹噁啉。

2.2 精密度試驗(yàn)

取7種磺胺混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和4種沙星混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定法測(cè)供試品溶液，在上述色譜條件下連續(xù)進(jìn)行4次測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在紫外譜圖中峰面積的RSD＜5%。本法測(cè)定的精密度較好，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 7種磺胺類和4種沙星類藥物的方法精密度

2.3 回收率和檢出限

在陰性雞肉樣品中添加100～400μg/kg濃度范圍內(nèi)，磺胺類和沙星類藥物回收率在80%左右，可以滿足日常分析的要求，11種物質(zhì)在本方法中的回收率和檢出限見(jiàn)表3。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜—紫外檢測(cè)器法測(cè)定雞肉中的7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物，選用1%乙酸乙腈提取樣品，確定儀器的最佳工作條件為流動(dòng)相：0.05%（v/v）磷酸溶液-乙腈（85+15，v/v）；流速：1.0mL/min；柱溫：35℃；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；進(jìn)樣量：50μL。在此最佳條件下，7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的回收率80%左右，RSD小于5%，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.999。該方法操作簡(jiǎn)單、快速、精密度高、線性范圍寬，適用于雞肉中7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的同時(shí)測(cè)定。

表3 雞肉種7種磺胺類和4種沙星類藥物添加回收率與檢出限

[1]熊春蘭，郭平，占春瑞，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中類種獸藥殘留[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32，（2）：193-198.

Meanwhile Detection Animal food source of SAs and Xa-cin Two Medications Residue-HPLC Research

Jiang Shi-yun

High performance liquid chromatography ultraviolet method for the determination of SAS and Xa-cin chicken content，Reversed-phase chromatography column C18（atlantis），4.6mm×250mm×5μm，Mobile phase for phosphoric acid fluid – acetonitrile（85+15，v/v），Ultraviolet detected wavelength is 270nm，flow rate 1.0ml/min，injection volume of 50μL.SAS and Xa-cin in the range of 0.1ppm～0.4ppm with a good linear relationship on the added 0.08mg/kg、0.12 mg/kg、0.16 mg/kg of SAS and Xa-cin Add a recovery rate of 80%，RSD is less than 5%，The method is simple，rapid，high precision，linear range for the determination of SAs and Xa-cin chicken content.

SAs；Xa-cin；Detection；HPLC

S859.84

B

1003–6490（2016）04–0197–02

2016–04–10

江詩(shī)韻（1989—），女，廣東汕尾人，助理工程師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全方面工作。