混合生物物證DNA檢驗鑒定2例

馬曉穎 伊 鵬 穆勇民

1.山東省臨沂市公安局羅莊分局刑警大隊，山東 臨沂 276017；2.山東省臨沂市公安局刑科所，山東 臨沂 276000

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混合生物物證DNA檢驗鑒定2例

馬曉穎1伊 鵬2穆勇民1

1.山東省臨沂市公安局羅莊分局刑警大隊，山東 臨沂 276017；2.山東省臨沂市公安局刑科所，山東 臨沂 276000

隨著社會經濟發展、科學技術手段的發達，越來越多的刑事案件加入對混合物物證中DNA檢驗定檢的使用。醫務人員通過受害人身上可以混合物物證的提取，通過專業的技術手段進行深入，主要通過生物檢材的提取、檢驗和分析三和步驟，取得物證的DNA分型，并最終確定犯罪嫌疑人。本文選取近年來發生的強奸案件，分別介紹生物物證DNA檢驗鑒定的案件中發揮的作用，和混合生物物證檢材的處理以及應用過程中的相關注意事項，細述混合生物物證DNA檢驗鑒定在案件中的使用及最終結果，從技術的角度闡述其在此類案件中的重要性。

強奸案；混合生物無證；提取；檢驗

公安案件中，現場物證常出現兩個以上個體的樣本源，即混合生物物證。混合物證會出現在任何案件中，并以強奸案和碎尸案居多。通常，警務人員在案發現場會尋到可疑的皮屑或體液證物，而這類證物又往往來源于兩個以上個體身上。因此，混合物物證中DNA的判定技術對于案件偵破至關重要。對混合生物物證進行DNA檢測鑒定，通過生物樣本的提取、檢驗和進一步分析，將促進案件的有效偵破，是當前此類案件中使用較廣泛的技術手法之一。

一、案件資料

(一)案件

2014年5月8日，XX城區派出所接到報案，一名環衛工人在西郊的一片廢棄廠房發現一名死尸。公安人員到達案發現場發現，這是一名女性尸體，年齡在20-25歲之間，尸體衣物凌亂，被遺棄的背包中未發現其他重要資料。經鑒定，死者死因為頸部強力扼壓致使的機械性窒息死亡。現場有死者與嫌疑人搏斗的痕跡，且現場很像強奸殺人案。法醫的進一步檢測發現，死者陰道外側有殘留精液，且指甲內檢測出不屬于死者的皮屑物和血跡。死者指甲內提取的生物物證需要進行多類型體液的確證試驗，因為血跡與皮屑尚不能確定屬于個體。皮屑物與血液經進一步檢測，結果顯示部分屬于死者本人，部分與精液和血液屬于同一男性。檢驗結果確定后，公安人員立即進行下一步嫌疑人搜查活動，并于案發后兩天抓捕犯罪嫌疑人。在對死者身上混合物物證的分析與嫌疑人進行對比，通過相同的DNA分型最終確定罪犯。

(二)DNA檢驗

兩起案件均出現混合物物證：一是死者指甲內部殘留皮屑物和血跡，且陰道提取出男性精液。DNA的提取主要采用棉簽類易于沾取或附著證物且不會致使其遭到破壞的工具進行。在證物提取過將其放置在密封的材料袋或材料盒中，并禁止不關人等的隨意觸碰。證物帶至研究所后小心取出，將棉簽沾取物證的部分棉纖維取出，加入200μL的骨骼孵育液、15μL的蛋白酶K在56度的環境下進行孵育。隨后，用硅珠法進行DNA的提取，提取模板濃縮成10μl的DNA溶液。接下來，擴增和電泳檢測方面，國內常規方式是通過Identifile試劑盒，來擴增各提取模板的DNA。隨后，用3130基因分析儀進行擴增物的檢測。當擴增物的檢測結果出現時，將檢測結果放置到GeneMspperID V3.2軟件中，進行分型結果的比對。

二、討論

上述案件中，提取的死者指甲內混合血液、皮脂屑這類生物檢材，不能簡單將其是為死者個體，相關檢案人員必須對存在可以性的載體進行取樣，盡可能將死者的貼身衣服、指甲附著皮屑、用過的衛生紙團等容易沾染罪犯精斑或皮脂的載體進行逐一排查，并進行多類型體液確證試驗。另外，DNA工作者在樣本提取前應根據實際情況設計實驗方案。強奸案件中，當嫌疑人射精量偏少或本身為少精患者時，就會出現女子上皮細胞遠遠超過男子精子細胞的狀態，此時應采用差異裂解法且兩步均涂片鏡檢，再經精子數量與上皮細胞數量的對比，來選取合適的檢材用量、酶用量以及消化時間和需要洗滌的次數。其中，熱循環參數和模板DNA量等因素都將影響PCR反映的結果。另外，混合生物物證的結果擴增還應重視每一個個體DNA在檢材中的實際比例，當混合DNA分型男性成分偏多時應進一步稀釋、濃縮DNA提取液，及成梯度擴增等方法。

混合DNA結果分析：第一，仔細觀察案發現場，并積極詢問受害者或知情者，通過現場偵查和信息提示，推斷案件中作案人數；第二，混合DNA的提取時應盡可能純潔，排除污染物。檢測時更要注意污染物、牽涉鋒、Stutter鋒、非特異性擴增或染色體畸變等特殊情況的發生。第三，判斷樣本是否為混合物物證，通過等位基因的基因數目較多的基因座來判斷，原理是個體間的重復率偏小。一般來說，兩個體混合斑圖譜中，Amelegen基因座中X、Y等位基因鋒面積表現出不同的平衡關系和峰值高低，能夠提示樣本的性別成分。另外，單一男性DNA分型結果與多部位提取、梯度擴增獲取的混合DNA分型對比分析，能夠進行另一DNA分型結果的獲取。

當前，越來越多的刑事案件加入對混合物物證中DNA檢驗定檢的使用。要求相關法醫人員在受害者身上，仔細尋找相關易于檢測且易于解釋單一檢材的樣本。因此，混合物物證DNA檢驗鑒定的發展任重而道遠，需要相關人員進一步提高認識并加以重視。硅珠法提取DNA，能夠有效地去除PCR，從而得到更加純凈的樣本信息。純凈樣本后通過Microcon100濃縮提高模板的質量水平，確保擦拭物的混合物物證獲取清晰的DNA分型譜帶。基礎研究上，醫務人員應進行深入探析，不斷探索新型區分不同個體的排他性片段，以研發更新穎的選擇性提取試劑盒。當前，我國進行單細胞DNA檢測所使用的技術，在之前的面別混合檢材領域取得不小的進步，并即將在不遠的將來實現輕松進行混合生物物證DNA檢驗的鑒定。

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[2]谷建立，楊軍，曹和招.碎尸案中混合生物物證的DNA檢驗1例[J].中國法醫學雜志，2013，01：86-87.

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[4]申琴，楊紅旗，袁朝暉，胡國瑜.DNA鑒定技術在法醫物證學中的現狀和展望[J].生物技術世界，2015，10：252-253.

D

A

馬曉穎(1974-)，女，回族，山東青州人，四川大學華西醫學院本科，山東省臨沂市公安局羅莊分局刑警大隊，法醫師，研究方向：物證檢驗；伊鵬，男，漢族，山東蒙陰人，山東省臨沂市公安局刑科所；穆勇民，男，漢族，山東德州人，山東省臨沂市公安局羅莊分局刑警大隊。