王旭 李冬梅 馬可佳 江云飛
甲型肝炎病毒的微生物學檢驗分析
王旭1李冬梅2馬可佳1江云飛1
目的 探討我院甲型肝炎病毒的微生物檢驗現狀,為預防甲型肝炎提供參考數據及臨床診斷提供參考。方法 選取2015年2~8月期間,在我院接受體檢的受檢人員50例,對其檢驗結果進行回顧性分析。結果 50例受檢人群中抗HAV-IgM陽性34例,抗HAV-IgM陰性16例。結論 甲型肝炎(以下簡稱甲肝)是由甲型肝炎病毒引起的,其發病人群以兒童及青少年為主。甲肝發病的高峰期是冬春季節,病程呈自限性,甲肝極少引發急性重型肝炎,伴隨著全世界滅活疫苗的使用,甲肝的流行已經得到十分有效的控制。
甲型肝炎病毒;微生物學檢驗;檢驗結果
甲型肝炎病毒(HAV)可引起甲型肝炎,其是甲型肝炎的病原體[1]。甲型肝炎病毒是由Feinslone在1973年首次發現的,其使用免疫電鏡技術在肝炎急性期患者糞便中發現HAV ,并在1979年運用細胞培養成功得到單獨的甲型肝炎病毒[2]。甲型肝炎病毒歸屬于小核糖核酸病毒科,曾被稱為腸道病毒72型,現屬于肝病毒屬。本研究對甲型肝炎病毒生物學檢驗進行分析,現將結果報道如下。
1.1一般資料
選取2015年2~8月,在我院接受體檢的受檢人員50例,其中男25例,女25例,年齡15~75歲,平均年齡(32.24±8.97)歲,所有受檢人員均抽取外周靜脈血5 ml進行檢驗。
1.2檢驗方法
主要采用微生物學檢驗法,一般情況下不進行病原學的分離檢查,微生物檢查的主要目的為測定病毒抗原及抗體。甲型肝炎病毒感染在早期時可檢測出樣本血清中抗-HAV IgM,其具有出現早、消失快的特點,是HAV新近感染的重要特征。對于甲肝疫苗的接種者,在疫苗注射前后需要檢測中和型抗-HAV[3]。檢測方法為,用能夠在猴胚腎細胞中引起感染的甲型肝炎病毒株來進行接種,用HAV抗體來抑制病變的發生來測定中和抗體效果。
50例受檢人群,抗HAV-IgM陽性34例,占68%,抗HAVIgM陰性16例,占32%。
甲肝患者及亞臨床感染者是甲型肝炎病毒的主要傳染源,在通常情況下甲型肝炎病毒伴隨患者的糞便排出體外。HAV的污染渠道主要是攜帶病毒的糞便通過污染水源、食物、食具、海產品等來進行傳播,進而造成病毒的散發性流行[6]。甲型肝炎病毒可以在被污染的水源、食物、海產品中存活數月或更久時間。在甲型肝炎發病后的第二周開始,伴隨著腸道中的抗-HAV IgA以及血清中抗-HAV IgM/IgG的產生,患者的糞便中將不會再排出病毒。甲型肝炎病毒的感染均為急性感染,目前尚未發現持續性的感染病例[7]。甲型肝炎病毒主要經過口腔侵入人體,首先在唾液腺內或口咽部進行增殖,然后在局部淋巴結與腸黏膜中大量的增殖,而后入侵到血液中形成病毒血癥,最后侵犯肝臟。因為甲型肝炎病毒在細胞培養過程中的增殖速度緩慢,不會直接造成顯著的細胞損害,所以其致病的機制除病毒的直接作用以外,引起肝組織損害中的免疫應答也起到一定的作用。無論是甲型肝炎的隱性感染還是顯性感染,人體都可產生抗-HAV IgA及抗-HAV IgM/ IgG,抗-HAV IgA多出現在急性期與恢復早期;抗-HAV IgM/IgG多出現在恢復后期,抗體可以在如人體內維持存在多年,使機體對病毒的再次感染具有一定的免疫力[8]。因為水源經口傳染及糞便污染飲食是甲型肝炎病毒的主要傳播方式,因此預防甲肝的主要方式是加強飲食業衛生管理、衛生宣教工作及水源的保護。甲型肝炎患者食具、衣物及床單要認真消毒,排泄物要妥善的處理。目前的研究表明,肌肉注射丙種球蛋白可以對甲型肝炎有一定的被動免疫預防作用;在甲型肝炎的潛伏期時,肌肉注射丙種球蛋白可以減輕臨床癥狀。
[1]唐明會,方翠艷,李秀芹,等. 甲型病毒性肝炎的診療[J]. 世界最新醫學信息文摘·電子版,2013,13(22):119-120.
[2]張磊,魯淑婷,李玉龍,等. 甲型肝炎病毒和戊型肝炎病毒雙重熒光定量PCR方法的建立及應用[J]. 中國實驗診斷學,2015,19(12):2063-2066.
[3]高加梅,宋俐霏,李軍,等. 甲型肝炎病毒單克隆抗體的篩選與初步應用[J]. 中國生物制品學雜志,2011,24(9):1081-1083.
[4]楊璐,楊紅英. 甲型肝炎的實驗室診斷檢測方法研究進展[J]. 國際檢驗醫學雜志,2014,35(7):885-887.
[5]龍潤鄉,楊蓉,李華,等. 兩種甲型肝炎病毒抗原快速檢測方法的建立[J]. 微生物學免疫學進展,2013,41(1):39-41.
[6]徐德順,朱曉娟,陳莉萍,等. 輪狀病毒星狀病毒和甲型肝炎病毒的單管多重熒光定量RT-PCR檢測方法研究[J]. 浙江預防醫學,2015,27(4):358-361.
[7]夏青娟,徐艷玲,李樹林,等. 細胞培養/鏈特異性RT-PCR方法檢測甲型肝炎減毒活疫苗病毒滴度[J]. 中國生物制品學雜志,2015,28(4):398-401.
[8]吳芳南,臧小燕. 浙江省長興縣健康體檢者甲型肝炎IGM抗體、戊型肝炎IGM抗體和ALT的檢測結果分析[J]. 中國基層醫藥,2013,20(16):2515-2516.
Microbiological Examination of Hepatitis A Virus
WANG Xu1LI Dongmei2MA Kejia1JIANG Yunfei11Clinical Laboratory,Prevention and Control Center of Heilongjiang Provincial Land Reclamation Bureau of Disease, Harbin Heilongjiang 150090, China,2School of Municipal and Environmental Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin Heilongjiang 150090, China
Objective To investigate the present situation of hepatitis A virus in our hospital, and provide reference data for the prevention of hepatitis A and provide reference for clinical diagnosis. Methods From February 2015 to August, 50 patients
physical examination in our hospital, and the results were analyzed retrospectively. Results 34 cases of anti HAV-IgM positive, 16 cases of anti HAV-IgM negative. Conclusion Hepatitis A (hereinafter referred to as hepatitis) caused by hepatitis A virus. The incidence of people main were children and adolescents. The peak of the incidence of hepatitis A is in winter and spring, and the course is selflimiting, hepatitis a rarely cause acute severe hepatitis, with the use of live vaccine inactivated whole world, the epidemic of hepatitis A has been very effective control.
Hepatitis A virus, Microbiological examination, Test results
R186
A
1674-9308(2016)14-0029-02
10.3969/j.issn.1674-9308.2016.14.017
1黑龍江省農墾總局疾病預防控制中心檢驗科,黑龍江 哈爾濱 150090;2哈爾濱工業大學市政環境工程學院,黑龍江 哈爾濱150090
1.3生物學性狀
1.3.1形態與結構甲型肝炎病毒為直徑約27 nm的球形顆粒,其大小、形態與腸道病毒相仿,衣殼無包膜呈立體對稱。HAV耐熱性遠高于腸道病毒,在60℃狀態下可以保持1 h不被滅活,并對酸處理、乙醚有一定的抵抗力[4]。
1.3.2培養特性甲型肝炎病毒的易感動物群體,在經過靜脈注射或口腔接觸后可使易感動物發生肝炎。甲型肝炎病毒在潛伏期及急性期的早期可以隨糞便排出,恢復期的血清中能夠檢驗出甲型肝炎病毒的抗體。甲型肝炎病毒可以在包括傳代恒河猴胚腎細胞、原代狨猴肝細胞、人胚肺二倍體細胞、肝癌細胞株等多種的細胞內增殖。HAV病毒增殖是非常緩慢的,白細胞的釋放也是十分緩慢的,其不會引起細胞的裂解[5]。因此,甲型肝炎病毒的分離通常需要數周或更久的時間,并且較難大量的獲取病毒。