速率法定量檢測臍帶血葡萄糖-6-磷酸脫氫酶結果分析*

基金項目:貴州省黔西南州重點科研項目(2011-34)。

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速率法定量檢測臍帶血葡萄糖-6-磷酸脫氫酶結果分析*

*基金項目:貴州省黔西南州重點科研項目(2011-34)。

盧春晟1，吳海嬰2，馮寧2△，左方財2，任勇2，夏敏2，黃春燕3

(貴州省興義市人民醫院：1.輸血科；2.醫學檢驗科，貴州興義 562400；3.黔西南州人民醫院婦科，貴州興義 562400)

摘要:目的通過臍帶血葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)定量檢測，分析G6PD缺乏的發病情況及對產婦靜脈血G6PD進行追蹤調查。方法應用廣州科方生物技術有限公司生產的G6PD定量檢測試劑盒對253例健康產婦臍帶血進行檢測。結果253例臍帶血定量檢測中，檢出G6PD缺乏癥34例，陽性率為13.44%，男性新生兒23例，占9.09%，女性新生兒11例，占4.35%，男女酶活性比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論定量檢測結果分析直觀、簡便、快捷、價格低廉，利于普遍篩查及早期診斷G6PD缺乏癥。

關鍵詞:臍帶血；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶；速率法；定量檢測

紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)缺乏也稱蠶豆病，是華南、西南地區常見遺傳病[1]，常因為某種誘因(藥物、感染、食物如蠶豆等)情況發生溶血、黃疸、貧血及新生兒高膽紅素血癥，嚴重的可導致核黃疸，醫療技術的發展對疾病的診療預防起著重要的作用。本研究收集本院的臍帶血進行G6PD定量測定，現將檢測結果匯報如下。

1材料與方法

1.1標本來源2011年1月至2014年12月本院正常生產的產婦臍帶血34例，產婦年齡20～38歲，無任何傳染性疾病。

1.2標本的采集及保存新生兒出生后10 min內取臍血2 mL，置于肝素抗凝管中30 min內送檢。

1.3儀器與試劑日立7180生化分析儀，試劑由廣州科方生物技術有限公司提供。

1.4方法抗凝血以4 000 r/min離心5 min，避開血漿層,用加樣器準確吸取壓積紅細胞20 μL，加入到1 mL溶解液中溶解，待紅細胞完全溶解后(約1～2 min)上機測定，待測時間不得超過25 min，所有參數按試劑說明書設定操作。

1.5結果判定G6PD>1 300 U/L為正常，60～1 300 U/L為中度缺乏，小于60 U/L為重度缺乏。

1.6統計學處理采用SPSS 13.0進行率的統計分析。計數資料采用χ2檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2結果

在253例臍血G6PD定量檢測中，檢出G6PD缺乏癥34例，陽性率為13.44%，男新生兒23例，占總例數9.09%，女新生兒11例，占例數4.35%。結果見表1。中度與重度缺乏男、女之間率的比較，二者差異具有統計學意義(P<0.05)。

表1　　253例產婦臍血G6PD定量檢測結果

*：P<0.05，與女性組比較。

34例臍帶血G6PD缺乏與產婦靜脈血G6PD檢測結果一致性檢驗發現，從34例臍帶血G6PD缺乏標本中，與產婦靜脈血G6PD缺乏符合數只有11例，符合率為32.35%，(95%CI為70.89%，94.83%)。

3討論

G6PD缺乏產生的機制，主要是紅細胞G6PD催化反應生成的還原型輔酶Ⅱ(NADPH)是谷胱甘肽還原酶的輔酶，還原型谷胱甘肽(GSH)是保持血紅蛋白穩定性及紅細胞膜完整性的必要條件。細胞G6PD缺乏者，在服用某些藥物(如抗瘧藥、砜類藥、伯氨喹啉、磺胺藥等)及信用蠶豆后，代謝產生的自由基，或與氧合血紅蛋白作用形成H2O2，使GSH氧化形成氧化型谷胱甘肽(GSSG)。由于GSH降低，血紅蛋白的巰基失去GSH的保護，被氧化形成Heinz小體。紅細胞失去巰基保護而功能受損，導致溶血。

本次對臍帶血G6PD定量檢測，陽性率為13.44%(34/253)，且男性多于女性，性別間差異有統計學意義(P<0.05)。G6PD缺乏癥目前認為是瘧疾自然選擇的結果[2]，在中國，同一民族不同地區基因頻率有明顯差別，同一地區不同民族相差不大[3]，與此次研究結果一致，本地區各民族間臍血G6PD缺乏率無顯著差異，這可能與人口流動性大的原因相關。G6PD基因位于X染色體長臂2區8帶(Xq2.8)，基因全長20 114 bp，由13個外顯子和12個內含子組成，編碼區長1 548 bp，編碼515個氨基酸。G6PD缺乏癥呈X連鎖不完全顯性遺傳，男性因只有一條X染色體，故男性半合子的臨床表現基本為顯著酶缺乏，一般G6PD定量法即可較準確區分。

使用臍帶血G6PD缺乏與靜脈血G6PD定量檢測一致性檢驗中，二者一致性較差，這與染色體遺傳有很大關系。新生兒男性G6PD缺乏比女性例數多，由于G6PD缺乏癥是一種不完全顯性伴性遺傳病，基因位于X染色體上，男性只有一條X染色體，一旦這唯一的染色體缺失G6PD基因，則表現為G6PD顯著缺乏。而女性有兩條X染色體，如果僅有1條X染色體缺失G6PD基因，則為雜合子，女性雜合子可表現為酶活性正常與G6PD缺乏之間。只有兩條X染色體均缺失G6PD基因，才表現為顯著缺乏[4]。所以男孩的發病率明顯高于女孩,女性未檢出重度缺乏者。這對G6PD缺乏癥的早期診斷提供更好的依據。

G6PD缺乏導致的新生兒黃疸可造成核黃疸死亡或智力低下，對提高中國人口素質影響巨大，由于G6PD缺乏癥沒有根治的方法，開展孕婦產前以及新生兒疾病的篩查，以及早期預防和治療措施，具有重要的現實意義。臍帶血可代替新生兒血做一些早期疾病篩查，其操作取血簡單，家屬也易于接受[4]。

速率法是在全自動生化分析儀上測定G6PD活性，與傳統方法相比，具有反應量微、試劑用量少、樣本量小、準確靈敏、低成本、易于實現自動化和標準化，在10 min左右出結果，適用大規模的篩查[6-7]。可以實現早期G6PD缺乏有效干預及控制。

參考文獻

[1]林朝明．新生兒葡萄糖6磷酸脫氫酶缺陷早期診斷的研究[J]．海南醫學，2005，16(7)：159-160．

[2]Ruwende C,Hill A.Gluscose-6-phosphate dehydrogenase deficiency and malaria[J].J Mol Med,1998,76(8):581-588.

[3]杜傳書．我國葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥研究40年的回顧和展望[J]．中華血液學雜志，2000，21(4)：5-6．

[4]黃昌海．佛山地區孕期夫婦6-磷酸葡萄糖脫氫酶檢測[J]．檢驗醫學與臨床，2013，10(7)：886-887．

[5]黎海瀾，焦偉，莫柱寧，等．臍帶血替代外周血用于新生兒血型和直接抗球蛋白試驗的效果觀察[J]．重慶醫學，2011，20(20)：2025-2026．

[6]梁棟偉，區麗群．生化儀直接測定G6PD活性的臨床應用[J]．檢驗醫學與臨床，2007，4(8)：709-710．

[7]黃倩婷，呂偉標．全自動生化分析儀檢測G6PD活性在孕檢中的意義[J]．吉林醫學，2011，32(26)：5433-5434．

·臨床研究·

收稿日期：(2015-09-18)

文獻標識碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.043A

文章編號：1673-4130(2015)24-3612-02

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