乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα、Ki-67的表達及臨床意義

馬士輝 凌飛海

（廣東省中山市人民醫院乳腺外科，廣東中山528403）

乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα、Ki-67的表達及臨床意義

馬士輝 凌飛海

（廣東省中山市人民醫院乳腺外科，廣東中山528403）

目的 探討人表皮生長因子受體2（HER-2）、DNA拓撲異構酶Ⅱα（TOPOIIα）、Ki-67在乳腺癌組織中的表達及臨床意義。方法 回顧性分析我科2012年1月至2012年12月共212例乳腺癌患者的臨床病理資料，分別采用熒光原位雜交（FISH）法及SP免疫組化法檢測乳腺癌組織標本中HER-2、TOPOIIα及Ki-67的表達，并分析其與臨床病理特征的相關性。結果 212例乳腺癌組織中，HER-2、TOPOIIα、Ki-67陽性表達率分別為25%（53/212）、9.4%（20/212）、60.4%（128/212），HER-2基因擴增中TOPOIIα同步擴增17例，HER-2、TOPOIIα、Ki-67基因的擴增或高表達與腫瘤大小、淋巴結轉移及病理組織學分級有關。結論 乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα、Ki-67的聯合檢測對乳腺癌預后評估及提供個體化治療有重要意義。

乳腺癌；HER-2；TOPOIIα；Ki-67

隨著分子生物學的不斷發展，乳腺癌的生物學指標越來越受到人們的重視，相關生物學指標已成為乳腺癌分子分型的依據，而不同亞型的乳腺癌對治療的反應及預后都不盡相同[1]，乳腺癌相關生物標記物的檢測在臨床上越來越重要。目前乳腺癌的常規檢測指標如ER、PR、P53及HER-2等，對于乳腺癌治療方法的選擇以及判斷預后具有重要意義，但仍缺乏完全反映乳腺癌生物學特性的臨床指標。本研究分別采用FISH法及SP免疫組化法檢測乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα及Ki-67的表達，并分析各指標之間與乳腺癌臨床病理特征的關系，為指導臨床治療及判斷預后提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2012年1月至2012年12月在我科就診的女性乳腺癌患者手術標本共212例，年齡26～73歲，中位年齡49.7歲。所有患者術前均未接受放療或化療等治療，病理診斷明確，根據2003年乳腺腫瘤WHO組織學分類標準[2]，其中174例浸潤性導管癌、2例浸潤性小葉癌、21例原位癌、8例黏液腺癌、其他類型7例。其中有淋巴結轉移58例，未見淋巴結轉移154例。

1.2 病理檢測方法、試劑及儀器：全部標本經常規10%中性福爾馬林固定，常規石蠟包埋、切片。采用FISH法檢測乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα的基因表達，FISH法檢測基因試劑盒均購自北京金菩嘉醫療科技有限公司，包含2種混合探針：橘紅色熒光代表HER-2/TOPOIIα基因，綠色熒光代表17號染色體著絲粒，所有操作按照試劑盒說明及要求完成。免疫熒光顯微鏡使用日本奧林帕斯公司（型號：BX51）的產品。SP免疫組化法檢測乳腺癌組織中Ki-67的表達，所有SP試劑盒均購自上海長嘉生物科技有限公司。

1.3 結果判定：HER-2/TOP2A基因擴增的判讀參考文獻[3]，Ki-67陽性的判斷標準參考文獻[4]，根據2011年 St.Gallen國際乳腺癌共識會議定義Ki-67≤14%為低表達，Ki-67＞14%為高表達[6]。

1.4 統計學處理：采用SPSS 19．0軟件對計數資料進行χ2檢驗，HER-2、TOPOIIα和Ki-67各組間相關性采用Spearman相關性分析，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα、Ki-67的表達：212例乳腺癌組織標本中HER-2基因擴增53例，陽性率為25%（53/212）；TOPOIIα基因擴增20例，陽性率為9.4%（20/212）；Ki-67高表達128例，陽性率為60.4%（128/212）。

2.2 乳腺癌組織中HER-2、TOPOIIα、Ki-67陽性表達與臨床病理因素間關系：HER-2、TOPOIIα及Ki-67在腫瘤＞2 cm的乳腺癌組織中高表達或基因擴增率明顯高于腫瘤≤2 cm（P＜0.05）；HER-2、TOPOIIα及Ki-67的高表達或基因擴增率在有淋巴結轉移的乳腺癌組織中明顯高于無淋巴結轉移（P＜0.05）；HER-2、TOPOIIα及Ki-67在組織學分級高的乳腺癌組織中高表達或基因擴增率明顯高于組織學分級低的組織（P＜0.05），詳見表1。

表1 HER-2，TOPOIIα，Ki-67陽性表達與臨床病理因素間關系 [n（%）]

2.3 乳腺癌組織中HER-2與Ki-67、TOPOIIα的相互關系：53例HER-2基因擴增的乳腺癌患者中Ki-67高表達的有42例，說明HER-2基因擴增往往伴隨著Ki-67的高表達。有17例TOPOIIα基因與HER-2基因同步擴增，概率32.1%（17/53），而HER-2基因不擴增的患者中TOPOIIα的基因擴增率僅為 1.9%（3/159）。乳腺癌患者 TOPOIIα和HER-2的表達存在顯著相關性，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 結論

乳腺癌的預后除了與腫瘤大小、組織學類型、淋巴結轉移等情況有關外，可能與其分子生物學行為關系更大。同時乳腺癌又是一種高度異質性的惡性腫瘤，癌細胞可以表達多種不同的生物學標志物，單一因素往往難以確定其與乳腺癌生物學行為的關系，因此多種標志物的聯合檢測可以更準確地為乳腺癌治療方案的選擇及預后的判斷提供臨床依據。

HER-2原癌基因又稱c-erbB-2，是表皮生長因子受體家族成員之一，參與細胞生長、分化的調節。現有證據表明HER-2基因與乳腺癌的發生、發展及預后關系緊密，并且是評價乳腺癌預后不良的獨立指標[5]，對制定合理的靶向治療及化療方案具有重要的參考意義。目前檢測HER-2狀態常用的方法有免疫組化法及FISH法，其中FISH法因其檢測結果準確，被一致推薦為檢測HER-2基因是否擴增的金標準。本組212例乳腺癌中HER-2的檢測均采用FISH法，其陽性表達率為25%，HER-2基因擴增的患者，腫瘤大小、腋窩淋巴結陽性率及組織學分級均較HER-2基因不擴增患者高，與文獻報道一致。

拓撲異構酶是DNA復制過程中的關鍵酶，在DNA的合成、轉錄、核分裂等過程中發揮著重要作用。拓撲異構酶分為Ⅰ、Ⅱ兩型，其中TOPOII又分為α和β兩個亞型。TOPOIIα基因與HER-2基因都位于17q 21-22上，在基因定位上非常靠近，有文獻報道，在HER2基因擴增的原發性乳腺癌中，TOPOIIα基因出現擴增的概率為24.3%～55%[11]，因此兩者在基因表達和變化上可能存在某種聯系。在本研究中，53例HER-2陽性乳腺癌患者中有17例TOPOIIα基因同步擴增，概率為32.1%，與文獻報道結果相似。本研究結果說明TOPOIIα與HER-2的表達存相關性，有共同高表達趨勢。另有研究表明，TOPOIIα是蒽環類化療藥物的特定靶點，其可能可以作為蒽環類藥物化療敏感性的預測因子[12]。但是，目前TOPOIIα基因的檢測不是臨床常規檢查項目，并且沒有納入乳腺癌分子分型的評判指標，因此其在預測預后及指導治療的臨床價值上并未得到重視。

細胞增殖活性是反映腫瘤發生、發展的一個重要指標，而Ki-67是一種全面反映細胞增殖活性的可靠指標[9-10]，Ki-67高表達往往代表著腫瘤細胞增殖活躍，提示預后不佳。St.Gallen國際乳腺癌共識會議在2011年將Ki-67納入乳腺癌分子分型判讀標準，Ki-67的臨床意義越來越得到重視。文獻[11]報道，乳腺癌患者Ki-67表達率為60%～80%，本組病例為67.8%，結果相近。并且Ki-67高表達的情況下腫瘤較大，腫瘤組織學分級更高，發生腋窩淋巴結轉移的比例大。

乳腺癌的發生、發展是一個多因素、多基因改變的長期過程，與許多生物學指標聯系緊密。本研究通過對臨床上常用的多種生物學指標進行檢測，并初步探討了它們與乳腺癌臨床病理因素之間的關系，發現聯合檢測HER-2、TOPOIIα及Ki-67對臨床上乳腺癌患者制定綜合治

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Expression and Clinical Significance of HER-2，TOPOIIα，Ki-67 in Breast Cancer Tissues

Ma ShihuiLing Feihai
（Zhongshan People's Hospital of Guangdong Province of Department of Breast Surgery，Zhongshan 528403，China）

ObjectiveTo probe into the expression and clinical significance of human epidermal growth factor receptor 2（HER-2），DNA topoisomerase II alpha（TOPOIIα），Ki-67 in breast cancer.MethodsClinical pathological data of 212 patients with breast cancer in our department from January，2012 to December，2012 were retrospective analyzed.Then，the expression of HER-2，TOPOIIα and Ki-67 in breast cancer tissues were detected by fluorescence in situ hybridization（FISH）and SP immunohistochemical method respectively，and its correlation with clinical pathological characteristics was analyzed.Results In 212 cases of breast cancer，the HER-2，TOPOII，Ki-67 positive expression rate were respectively 25%（53/212），9.4%（20/212），60.4%（128/ 212），and the simultaneous amplification of TOPOII gene in 17 cases of HER-2 gene amplification，Amplification or high expression of HER-2，TOPOII，Ki-67 gene was associated with tumor size，lymph node metastasis and histological grading.ConclusionThe joint detection of HER-2，TOPOII，and Ki-67 in breast cancer tissues which it is of great significance to evaluate the prognosis of breast cancer and provide individualized treatment.

Breast cancer；HER-2；TOPOIIα；Ki-67

R730.2

A 學科分類代碼： 32027

1001-8131（2016）05-0504-03

2016-06-12

2011年廣東省中山市衛生局項目（J2011043）