219株銅綠假單胞菌臨床分布和耐藥性分析

劉書敏 蔣 玲? 秦繼寶 黃慧青

219株銅綠假單胞菌臨床分布和耐藥性分析

劉書敏 蔣 玲? 秦繼寶 黃慧青

目的 了解銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供依據。方法 采用Microscan auto SCAN-4 細菌鑒定分析儀，對2014年1月至2015年12月檢出的219株銅綠假單胞菌進行鑒定及藥敏分析。結果 219株銅綠假單胞菌主要來源于痰標本和膿液標本，痰標本檢出173株，占79.00%；膿液標本檢出19株，占8.68%；219株銅綠假單胞菌主要來自本院各病區住院患者，科室分布以ICU、呼吸內科和老年病科為主，分別占22.37% 、17.35%和13.24%；抗菌藥物中氨曲南的耐藥率最高，耐藥率為51.2%，耐藥率最低的抗菌藥物是阿米卡星，耐藥率13.2%。結論 銅綠假單胞菌引起的感染以下呼吸道為主，臨床醫師應根據藥敏試驗結果合理使用抗菌藥物，減少耐菌株的產生。

銅綠假單胞菌 藥敏試驗 分布 耐藥性

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aemginasa）是醫院內部感染的重要病原菌之一，是一種需氧或兼性厭氧、氧化酶陽性的非發酵革蘭氏陰性桿菌。當機體免疫力處于低下狀態時，可引起呼吸道、皮膚、血液、泌尿生殖道系統等一系列感染。近年來，由于臨床抗生素的廣泛、不合理使用，使銅綠假單胞菌耐藥性不斷增強，多重耐藥菌株大量出現［1］，給臨床正確的診療帶來較大困難。為了解本院銅綠假單胞菌的臨床分布情況及耐藥性特點，作者回顧性分析了2014年1月至2015年12月本院臨床送檢的各類標本分離得到的219株銅綠假單胞菌，為臨床合理使用抗菌藥物提供準確的實驗室依據。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 分離得到的219株銅綠假單胞菌，來自本院2014年1月至2015年12月期間，臨床各病區送檢的標本，包括痰液、各類分泌物、尿液、咽拭子、穿刺液、膽汁、血液等標本分離的非重復分離菌株（非重復分離菌株：1周之內同一患者、同一部位、同類標本相同分離菌株只可以統計1次）。

1.2 細菌培養與鑒定 不同種類的合格標本送檢后，根據標本要求進行直接接種或增菌后轉種于血瓊脂平板、麥康凱平板上（購于鄭州安圖生物工程有限公司），置于5%～10%CO2培養箱35℃培養18～24h，觀察菌落生長情況；血培養使用BACTEC 9050全自動血液培養儀進行血液培養，血培養瓶儀器報陽性后轉種于血平板。選取不同單個可疑菌落進行革蘭染色，鏡檢可見革蘭陰性桿菌，并且氧化酶試驗為陽性，進行鑒定。對于細菌培養以及鑒定均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》執行［2］。

1.3 儀器與試劑 Microscan auto SCAN-4 細菌鑒定分析儀，NC50細菌鑒定藥敏板以及配套試劑，均購于美國西門子公司。

1.4 細菌鑒定及藥敏試驗 對可疑菌落分離出純菌落后進行革蘭染色及氧化酶試驗。革蘭陰性桿菌接種NC50鑒定藥敏板，置于35℃非CO2培養箱中培養16～24h，滴加相應試劑后，放入Microscan auto SCAN-4細菌鑒定藥敏分析儀判讀結果。培養鑒定所用到的質控菌株為銅綠假單胞菌（ATCC27853），購于衛生部藥品鑒定所。

1.5 統計學方法 采用回顧性調查分析，運用世界衛生組織細菌耐藥性監測中心推薦的WHONET5.6軟件，對銅綠假單胞菌常用的抗菌藥物敏感率和耐藥率進行數據處理和統計分析。

2 結果

2.1 銅綠假單胞菌感染的臨床科室分布構成比 檢出率最高為ICU病房，高達22.37%，其次為呼吸內科，為17.35%；老年病科為13.24%。見表1。

表1 219株銅綠假單胞菌各臨床科室分布構成比

2.2 銅綠假單胞菌標本來源分布構成比 見表2。

表2 219株銅綠假單胞菌標本來源分布構成比

2.3 藥敏結果 219株銅綠假單胞菌對13種抗菌藥物的耐藥率見表3。

表3 219株銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥分析（%）

3 討論

銅綠假單胞菌為常見條件致病菌，廣泛存在于自然環境及醫院環境中，也是醫院感染最主要的病原菌之一［3-5］，當機體處于免疫力低下狀態的時侯，可引起包括呼吸道感染、傷口感染、泌尿道感染、血液感染以及消化道等多部位感染。從本院分離出的219株銅綠假單胞菌主要來源于呼吸道的痰液標本，檢出173株，占79.00%，其次為膿液標本，檢出19株，占8.68%，其他標本的檢出率相對較低。分析數據表明，從呼吸道痰液標本分離得到的銅綠假單胞菌明顯多于其他部位的標本，說明現階段本院銅綠假單胞菌引起的感染仍以下呼吸道感染為主。與相關文獻報道的分布情況基本相符［6-7］。

本資料表明，在臨床科室銅綠假單胞菌感染分布中，ICU、呼吸內科以及老年病科是銅綠假單胞菌檢出率較高的三個主要病區［8-10］，究其原因，因ICU、呼吸內科以及老年病科的患者多是住院時間較長，且年老體弱、長期應用抗生素的患者，因臨床的一系列操作破壞了機體的黏膜屏障作用，最易引起銅綠假單胞菌感染。另外該類患者抗菌藥物應用時間較長，極易使銅綠假單胞菌等菌株產生耐藥性，于是為銅綠假單胞菌的多重耐藥創造了感染條件。因此，必須加強措施，加大對銅綠假單胞菌醫院感染的調查和耐藥性監測等手段，采取綜合性的防治措施，臨床醫生應當嚴格遵守抗生素使用原則，院感科以及檢驗科應當加大力度對醫院環境微生物學的監測，尤其是對高危科室（ICU、呼吸內科以及老年病科）的監測，極大的降低銅綠假單胞菌院內感染的發生。

本文藥敏結果顯示，分離檢出的219株銅綠假單胞菌中，對氨曲南的耐藥率最高，達51.2%，另外，對阿米卡星和妥布霉素也有著較高的敏感性，分別占78.1%和84%，該結果與周文虹等報道相符［11］。另外，本文結果還顯示對銅綠假單胞菌耐藥率較低的抗菌藥物為美羅培南、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素和阿米卡星，含酶抑制劑及碳青霉烯類抗生素仍是臨床治療銅綠假單胞菌感染的首選藥物，其中治療銅綠假單胞菌感染抗菌活性最強的藥物碳青霉烯類抗菌藥，因其對質粒介導超廣譜β-內酰胺酶、染色體及質粒介導的頭孢菌素酶均具有高度穩定性，具有超強、廣譜的抗菌能力，在臨床治療銅綠假單胞菌感染中使用非常普遍，但隨著碳青霉烯類抗菌藥的在臨床上的廣泛使用，給臨床醫生日常治療上帶來較大困難。

［1］ 王亞紅,張青鋒,潘立東．2009-2012年銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥性分析．中華醫院感染學雜志,2014,24(5):1064-1066．

［2］ 葉應嫵,王毓三．全國臨床檢驗操作規程．第三版．南京:東南大學出版社, 2006:736-753．

［3］ 倪語星,尚紅．臨床微生物學檢驗．第五版．北京:人民衛生出版社,2013:137-139．

［4］ 韓靜,沈萍萍,高靈寶．2006-2009年744株銅綠假單胞菌分布特點和耐藥狀況分析．檢驗醫學與臨床,2011,8(7):842-843．

［5］ 巫艷彬,陳一強,孔晉亮,等．醫院常見革蘭陰性桿菌的分布及耐藥性分析．中華醫院感染學雜志,2014,24(7):1597-1599．

［6］ 徐準．88株銅綠假單胞菌耐藥性分析．國際檢驗醫學雜志,2015,36(22):3345-3346．

［7］ 張昭勇,王元元,蔡克濤,等．2003-2009年我院銅綠假單胞菌耐藥性監測分析．湖北醫藥學院學報,2011,30(1):56-59．

［8］ 林建平,潘品福,陶興和．銅綠假單胞菌感染的臨床分布及耐藥性分析．檢驗醫學,2007,22(6):724-726．

［9］ 戢運超,饒榮．某縣級醫院銅綠假單胞菌的分布及耐藥性變遷．中國感染控制雜志,2014,13(4):246-248．

［10］ 陳強．銅綠假單胞菌耐藥性及其院內感染的分布特點分析研究．中國現代藥物應用,2014,8(17):140-141．

［11］ 周文虹,陳金連,官煜彬．2014能某院銅綠假單胞菌的分布及耐藥情況．國際檢驗醫學雜志,2015,36(18):2730-2732．

Objective To investigate clinical distribution and the drug resistance of Pseudomonas aeruginosa，to provide scientifc evidences for clinical application of antibiotic. Methods We retrospectively surveyed the infection of Pseudomonas aeruginosa in our hospital from January 2014 to December 2015，Microscan auto SCAN-4 was used to identify the separation of 219 strains Pseudomonas aeruginosa drug susceptibility results analyzed. Results 219 strains Pseudomonas aeruginosa were mainly isolated from sputum and pus specimens，173 strains were isolated from sputum specimens，accounted 79.00%；19 strains were isolated from pus specimens，accounted 8.68%，219 strains Pseudomonas aeruginosa were mainly isolated from patients hospitalized in the intensive care unit（ICU）（22.37%），which were mainly from Respiratory Medicine Department of Gastroenterology（17.35%）and Department of geriatrics（13.24%），the most resistance rates was azatreonam（51.2%），the lowest resistance rates was amikasin（13.2%）. Conclusions Pseudomonas aeruginosa mostly come from lower respiratory tract infection specimen，so clinical doctors should select antimicrobials according to drug susceptibility test.

Pseudomonas aeruginosa Susceptibility testing Distribution Drug Resistanc

222042 江蘇省連云港市東方醫院檢驗科

*通信作者