使用快速實驗室診斷技術(shù)進(jìn)行病原體檢測的價值與存在的問題

張 鑫 楊廣燕 韓聲遷 耿 霞

快速實驗室診斷技術(shù)主要是指免疫滲濾試驗法、免疫層析試驗法等固相膜免疫檢測法，其內(nèi)容涉及細(xì)菌學(xué)、免疫學(xué)及分子生物學(xué)等范疇。快速實驗室診斷技術(shù)主要用于檢測患者呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)及生殖系統(tǒng)等系統(tǒng)所感染的細(xì)菌、病毒、支原體、寄生蟲等病原體[1]。隨著社會的發(fā)展、醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，我國居民所感染的細(xì)菌、病毒、支原體、寄生蟲等病原體的種類也在逐漸增多。快速確認(rèn)患者感染的病原體有利于臨床醫(yī)師準(zhǔn)確地判定其病情，為其制定合理的治療方案。目前，使用快速實驗室診斷技術(shù)診斷傳染病已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)工作者研究的重點。近幾年，我實驗室使用快速診斷技術(shù)對感染性疾病患者進(jìn)行了病原體檢測，獲得了很好的效果，顯著降低了患者病情的誤診率及漏診率。本文主要對使用快速實驗室診斷技術(shù)的原理、優(yōu)點及存在的問題進(jìn)行了總結(jié)，以供相關(guān)醫(yī)學(xué)工作者參考和借鑒。

1 膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)

膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)能將特異性抗原或抗體以條帶樣固定在硝酸纖維膜上，將乳膠微球等可顯色的標(biāo)記物吸附在結(jié)合墊上。在使用膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)進(jìn)行病原體檢測時，檢測人員需將樣品加到試紙條的一端，使樣品能夠通過毛細(xì)作用前移，并溶解固化，與結(jié)合墊上的標(biāo)記物形成復(fù)合物，移動至固定抗原或抗體區(qū)域，發(fā)生特異性結(jié)合，并被截留、顯色[2]。膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)具有操作簡便、檢驗的速度快、靈敏度和特異度高、試劑和樣品的用量較小等優(yōu)點[3]。使用該技術(shù)進(jìn)行病原體檢測一般在10～15分鐘之內(nèi)便可完成，其檢測結(jié)果直觀，可作為臨床醫(yī)師診斷患者病情的直接依據(jù)[4]。因此，該檢測方法在臨床上得到了較快的發(fā)展和廣泛的應(yīng)用。

膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)在臨床上可用于定性診斷病毒性疾病、細(xì)菌性疾病、寄生蟲病等傳染性疾病及腫瘤，也可用于定量診斷機(jī)體的激素水平、心血管疾病中心肌酶標(biāo)志物的水平等。該技術(shù)可用于進(jìn)行流行病普查或快速診斷急重癥。

2 蛋白質(zhì)組快速診斷技術(shù)

2.1 蛋白質(zhì)組雙向電泳技術(shù)

蛋白質(zhì)組雙向電泳技術(shù)主要是將樣品通過蛋白質(zhì)溶解與細(xì)胞裂解技術(shù)將非蛋白質(zhì)成分去除，并依據(jù)不同的蛋白質(zhì)電點特性進(jìn)行分階段分離的一種技術(shù)。其中第一相為等電聚焦電泳，第二相為基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）。該技術(shù)是一項優(yōu)質(zhì)的二維分離技術(shù)。臨床醫(yī)師可依據(jù)不同的雙向電泳技術(shù)建立細(xì)胞或特定組織的雙向電泳數(shù)據(jù)庫和蛋白質(zhì)組圖譜，并進(jìn)行圖像分析[5-6]。

2.2 電噴霧質(zhì)譜（ESI-MS）技術(shù)與質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）技術(shù)

ESI-MS與MALDI-TOF-MS是一類“軟電離”技術(shù)，可在電離的過程中有效地保留分子的完整性，是一種比較理想的對蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定的核心檢測技術(shù)。該技術(shù)可依據(jù)電場將液相多肽樣品進(jìn)行離子化處理，并利用基質(zhì)吸收激光的能量，使固相多肽樣品離子化，從而測得肽段離子參數(shù)，得到相對完整的蛋白質(zhì)分子量，實現(xiàn)對蛋白質(zhì)的鑒定[7-8]。

蛋白質(zhì)組雙向電泳技術(shù)和ESI-MS與MALDI-TOF-MS技術(shù)均利用了大多數(shù)疾病的患者都會出現(xiàn)特異性蛋白生物標(biāo)志的特點來診斷疾病。使用這兩項技術(shù)進(jìn)行病原體檢測的靈敏度和特異度較高。該技術(shù)可用于診斷前列腺癌、卵巢癌、白血病、心血管疾病、肝膽疾病及肺結(jié)核等疾病。

3 使用快速實驗室診斷技術(shù)進(jìn)行病原體檢測時存在的問題

在使用快速實驗診斷技術(shù)檢查病原體時，檢測儀器的質(zhì)量、試紙的質(zhì)量、檢測人員的技術(shù)都嚴(yán)重影響著檢測的結(jié)果。其中任何一項因素出現(xiàn)偏差，都有可能導(dǎo)致檢測結(jié)果出錯。因此，相關(guān)的醫(yī)療衛(wèi)生部門應(yīng)盡量選擇質(zhì)量較好的儀器和設(shè)備進(jìn)行病原體檢測。同時，相+ 關(guān)的醫(yī)療衛(wèi)生部門還需要定期對檢測人員進(jìn)行培訓(xùn)和考核，以提高其專業(yè)素質(zhì)及對檢測知識的認(rèn)知水平，能夠嚴(yán)格遵守相關(guān)的操作規(guī)范和流程完成檢測工作，從而有效地提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確率[9-10]。在采用快速實驗室診斷技術(shù)對患者進(jìn)行相關(guān)的檢測時，應(yīng)根據(jù)為其采集樣品基質(zhì)形式（如痰液、血清、血液、尿液及固體組織等）的不同應(yīng)用不同的試紙條、樣品墊及結(jié)合墊等檢測物品，以免樣品的粘稠度及酸堿度對檢測結(jié)果造成影響。

4 小結(jié)

快速實驗室診斷技術(shù)是臨床上常用的診斷技術(shù)，在進(jìn)行病原體檢測方面具有較高的準(zhǔn)確率。臨床實踐證實，使用快速實驗室診斷技術(shù)進(jìn)行病原體檢測能快速確認(rèn)患者感染的病原體，有利于臨床醫(yī)師準(zhǔn)確地判定其病情和為其制定合理的治療方案。同時，使用快速實驗室診斷技術(shù)檢測病原體還具有操作簡單、得出實驗結(jié)果的速度快等優(yōu)點。目前，臨床上主要使用膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)、蛋白質(zhì)組快速診斷技術(shù)等實驗室快速診斷技術(shù)進(jìn)行病原體檢測。快速實驗室診斷技術(shù)的應(yīng)用在一定程度上緩解了基層醫(yī)院診斷疾病困難、誤診率高及漏診率高等問題。需要注意的是，用快速實驗室診斷技術(shù)進(jìn)行病原體檢測時，可受到檢測儀器的質(zhì)量、試紙的質(zhì)量、檢測人員的技術(shù)等因素的影響。相關(guān)的醫(yī)療衛(wèi)生部門應(yīng)盡量選擇質(zhì)量較好的儀器和設(shè)備進(jìn)行病原體檢測，并定期對檢測人員進(jìn)行培訓(xùn)和考核，以有效地提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確率。

總之，膠體金免疫層析快速診斷技術(shù)、蛋白質(zhì)組快速診斷技術(shù)等快速實驗室診斷技術(shù)在進(jìn)行病原體檢測方面具有較高的應(yīng)用價值，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

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