P27蛋白在腺性膀胱炎的表達及其與膀胱癌的關聯(lián)

楊安卿 黃滔 張朝暉 楚晨龍 趙晨輝 馬斌斌 忻志祥 周文龍 沈周俊

(上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院泌尿外科，上海 200020)

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P27蛋白在腺性膀胱炎的表達及其與膀胱癌的關聯(lián)

楊安卿 黃滔 張朝暉 楚晨龍 趙晨輝 馬斌斌 忻志祥 周文龍 沈周俊

(上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院泌尿外科，上海 200020)

目的 分析P27蛋白與腺性膀胱炎的癥狀嚴重程度、預后復發(fā)及其與膀胱癌的關聯(lián)。方法 應用免疫組化S-P法分別檢測20例正常膀胱組織、43例腺性膀胱炎組織及25例膀胱癌組織中P27蛋白的表達程度，分別其與腺性膀胱炎的癥狀嚴重程度、預后復發(fā)及其與膀胱癌的關聯(lián)。結(jié)果 P27蛋白陽性表達率在正常膀胱組織、腺性膀胱炎組織及膀胱癌組織中分別為80%，48.84%和32%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在膀胱癌患者中，P27蛋白陽性者與P27蛋白陰性者術后復發(fā)率分別為12.5%和64.71%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 P27蛋白表達的下降或缺失，更容易誘發(fā)腺性膀胱炎及膀胱腫瘤的發(fā)生，增加膀胱癌患者術后的復發(fā)率。

P27蛋白； 腺性膀胱炎； 膀胱癌； 蛋白表達

腺性膀胱炎是一種膀胱黏膜及黏膜下層黏液腺體異常增殖、化生性病變。其發(fā)病率日益增高，且與膀胱癌關系密切。P27基因是近年來發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，它的表達產(chǎn)物廣泛抑制多種細胞周期蛋白和激酶的活性，影響細胞周期G1期的調(diào)控，使細胞停滯在G1期，從而抑制了細胞增值。P27異常表達參與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展過程，與膀胱癌的分級分期密切相關，并對臨床具有一定的預后評估價值。本研究通過檢測腺性膀胱炎、膀胱癌及正常膀胱組織的P27基因蛋白，探討P27蛋白與腺性膀胱炎的發(fā)生發(fā)展、癥狀嚴重程度及預后的關系，進一步評估腺性膀胱炎與膀胱癌的關聯(lián)，現(xiàn)報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選自2010年1月至2012年12月上海瑞金醫(yī)院盧灣分院泌尿外科手術切除且經(jīng)病理診斷證實的患者，其中腺性膀胱炎組織43例，女33例，男10例，年齡42～75歲，平均54歲；膀胱腫瘤組織25例，女9例，男16例，年齡45～82歲，平均年齡58歲。另選取20例正常膀胱組織取自癌旁正常組織或前列腺增生TUVP手術病人，分別評估其與腺性膀胱炎患者臨床癥狀嚴重程度及術后復發(fā)率的關系。

1.2 試劑及方法 P27鼠McAb即小鼠抗人單克隆抗體及EnVision試劑(HRP) 選自丹麥DAKO公司，使用4 μm石蠟切片，染色方法采用鏈霉菌康生物素蛋白-過氧化酶免疫組化法(S-P法)。判斷標準：以染色呈棕黃色為陽性反應細胞，采用顯微攝像計算機圖像分析系統(tǒng)，每張切片檢測5個視野，每個視野200個細胞，計算陽性細胞所占總細胞的百分比，以高倍視野陽性著色細胞數(shù)>50%為陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析，采用χ2檢驗及相關性檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 P27蛋白在正常膀胱、腺性膀胱炎、膀胱癌組織中的表達 P27陽性染色主要表現(xiàn)為細胞核出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒。在全部檢測的20例正常膀胱組織中，有16例P27蛋白表達陽性，陽性率為80%。43例腺性膀胱炎標本中，P27蛋白陽性表達21例，陽性率48.84%，顯著低于正常膀胱組織(P<0.05)。25例膀胱癌標本中，P27蛋白陽性表達8例，陽性率32%，顯著低于正常膀胱組織(P<0.01)，但與腺性膀胱炎組織相比，差異無統(tǒng)計學意義(P=0.179)。

2.2 腺性膀胱炎組織中P27陽性率與術后復發(fā)的關系 觀察43例腺性膀胱炎患者，術后隨訪12～18個月，共有8例患者術后腺性膀胱炎復發(fā)，總復發(fā)率為18.60%。術前檢查P27蛋白表達陽性21例，其中3例患者術后腺性膀胱炎復發(fā)，18例術后隨訪未見復發(fā)，在P27蛋白陽性表達者中，腺性膀胱炎的復發(fā)率為14.29%。而術前檢查P27蛋白表達陰性患者22例，其中5例患者術后隨訪發(fā)現(xiàn)腺性膀胱炎復發(fā)，17例患者術后隨訪未見復發(fā)，復發(fā)率為22.73%。雖然P27蛋白陰性表達患者的復發(fā)率高于P27蛋白陽性表達者，但兩者比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.482)。

2.3 膀胱癌組織中P27蛋白陽性率與術后復發(fā)的關系 25例膀胱癌患者，術后隨訪12～18個月，病理均為移行細胞癌。共有12例患者復發(fā)，復發(fā)率48%。術前檢查P27蛋白表達陽性8例，其中1例患者術后膀胱癌復發(fā)，7例患者術后隨訪未見復發(fā)，在P27陽性表達者中，膀胱癌的復發(fā)率為25%。而術前檢查P27蛋白表達陰性17例，其中11例患者術后膀胱癌復發(fā)，其余6例患者術后隨訪未見腫瘤復發(fā)，復發(fā)率為64.71%，顯著高于P27蛋白表達陽性組(P<0.05)。

2.4 P27蛋白陽性表達與腺性膀胱炎患者癥狀嚴重程度的關系 在全部的43例腺性膀胱炎患者中，臨床歸納患者主要不適癥狀為尿頻尿急、排尿不適、下腹疼痛以及血尿，分別以第一不適主訴，對應分為A、B、C、D四組。其中A組21例，B組8例，C組5例，D組9例。本實驗共檢測出P27蛋白陽性表達21例，其中A組10例，B組3例，C組3例，D組5例，各組的陽性率分別為A組47.62%，B組37.5%，C組60%，D組55.55%，經(jīng)χ2檢驗，各組間陽性表達率無統(tǒng)計學差異，即P27蛋白陽性表達與腺性膀胱炎患者癥狀程度無明顯關聯(lián)。

3 討 論

腺性膀胱炎是否為膀胱癌的癌前病變，目前仍存在爭議[1]。P27基因位于人染色體12P13，是一種調(diào)控細胞周期并抑制細胞分裂的重要基因，其基因產(chǎn)物P27蛋白為一種分子量為27KD的熱穩(wěn)定性蛋白，與P21、P57具有同源性，參與抑制Cyclin-CDKs復合物的活性，抑制細胞周期的過度增殖，從而調(diào)控細胞周期，同時具有促進細胞分化、介導細胞間粘附及誘導凋亡等功能[2-3]。P27基因在各種組織中出現(xiàn)缺失、突變或重排的事件是非常罕見的[4]，但研究證實在許多惡性腫瘤組織中P27蛋白水平確實有明顯降低[5]，而P27 mRNA水平不一定有改變，它的表達異常主要是轉(zhuǎn)錄水平后的改變。P27蛋白水平的下降或缺失，減低了它對CDK或cyclin-CDK復合物活性的抑制效應，導致CDK的活化效應遞增，使細胞能夠完成細胞周期G ～S期的重要轉(zhuǎn)換，驅(qū)動細胞周期的運行，而使細胞增殖、分裂過快、過多，乃至腫瘤形成[6]。目前研究[7-8]表明，P27蛋白低表達與胃癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、肝癌、鼻咽癌、卵巢癌等密切相關。P27水平越低，預示腫瘤預后越差。P27蛋白低表達與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展、肌層浸潤、早起復發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關。

本研究顯示，P27蛋白陽性表達率在正常膀胱組織、腺性膀胱炎組織及膀胱癌組織中分別為80%、48.84%及32%，其中后兩者顯著低于前者，表明P27蛋白的減弱或缺失，與腺性膀胱炎及膀胱癌的發(fā)生密切相關。本研究的43例腺性膀胱炎患者中，P27蛋白陽性者與P27蛋白陰性者術后的復發(fā)率分別為14.29%與22.73%，雖P27蛋白陰性者術后復發(fā)率高于P27蛋白陽性者，但兩者之間無明顯差異，提示P27蛋白表達的改變與腺性膀胱炎患者術后的復發(fā)率無明顯關聯(lián)，而這可能原因為術后隨訪時間過短，本研究的25例膀胱癌患者中，P27蛋白陽性者與P27蛋白陰性者術后復發(fā)率分別為12.5%與64.71%，兩者之間有顯著差異，提示P27蛋白的降低或缺失，更容易誘發(fā)膀胱癌的復發(fā)。本研究統(tǒng)計了腺性膀胱炎的幾個主要癥狀，如尿頻尿急、排尿不適、下腹疼痛及肉眼或鏡下血尿，其中各癥狀組中，P27蛋白的陽性表達率分別為47.62%、37.5%、60%及55.55%，經(jīng)統(tǒng)計檢驗，各癥狀之間無統(tǒng)計學差異，提示P27蛋白表達的高低與腺性膀胱炎的主訴癥狀的嚴重程度無明顯關聯(lián)。

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