趙陽
(開原市農產品質量安全檢驗監測站,遼寧 開原 112300)
酶抑制法檢測蔬菜中有機磷農藥殘留分析
趙陽
(開原市農產品質量安全檢驗監測站,遼寧 開原 112300)
目前對于蔬菜中有機磷農藥殘留檢測的研究有很多,傳統的氣相色譜分析和液相色譜分析技術由于設備和操作方法的限制,不能大規模推廣。酶抑制法具有檢測快速、設備簡單、精度較高等優勢,近年來發展很快。
酶抑制法;有機磷農藥;檢測技術;植物酯酶
有機磷農藥最早在20世紀30年代開始研制使用,1944年世界范圍內就出現了100多種有機磷殺蟲劑。目前,有機磷農藥在我國農業生產中應用較廣,過量使用及清潔不完全造成的農藥殘留嚴重威脅著人們的身體健康。酶抑制法是一種簡便、靈敏、經濟的快速檢測方法,其是基于有機磷農藥對酶活性的抑制作用。用酶抑制法測定有機磷農藥的毒性最為直接、最為專一,且方法靈敏,對前處理步驟要求低,在較短的時間就能得到檢測結果。
1.1 樣品前處理技術
檢測樣品的前處理過程包含提取過程和凈化過程。提取是指將蔬菜中的農藥溶解分離出來的操作步驟,現階段使用效果較好的提取劑有乙酸、甲醇、乙醇等,而采用輔助設備能有效提高提取效率。凈化指的是取出樣品中無關成分干擾的過程,對于農產品來說,有機分子的成分復雜,特別是大分子的蛋白質和氨基酸嚴重影響提取結果,對于目標農藥的檢測會造成較大的影響。SPE萃取技術是現階段應用較廣的有機磷農藥檢測前處理技術,先進的SPE萃取技術是一種結合了液固萃取和色譜技術的新型有機磷農藥檢測萃取技術。萃取柱是一種以氧化鋁、硅膠等具有較強吸附能力的物質為主的離子交換柱,該項技術具有溶劑使用量小、重復性高、環境友好等諸多優點,在實際應用中與高壓液相色譜技術相結合,能有效檢測有機磷農藥殘留。
1.2 乙酰膽堿酯酶檢測有機磷農藥殘留
乙酰膽堿酯酶檢測技術所依據的昆蟲毒理學原理是:有機磷農藥對于昆蟲中樞神經和周圍神經系統有一定影響,主要體現在乙酰膽堿酯酶的活性方面,導致乙酰膽堿的傳輸障礙并積累,昆蟲中毒致死。含有有機磷農藥的樣品在前處理工藝的處理之后,加入到酶和底物的混合液中,反應之后加入顯色劑,然后測定樣品的吸光度,就能夠計算出膽堿酯酶的抑制程度,通過抑制率與農藥殘留濃度的相關關系方程式,就能夠完成對于蔬菜中有機磷農藥的檢測。該方法主要用到分光光度計。
根據酶促反應的反映動力學原理,當蔬菜中不存在有機磷農藥和氨基甲酸酯類農藥,則底物會在酶的作用下分解,反應速率可以通過吸光值隨時間的變化速率求出。當反應混合物中存在有機磷農藥,則會在一定程度上抑制酶的活性,從而對顯色體系的反應速率造成一定影響,此時求得吸光度隨時間的變化速率,有機磷農藥的殘留濃度可以通過兩者的數量關系求得[1]。
1.3 植物酯酶抑制方法
乙酰膽堿酯酶方法的主要缺點在于使用成本較高,在此背景下,部分學者研究了植物酯酶抑制方法。植物酶具有來源豐富、制取方便等優勢。使用植物酯酶抑制方法,逐漸建立起相應的薄層-植物酯酶抑制技術。與乙酰膽堿酯酶一樣,該技術也是應用了有機磷農藥對于植物酯酶的抑制作用,當蔬菜中殘留了有機磷農藥,則反應就會受到抑制,反應產物相對減少,顯色劑顯示出的顏色變化就能夠對農藥殘留量進行判斷[2]。
有機磷農藥在我國蔬菜殺蟲中應用非常廣泛,近年來研究發現有機磷農藥并非一種安全農藥,蔬菜中殘留的有機磷農藥對食用者身體健康影響較大。本文分析了現階段應用較為成熟的乙酰膽堿酯酶檢測技術和植物酯酶檢測技術,該項技術的推廣能夠在一定程度上推進蔬菜中有機磷農藥檢測技術的進步。
[1]邱朝坤,劉曉宇,任紅敏,等.酶抑制法檢測蔬菜中有機磷農藥殘留[J].食品與機械,2010(2):40-42,71.
[2]王小紅.酶抑制法檢測蔬菜中的有機磷農藥殘留的方法研究[D].武漢:華中農業大學,2006.
S481.8
A
1674-7909(2016)30-93-1
趙陽(1979-),男,大專,助理農藝師,研究方向:農產品質量安全監測。