豬禽采血及血清制備

文│張偉（江西省南昌市新建區石埠鎮農業技術推廣綜合站）

豬禽采血及血清制備

文│張偉（江西省南昌市新建區石埠鎮農業技術推廣綜合站）

血清學檢測是診斷動物疫病、評價重大動物疫病強制免疫效果的重要手段之一，血液樣品的采集及制備足量、合格的血清是保證血清學檢測成功的前提條件。畜禽采血及血清制備是畜牧獸醫部門一項常規的業務工作，也是基層畜牧獸醫人員必須熟練掌握的技術。現簡單介紹豬禽采血及血清制備的操作方法，供參考。

一、采血前調查摸底

為了檢驗動物疫病免疫抗體水平是否達標，需要對已進行免疫接種的豬禽個體采血。采血前，認真查閱養殖檔案，摸清防疫等相關情況，對免疫注射情況不詳的、免疫注射時限未達到規定要求的不納入采樣范圍。同時，要檢查豬禽個體健康狀況，健康狀況不好的、正在患病治療或尚未治愈的，以及生長發育不良的也不納入采樣范圍，以免引發應激反應和意外事故。

二、豬禽采血

1.采血部位。豬采血的部位可選擇前腔靜脈和耳靜脈，但大批量采血時宜選擇前腔靜脈。禽采血的部位可選擇禽翅靜脈和心臟，最常用的是禽翅靜脈采血。

2.采血具體方法。

（1）豬前腔靜脈采血。采血前將同群豬只隔離，避免其攻擊采樣人員，造成意外傷害事故，確保采血工作順利進行。備齊采血器具，根據豬只大小，采取適當的保定方法。對25千克以下的小豬，采取人工仰臥保定方法，雙后肢與身體平行向后輕輕拉直，雙前肢朝上拉直與體中線垂直并左右微微張開。在雙前肢與胸骨連線的前側左右凹窩內，采血人員用酒精或碘酊棉球消毒后，選用9#×25毫米針頭進針2～3厘米，針刺方向為向后內方與地面呈60°角，輕輕抽出前腔靜脈血液即可。采血完畢，用消毒棉球緊壓采血部位針孔處，迅速拔出針頭，壓迫止血片刻后，解除保定。

對體型較大的豬只，采用站立式保定方法，用金屬保定器套住豬的上頜骨，收緊金屬保定器圈環，向前方用力牽引，將豬的上頜骨稍稍吊起并偏向右側，使豬的頭頸與水平面呈30°角，這時豬的注意力集中在鼻部，豬多呈后退姿勢。采血人員用酒精或碘酊棉在豬的右側胸前凹窩處消毒，用采血針對準凹窩最低處，垂直刺入，感覺有負壓感且有回血，則標志已刺入血管，然后輕輕回抽針管內芯，即可采取前腔靜脈血液。采血完畢，拔出針頭，采血部位用消毒棉球壓迫止血片刻后，解除保定。對100千克以上的豬采血一般宜選用14#×38毫米針頭采血，50～100千克的育肥豬選用12#×38毫米針頭，25～50千克的小豬選用12#×30毫米針頭。

（2）禽翅靜脈采血。輔助人員將家禽個體側臥保定，展開翅膀，拔掉腋窩部羽毛，可見由翼根進入腋窩的翼根靜脈，對其用酒精或碘酊棉球進行消毒。采血人員等待消毒液干燥后，左手拇指壓迫血管近心端，使靜脈血管怒張、明顯，右手用裝有7號針頭的采血針或注射器沿翼根向翅膀方向，于血管0.3～0.5厘米一旁傾斜刺入皮膚，再與血管平行進針0.2～0.4厘米后刺入血管，然后逐步放松按壓，緩慢抽取血液。進針不宜過深，針頭的切口面應向上。采血完畢后，用棉球壓迫采血部位1～2分鐘止血，同時可起到消毒作用。

3.采血時間。一般為豬、禽進行免疫接種后抗體的高峰期進行血樣采集。提前通知被采血單位或養殖戶在采血當天采血前不要飼喂畜禽，被采樣畜禽禁食（空腹）8小時后進行采血，一天中多選擇在早上或午后采血。

三、血清制備

1.血樣靜置。豬樣品每份采集全血不少于3毫升，禽樣品每份采集全血不少于2毫升。用一次性無菌注射器采血后把注射器活塞往后拉，直接去掉內芯，可形成封閉的離心管，再加針頭帽，最后針頭朝上傾斜30～45°擺放，在室溫（20～25℃）下放置2～3小時，待血清自然析出。

使用一次性采血針連接真空采血管采集血液樣品后，把采血針取下，直接將采血管與地面成30～45°斜放，在室溫下放置2～3小時，待血清自然析出。

2.血樣運輸。采血后室溫靜置10～15分鐘，待血液凝固后才能運送。運送血樣樣品時一定要輕拿輕放，不要發生劇烈震動。使用血液樣品專用運輸箱運送更好。能在4小時內運輸到達實驗室的，只需冷藏后運輸；不能在4小時內送達的，則要做冷凍處理后再冷藏運輸，必須在24小時內送到。

3.實驗室血清制備。血樣運輸到實驗室后，接收的樣品若血清析出良好，可直接將血清轉入塑料離心管，按實驗室規定程序編號檢測；接收的樣品若血清析出較差或室外氣溫過低，可放入37℃恒溫箱中1小時或25～37℃水浴鍋中1小時作預處理，再用離心機1500～2000轉/分鐘離心5分鐘，以分離血清。在實驗室，若短時間保存，4℃冷藏即可，時間最多不能超過1個月；若長時間保存，可在-20℃冷凍保存。血清由室溫轉入-20℃或由-20℃轉入室溫時，須經過冷藏并搖勻處理，切忌反復凍融。