紅樹伴生植物相思子的化學成分研究

陶曙紅，楊雅賢，張玙，肖志會（.廣東藥科大學中藥學院，廣東廣州50006；.中國科學院南海海洋研究所儀器設備公共服務中心，廣東廣州5030）

紅樹伴生植物相思子的化學成分研究

陶曙紅1，楊雅賢1，張玙1，肖志會2
（1.廣東藥科大學中藥學院，廣東廣州510006；2.中國科學院南海海洋研究所儀器設備公共服務中心，廣東廣州510301）

目的研究紅樹伴生植物相思子Abrus precatorius L.莖葉的化學成分。方法采用硅膠柱色譜、凝膠Sephadex LH-20柱色譜等手段對相思子莖葉的化學成分進行分離，應用光譜分析方法并結合文獻對化合物進行結構鑒定。結果從相思子莖葉中分離得到7個化合物，經(jīng)鑒定分別為3-吲哚甲酸（1）、尿嘧啶（2）、N-［2-（1，3，4-三羥基-正二十烷基）］-正十六碳酰胺（3）、芒柄花素（4）、異亮氨酸（5）、豆甾-4，22-二烯-3β，6β-二醇（6）、△5，22豆甾醇-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷（7）。結論化合物2～7首次從該植物中分離得到。

紅樹；伴生植物；相思子；化學成分

紅樹伴生植物是指偶爾出現(xiàn)于能被不規(guī)則高潮浸淹到的紅樹林最內(nèi)緣或邊緣地帶的海岸、海濱、鹽生甚或陸生植物，它們或被認為是紅樹林的邊緣種類及非典型種類，包括偶爾出現(xiàn)在紅樹林中，但不成為優(yōu)勢種的木本植物，以及出現(xiàn)于紅樹林下的附生植物、藤本植物和草本植物［1］。紅樹伴生植物相思子Abrus precatorius L.為豆科蝶形花亞科相思子屬植物，在我國主要分布于廣東、海南、云南、廣西等地，種子有劇毒，供藥用，干燥莖葉內(nèi)含多種活性成分，用于咽喉痛、肝炎等［2］。據(jù)文獻報道，相思子的化學成分主要包括黃酮、三萜及生物堿等［3-6］。為進一步研究相思子中的化學成分，筆者對采自海南紅樹林的相思子莖葉的化學成分進行了研究，從中分離得到7個化合物，經(jīng)波譜解析并與文獻對照鑒定為: 3-吲哚甲酸（1）、尿嘧啶（2）、N-［2-（1，3，4-三羥基-正二十烷基）］-正十六碳酰胺（3）、芒柄花素（4）、異亮氨酸（5）、豆甾-4，22-二烯-3β，6β-二醇（6）、△5-22豆甾醇-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷（7），其中化合物2～7首次從該植物中分離得到。

1　儀器與材料

AVANCE AV500型核磁共振儀（瑞士Bruker公司，TMS作為內(nèi)標）；Bruker maXis質(zhì)譜儀（美國）；SH 200E型電子天平（日本）；EYELAN-1100V-W旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本東京理化）；SHZ-C型循環(huán)水式多用真空泵（河南鞏義市英峪予華儀器廠）。Sephadex LH-20凝膠（Pharmacia Biotech公司）；薄層色譜硅膠GF254與柱色譜硅膠（200～300目）均為青島海洋化工有限公司生產(chǎn)；其余試劑均為分析純，購自廣州化學試劑廠。

相思子莖葉樣品于2013年10月采自海南省海口市紅樹林保護區(qū)，經(jīng)張偲研究員鑒定為相思子Abrus precatorius L.，標本（編號20131005）存放于中科院熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點實驗室。

2　提取與分離

陰干粉碎的相思子莖葉（6 kg）用體積分數(shù)95%乙醇室溫浸泡提取3次，減壓濃縮得浸膏441 g。總浸膏用水混懸后，先用石油醚脫脂，水相依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，每次1 L，合并萃取液，回收溶劑后得乙酸乙酯萃取物53.7 g，正丁醇萃取物108 g。其中乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠色譜柱，以石油醚-乙酸乙酯（體積比7∶1～1∶1），三氯甲烷-甲醇（體積比10∶1 ～1∶1）梯度洗脫，經(jīng)TLC檢測合并得15個組分Fr1～Fr15。繼續(xù)對每一組分經(jīng)硅膠色譜柱分離，以凝膠Sephadex LH-20色譜柱純化，從Fr2-5（2.1 g）中得到化合物1（5 mg），從Fr3（6.12 g）中得到化合物2（6 mg），從Fr7（2.3 g）中得到化合物3（10 mg），從Fr15 （3.39 g）中得到化合物4（6 mg），從Fr6（3 g）中得到化合物5（11 mg），從Fr11（2.36 g）中得到化合物6 （5 mg），從Fr2-1（1.2 g）中得到化合物7（5 mg）。

3　結構鑒定

化合物1:白色針晶（乙酸乙酯）。1H-NMR在δ7.99（1H，d，J=7.5 Hz），7.46（1H，d，J=7.5 Hz），7.17（2H，m）有3組互相耦合的信號峰，可推測分子中具有鄰位取代的苯環(huán)，在δ 8.00（1H，s）處顯示吡咯環(huán)上2位與不飽和碳相連的質(zhì)子信號，提示化合物可能為吲哚類化合物。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ:8.10（1H，s，H-2），7.99（1H，brs，H-5），7.17（2H，m，H-6，7），8.10（1H，s，H-8），11.80（s，—NH），11.92（brs，—OH）。13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ:132.2（d，C-2），107.3（s，C-3），120.9（d，C-4），122.0（d，C-5），112.1（d，C-6），120.5（d，C-7），125.9（s，C-8），136.3（s，C-9），165.8（s，—COOH）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［7］報道基本一致，鑒定化合物1為3-吲哚甲酸（indole-3-carboxylic acid）。

化合物2:淺黃色結晶（甲醇）。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ:10.82（1-NH），11.02（3-NH），7.38 （1H，dd，J=7.5 Hz，H-4），5.44（1H，dd，J=7.5 Hz，H-5）。13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ:151.4（C-2），142.1（C-4），100.2（C-5），164.3（C-6）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［8］報道的基本一致，鑒定化合物2為尿嘧啶（uracil）。

化合物3:白色粉末（甲醇），EI-MS m/z 584.6 ［M+H］+，分子式為 C36H73NO4。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ:8.53（1H，d，J=8.5 Hz，NH），5.01（1H，m），4.50（2H，m），4.41（1H，m），4.30（1H，m），0.88 （6H，t，J=6.5 Hz，CH3）。13C-NMR（C5D5N，125 MHz）δ:173.3（C-1′），76.7（C-3），73.0（C-4），62.1 （C-1），53.7（C-2），36.8（C-2′），30.5（CH2），29.9 （CH2），22.9（CH2），14.2（CH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［9］報道的基本一致，故鑒定化合物3為N-［2-（1，3，4-三羥基-正二十烷基）］-正十六碳酰胺｛N-［2-（1，3，4-trihydroxyicosan-2-yl）］-hexadecanamide｝。

化合物4:白色針晶（甲醇），化合物1H-NMR譜低場區(qū)顯示有1個對位取代的苯環(huán)，δ 7.79（2H，d，J =8.5 Hz），7.08（2H，d，J=8.5 Hz），在δ 8.15（1H，s）處有1個單峰信號。13C-NMR譜提示有15個烯碳，根據(jù)以上信息推測為異黃酮類化合物。1H-NMR （C5D5N，500 MHz）δ:8.46（1H，d，J=9.0 Hz，H-5），8.15（1H，s，H-2），7.20（1H，brs，H-6），7.11（1H，d，J =1.8 Hz，H-8），3.69（3H，s，4′-OCH3），13.2（1H，s，7-OH）。13C-NMR（C5D5N，125 MHz）δ:55.2（4′-OCH3），103.1（C-8），114.3（C-3′，5′），115.9（C-6），117.9（C-10），124.6（C-3），125.3（C-1′），128.2 （C-5），130.8（C-2′，6′），152.7（C-2），158.5（C-9），159.9（C-4′），164.1（C-7），175.6（C-4）。IR（KBr）ν（cm-1）:3 129，1 635，1 608，1 569，1 513，887，809。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［10］報道的基本一致，故鑒定化合物4為7-羥基-4′-甲氧基異黃酮，又名芒柄花素（formononetin）。

化合物5:白色粉末（甲醇）。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ:0.93（3H，t，J=7.5 Hz，CH3），1.22（3H，d，J=7.0 Hz，CH3），1.50（2H，m），1.87（1H，m），2.39 （1H，m），4.19（1H，brs）。13C-NMR（C5D5N，125 MHz）δ:174.9（COOH），60.0（C-3），39.0（C-4），25.1（C-2），15.7（1-CH3），12.0（4-CH3），以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［11］報道的異亮氨酸一致，故鑒定化合物5為異亮氨酸（isoleucine）。

化合物6:白色針晶（三氯甲烷-甲醇）。1H-NMR （CDCl3，500 MHz）δ:4.24（1H，brs，H-3），5.55（H，brs，H-4），4.18（1H，m，s，H-6），5.15（1H，dd，J=15，8.5 Hz，H-22），5.03（1H，dd，J=15，8.6 Hz，H-23），1.01（3H，d，J=6.5 Hz，CH3-21），1.26（3H，s，CH3-19），0.73（3H，s，CH3-18）。13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ:36.9（C-1），29.3（C-2），74.3（C-3），128.7 （C-4），147.7（C-5），68.1（C-6），39.8（C-7），30.3 （C-8），54.3（C-9），36.8（C-10），20.9（C-11），39.1 （C-12），42.6（C-13），56.1（C-14），24.3（C-15），28.2 （C-16），56.3（C-17），12.1（C-18），21.5（C-19），40.5 （C-20），21.2（C-21），138.3（C-22），129.4（C-23），51.3（C-24），31.9（C-25），19.0（C-26），21.1（C-27），25.4（C-28），12.3（C-29）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［12］報道的基本一致，故鑒定化合物6為豆甾-4，22-二烯-3β，6β-二醇（stigmasta-4，22-en-3β，6β-diol）。

化合物7:白色無定型粉末（甲醇）。1H-NMR譜在δ 5.35（1H，d，J=3.0 Hz），5.22（1H，dd，J=8.5，15.0 Hz）和5.07（1H，dd，J=8.5，15 Hz）有3個烯氫質(zhì)子，表明含有2個雙鍵，δ 3.96～5.05區(qū)間的信號峰表示含有糖基，δ 5.05（1H，d，J=7.5 Hz）為端基質(zhì)子，根據(jù)偶合常數(shù)可以判斷為β構型。13C-NMR顯示有35個碳信號，其中 δ 140.9、121.9是典型的△5-22甾醇類化合物5位和6位雙鍵碳信號；δ 138.8、129.4是甾醇類化合物的22位和23位雙鍵碳信號；δ 102.5、75.3、78.5、71.7、78.0、62.8為葡萄糖碳信號；δ 78.6是與氧相連的 3位碳信號。13C-NMR （C5D5N，125 MHz）δ:36.9（C-1），30.2（C-2），78.6 （C-3），39.3（C-4），140.9（C-5），121.9（C-6），32.0 （C-7），32.1（C-8），50.3（C-9），37.4（C-10），21.3 （C-11），42.3（C-12），42.4（C-13），56.9（C-14），24.5（C-15），28.5（C-16），56.0（C-17），12.1（C-18），19.4 （C-19），36.4（C-20），19.0（C-21），138.8（C-22），129.4（C-23），46.0（C-24），29.4（C-25），19.9（C-26），19.2（C-27），23.4（C-28），12.0（C-29），102.5 （C-1′），75.3（C-2′），78.6（C-3′），71.7（C-4′），78.0 （C-5′），62.8（C-6′）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［13］報道的基本一致，故鑒定化合物7為△5，22豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 （△5-22stigmasterol-3-O-β-D-glycopyranoside）。

［1］中國數(shù)字科技館.科普專欄［EB/OL］.［2016-03-26］. http://amuseum.cdstm.cn/AMuseum/mangrove/bszw.html.

［2］謝宗萬.全國中草藥匯編:下冊［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1996:416.

［3］CHANG H M，CHIANG T C，MAK T C W.Isolation and structure elucidation of Abruslactone A:a new oleanenetype triterpene from the roots and vines of Abrus precatorius ［J］.J Chem Soc Chem Comun，1982，36:1197-1198.

［4］CHOI Y H，HUSSAIN R H，PEZZUTO J M，et al. AbrusosidesA-Dfournovelsweet-tastingtriterpene glycosides from the leaves of Abrus precatorius［J］.J Natural Products，1989，52（5）:1118-1127.

［5］MARKHAM K R，WALLACE J W，BABU Y N，et al.8-C-glucosylscutellarein 6，7-dimethyl ether and its 2″-O-apioside from Abrus precatorius［J］.Phytochemistry，1989，28（1）:299-301.

［6］SONG Chunqing，HU Zhuibi.Abruquinone A，B，D，E，F(xiàn) and G from the Root of Abrus precatorius［J］.Acta Botanica Sinica，1998，40（8）:734-739.

［7］張朝鳳，周愛存，張勉.澤瀉的化學成分及其免疫抑制活性篩選［J］.中國中藥雜志，2009，34（8）:994-998.

［8］黃日明，彭燕，周雪峰，等.南海美麗海綿屬化學成分研究［J］.中國藥學雜志，2010，45（5）:338-340.

［9］廖柳，王楠，梁秋，等.刺柳珊瑚Echinogorgia sp中的三個神經(jīng)酰胺［J］.中草藥，2010，41（6）:851-854.

［10］黃勝陽，屠鵬飛.紅車軸草異黃酮化合物的分離鑒定［J］.北京大學學報（自然科學版），2004，40（4）:544-549.

［11］孫建龍，鄧安珺，李志宏，等.亞麻根中5個微量化學成分的分離和結構鑒定［J］.中國中藥雜志，2011，36（2）: 258-261.

［12］徐燕，梁敬鈺.玉米須的化學成分研究［J］.中草藥，2006，37（6）:831-833.

［13］劉桂艷，鄭健，余振喜，等.五葉木通藤莖甾體和三萜成

分研究［J］.中藥材，2005，28（12）:1060-1062.

（責任編輯：陳翔）

Study on the chemical constituents of the mangrove associated plant Abrus precatorius L.

TAO Shuhong1，YANG Yaxian1，ZHANG Yu1，XIAO Zhihui2
（1.School of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China；2.South China Sea Institute of Oceanology，Chinese Academy of Sciences，Guangzhou 510301，China）

Objective To study the chemical constituents of the mangrove associated plant Abrus precatorius L.Methods The chemical constituents of Abrus precatorius L.were isolated and purified by silica gel column chromatography and Sephadex LH-20 column chromatography，respectively.Their structures were identified by spectral methods（NMR，MS）.Results Seven compounds were isolated from this plant and identified asindole-3-carboxylicacid（1），uracil（2），N-［2-（1，3，4-trihydroxyicosan-2-yl）］-hexadecanamide（3），formononetin（4），isoleucine（5），stigmasta-4，22-en-3β，6β-diol（6），△5-22stigmasterol-3-O-β-D-glycopyranoside（7）.Conclusion Compounds 2-7 were obtained from Abrus precatorius L.for the first time.

mangrove associated；mangrove associated plant；Abrus precatorius L.；chemical constituents

R284.2

A

1006-8783（2016）04-0425-03

10.16809/j.cnki.1006-8783.2015122904

2015-12-29

國家自然科學基金青年科學基金項目（41306147）

陶曙紅（1974—），女，博士，副教授，主要從事中藥及天然藥物活性成分研究，Email:tsh7524098@126.com；通信作者:肖志會（1976—），女，博士，高級工程師，主要從事海洋天然產(chǎn)物及核磁共振研究，Email:xzh@scsio.ac.cn。

網(wǎng)絡出版時間:2016-05-019 14:25 網(wǎng)絡出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1413.R.20160519.1425.002.html