肉鴿大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗

文│李賀俠（安徽省和縣畜牧獸醫局）

肉鴿大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗

文│李賀俠（安徽省和縣畜牧獸醫局）

當前，在肉鴿養殖場中，大腸桿菌病已經逐漸成為重要的常見細菌性傳染病之一。不同年齡段的肉鴿都可能感染大腸桿菌病，該病對幼齡鴿的危害比較嚴重，死亡率高。隨著肉鴿規模化、集約化養殖的持續發展，飼養管理不善、衛生狀況不良、氣候突變、營養失衡以及其他應激因素均可誘發該病。肉鴿大腸桿菌病是由不同血清型的大腸桿菌引起的以腹瀉為主要癥狀的一類疾病，臨床表現為呼吸困難，精神萎靡，呆立閉眼，羽毛雜亂，腿爪干燥，排黃白色稀糞等，發病后死亡率較高。由于大腸桿菌的血清型較多，對藥物的敏感程度也不一樣，且易產生耐藥性，在治療時存在一定的盲目性，治療后又易復發，容易對養殖業造成較大損失。

筆者結合工作實際，通過對某肉鴿養殖戶送檢的以腹瀉為特征且病理解剖發現肝臟表面有針尖大小灰白色壞死灶的病死肉鴿進行病原的分離鑒定，選用藥敏試驗中篩選出的敏感藥物進行治療，取得較好效果，為該病的診斷、治療提供參考依據。

一、材料和方法

1.材料。

（1）病料。某肉鴿養殖戶送檢的以腹瀉為特征的病死肉鴿10只。

（2）培養基。麥康凱瓊脂培養基，營養瓊脂培養基以及各類糖發酵管等。

（3）藥品與試劑。革蘭氏碘液、95%乙醇溶液、沙黃溶液、糖發酵試管、甲基紅試劑等；藥敏紙片（頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢唑啉、頭孢西丁、奧復星、頭孢哌酮、先鋒霉素、慶大霉素、頭孢拉定、頭孢呋辛、克林霉素、鏈霉素、阿米卡星、先鋒霉素V、氨芐西林、環丙沙星、卡那霉素等17種抗菌藥物紙片）購自杭州天和微生物試劑有限公司。

2.方法。

（1）細菌分離培養。無菌取病死肉鴿的心血、肝臟組織分別劃線接種于麥康凱瓊脂平板，37℃培養24～48小時，取若干個菌落涂片，革蘭氏染色鏡檢，在油鏡下觀察細菌的形態及染色特性。挑取疑為大腸桿菌的菌落再劃線接種于麥康凱瓊脂平板，直至純化為止，并對純化后的細菌冷凍保存，備用。

（2）細菌生化試驗。取純培養物分別接種于葡萄糖、乳糖、麥芽糖等自制的糖發酵管中，37℃培養24～48小時，觀察發酵管的反應情況。取純培養物分別做糖發酵試驗、吲哚試驗、甲基紅試驗、尿素酶利用實驗。

（3）細菌的藥物敏感試驗。參考相關文獻，將分離的菌株進行藥敏試驗，觀察抑菌環情況。共檢測17種藥物：頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢唑啉、頭孢西丁、奧復星、頭孢哌酮、先鋒霉素、慶大霉素、頭孢拉定、頭孢呋辛、克林霉素、鏈霉素、阿米卡星、先鋒霉素V、氨芐西林、環丙沙星、卡那霉素。以抑菌圈直徑大小作為藥物敏感性高低的判定標準，具體情況為：抑菌圈直徑大于15毫米者為高敏藥物；直徑為10～15毫米者為中敏；藥物直徑為10毫米以下者為耐藥。

二、結果與分析

1.細菌分離培養。分離菌菌落在麥康凱瓊脂培養基上呈紅色圓形、邊緣整齊、表面光滑、濕潤、隆起。革蘭氏染色鏡檢，分離菌為革蘭氏陰性中等大小的桿菌，菌體兩端鈍圓，單個存在。

2.生化試驗。分離菌能利用葡萄糖、麥芽糖、乳糖，產酸產氣；吲哚試驗為陽性；MR試驗為陽性，VP試驗為陰性。結果表明，該分離菌株為大腸桿菌。

3.藥敏試驗結果。藥敏試驗結果顯示，該分離菌株只對頭孢曲松、頭孢西丁、頭孢哌酮、先鋒霉素V、環丙沙星5種藥物高度敏感，對頭孢他啶、奧復星、先鋒霉素、氨芐西林、阿米卡星5種藥物中度敏感，而對頭孢唑啉、慶大霉素、頭孢拉定、頭孢呋辛、卡那霉素、克林霉素、鏈霉素7種藥物有耐藥性（見表1）。

表1 藥敏試驗結果

三、討論

細菌的分離培養和生化試驗結果表明，該群鴿所患疾病為大腸桿菌病。針對該場發病情況，建議采取對發病鴿舍、用具、環境進行徹底消毒，病死雛鴿進行無害化處理，加強飼養管理，降低飼養密度等措施，并根據藥敏試驗結果選用頭孢曲松進行治療，用藥4天后電話回訪養殖戶，已無鴿只死亡，病情也得到有效控制。

大腸桿菌在環境中廣泛存在，繼發感染以及環境不良等均可誘發該病。該病主要侵害幼齡鴿群，且發病后很難繼續存活，病死鴿又造成該病的繼續傳播，所以對養鴿業造成極大的威脅，成為養鴿業中日益突出的問題。加強飼養管理，保持鴿舍衛生清潔，做好消毒工作，合理通風，安排合理的飼養密度，及時更換巢窩，供應優質飼料和合格的飲用水，采取措施減少與降低浮塵，可有效預防大腸桿菌病。由于鴿大腸桿菌耐藥性的廣泛存在，因此在鴿大腸桿菌病的臨床治療中，通過藥敏試驗篩選出高敏藥物對發病鴿進行治療，避免耐藥性的產生具有較大的意義。