高效液相色譜測定水中酚類化合物

褚 蕓，張吉君

（1.蘇州大學(xué)衛(wèi)生與環(huán)境技術(shù)研究所，江蘇蘇州 215000；2.蘇州市吳江區(qū)公安局交警大隊平望中隊，江蘇蘇州 215221）

高效液相色譜測定水中酚類化合物

褚 蕓1，張吉君2

（1.蘇州大學(xué)衛(wèi)生與環(huán)境技術(shù)研究所，江蘇蘇州 215000；2.蘇州市吳江區(qū)公安局交警大隊平望中隊，江蘇蘇州 215221）

高效液相色譜法在檢測方面具有的優(yōu)勢使其在很多領(lǐng)域表現(xiàn)突出，下面簡單介紹高效液相色譜法和高效液相色譜儀，并討論高效液相色譜法檢測水中化合物的步驟及檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

高效液相色譜法；高效液相色譜儀；酚類化合物

酚類化合物會對環(huán)境造成污染，使水的氣味和顏色變化，是致癌、致畸、致突變的具有潛在毒性的有機(jī)污染物。水中酚類物質(zhì)的檢測是對水質(zhì)評價的重要方面。高效液相色譜法操作簡便、精度高、重現(xiàn)性好使其在水中酚類物質(zhì)檢測中具有廣泛應(yīng)用。下面介紹高效液相色譜法的檢測原理、檢測儀器、檢測方法的等內(nèi)容。

1 高效液相色譜法與實驗儀器

液相色譜法是以液體作為流動相的技術(shù)方法，高效液相色譜法是在液相色譜法的基礎(chǔ)上引入氣相色譜法的實踐經(jīng)驗和原理改進(jìn)的方法，具有高壓、高速、高效、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣等特點。液相色譜法的基本原理是：不同組分的流動相在固定相中經(jīng)過時與固定相發(fā)生吸附、親和、排阻等作用，大小程度不同，流動相在固定相中的滯留時間不同，不同的樣品分子得以分離[1]。目前高效液相色譜法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)藥、工業(yè)、化學(xué)、商檢等領(lǐng)域物質(zhì)的分離分析。

高效液相色譜儀主要分為高壓輸液系統(tǒng)，進(jìn)樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)，檢測系統(tǒng)，輔助裝置等。高效液相色譜儀的組成包括了流動相的溶劑、泵、進(jìn)樣器、色譜柱（固定相）、檢測器、廢液以及數(shù)據(jù)系統(tǒng)。貯器中流動相溶劑被泵吸入然后輸出，經(jīng)壓力和流量測量后導(dǎo)入進(jìn)樣器。被分析樣品由進(jìn)樣器注入，并隨流動相一起以此進(jìn)入色譜柱，被分離的物質(zhì)進(jìn)入檢測器，經(jīng)微處理機(jī)采集進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，或用積分儀記錄色譜峰面積和色譜圖。復(fù)雜的樣品可以采用梯度淋洗操作，使樣品各組分均得到最佳分離，節(jié)約時間。其中檢測器常有紫外檢測器、熒光檢測器、示差熒光檢測器、光電二極管陣檢測等。美國waters公司生產(chǎn)出一系列高效液相色譜分析儀，如Delta prep 3000、Prep 500、Kilo Prep 250、Kilo Prep 1000、Kilo Prep 3000。

2 酚類化合物的檢測過程

2.1 色譜條件的確定

第一步確定需要檢測的酚類物質(zhì)波長，常見酚類化合物的波長如下：苯酚（275nm）、3-甲基苯酚（275nm）、2，4-二基苯酚（295nm）、2，4，6-三氯苯酚（295nm）、五氯酚（305nm）。

第二步就是確定流動相和梯度洗脫條件，一般A為濃度在1%的醋酸甲醇溶液，B相取濃度為1% 的醋酸水溶液。

2.2 水樣預(yù)處理

如果檢測的水樣為渾濁的水，則應(yīng)該定量濾紙后再進(jìn)行處理。如果水樣存在余氯殘留，用無水亞硫酸鈉脫氯。一般是先選擇15mL甲醇活化富集小柱，然后用15～30mL左右的純水活化，接下來加適當(dāng)濃度的硫酸溶液調(diào)節(jié)pH值在1.5～2.0之間。預(yù)處理之后的水樣就可以以5～10mL/min的流速通過富集小柱。富集完的樣品在N2或空氣中干燥10～15min，吸附在柱子內(nèi)壁的水分也要吹干。最后用甲醇或四氫呋喃洗脫小柱，收集液濃縮后裝瓶待用。

2.3 常用實驗儀器

常用的實驗儀器大致有以下幾種：高效液相色譜儀（2695）、紫外檢測器（2475）、色譜柱（C8）、富集柱（Oasis-HLB）、Molelement超純水機(jī)（1 820W）、科導(dǎo)超聲波清洗器（1 820W）。

3 檢測結(jié)果分析

采用外標(biāo)法定量，對制作出的混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和待測樣品測定其色譜峰及峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的濃度C與峰面積S的比值作線性回歸方程S=bC+a，對比標(biāo)準(zhǔn)曲線，分析樣品的相關(guān)系數(shù)r值大小。梁堅[2]研究水中酚的最佳色譜條件時得出的酚類化合物的回歸方程：苯酚（2.64×102C+2.47×102，相關(guān)系數(shù)0.999 90）、4-硝基酚（5.01×102C+2.01×102，相關(guān)系數(shù)為0.999 74）、間苯酚（2.03×102C+4.43×102，相關(guān)系數(shù)為0.999 95）、2，4-二氯酚（1.62×102C+4.68×102，相關(guān)系數(shù)為0.999 99）、2，4，6-三氯苯酚（1.91×102C+5.82×102，相關(guān)系數(shù)為0.999 95）、五氯酚（1.04×102C+2.48×102，相關(guān)系數(shù)為0.999 99）。酚類物質(zhì)的測定結(jié)果都很理想，相關(guān)性很高，說明用此種方法測定水中酚類物質(zhì)可靠性較高。梁景華[3]在測定水中酚類物質(zhì)時，對較低濃度的樣品重復(fù)做測定，計算出的相對標(biāo)準(zhǔn)差小于3.2%，說明此方法精密度非常好。幾種酚類化合物的回收效率也比較高。

4 結(jié)束語

高效液相色譜法具有高壓、高速、高效、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣的優(yōu)勢，在生物學(xué)、醫(yī)藥、工業(yè)、化學(xué)、商檢等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。高效液相色譜法的檢測過程大致可分為色譜條件的確定、水樣的預(yù)處理以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。檢測出的結(jié)果相關(guān)性高，方法可靠，同時常見的幾種酚類化合物回收效率也高。

[1]張旸，管春梅，陳文華，等.高效液相色譜法測定水中酚類化合物[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2003，（2）：196-197.

[2]薛鳳麗，李巖，楊瑞強(qiáng)，等.SPME—HPLC法測定水中的酚類化合物[J].中國給水排水，2006，（16）：81-83.

High Performance Liquid Chromatography（HPLC）Determination of Phenolic Compounds in Water

Zhu Yun，Zhang Ji-jun

High performance liquid chromatography detection has advantages of its outstanding performance in many areas，following a brief performance liquid chromatography and high performance liquid chromatography，high performance liquid chromatography and discuss the steps to detect and test compounds in water accuracy of the results.

high performance liquid chromatography；high performance liquid chromatograph；phenolic compounds

X832

A

1003–6490（2016）04–0137–01

2016–04–10

褚蕓（1989—），女，江蘇蘇州人，助理工程師，主要研究方向為環(huán)境檢測。