血清制備的影響因素

文│王榮華（河南省博愛縣動物疫病預防控制中心）

血清制備的影響因素

文│王榮華（河南省博愛縣動物疫病預防控制中心）

一、血清異常情況

1.種類。血清樣品異常有多種情況：血清有析出，但呈膠凍樣；血清有析出，但伴隨溶血現象；無血清析出；血清中有沉淀。

2.原因。

（1）血清呈膠凍樣的原因。畜禽在剛采食后不久進行采血；采血后靜置時間太短即進行離心；采血動物營養過剩，形成脂血。

（2）出現溶血的原因。采血部位消毒液未干即開始采血；采血用注射器未干燥，內壁濕潤；采血后未經靜置即運送，送檢時樣品發生劇烈震動；采血后由注射器轉入離心管時，未取下針頭即快速轉移血液。

（3）無血清析出的原因。全血量過少；采血時注射器活塞沒有往后拉留出空間致血清無法析出。

（4）血清中有沉淀的原因。血清置37℃下時間太長；血清由室溫轉入-20℃或由-20℃轉入室溫時，未經過冷藏并搖勻處理；血清在高于60℃環境下時，球蛋白和白蛋白出現凝結。

二、影響因素

1.采血環節的影響。

在股市中做投資，無需清楚每只股票的走勢表現，只要能看清小部分個股的走勢就足夠了。選出自己能看清的目標盯著這些品種，從中尋找機會就足夠了。

（1）采血部位。豬采血部位可選擇前腔靜脈和耳靜脈。但大批量采血時宜選擇前腔靜脈。

禽采血部位可選擇翅膀內側腋下靜脈和心臟。一般選擇翅膀內側腋下靜脈采血。在對淘汰禽檢測或技能競賽時多選擇心臟采血法。

牛采血部位可選擇頸靜脈和尾根靜脈。奶牛等宜選用尾根靜脈采血。

羊采血部位在頸側靜脈。

（2）采血針頭。豬前腔靜脈采血時因豬大小不同選用不同的針頭，體重≤10千克的乳豬宜用9×20毫米針頭，10千克＜體重≤30千克的保育豬宜用9×25毫米針頭，體重>30千克的育肥豬宜用12×38毫米針頭，對種公母豬采血宜用16×50毫米針頭。豬耳靜脈采血宜用7號針頭。其他家畜家禽宜用7號針頭。

（3）采血時間。畜禽禁食8小時（空腹）后進行采血，日常多選擇在早上或午后采血。

（4）采血編號。對血樣進行編號時，多用阿拉伯數字編寫。為了避免不同環節實驗人員誤讀，可在編號下統一劃橫線，如16，若反過來讀作91，加橫線后為16，則不易混淆。

（5）采血程序。采血后用一次性注射器保存和運送血液樣品，先在一次性注射器上給樣品編號，采血后把注射器活塞往后拉，預留長度至少為采血量的2倍，再加針頭帽，最后針頭朝上與地面成30～45度斜放，在室溫下靜置2～4小時（避免暴曬），待血清自然析出。

采血后也可轉注離心管送樣，先在離心管上給樣品編號，然后把注射器針頭取下，沿離心管壁將全血緩慢注入，最后蓋緊離心管管帽。

（6）采血量。全血不少于5毫升。析出血清量，畜不少于1毫升，禽不少于0.5～1毫升。

2.送樣環節的影響。

（1）全血運輸。運送全血樣品時一定要輕拿輕放，不要劇烈震動。使用血液樣品專用運輸箱運送更好。

（2）運輸時間。能在6小時內送達實驗室的，只需冷藏后運輸；不能在6小時內送達的，則要做冷凍處理后，再冷藏運輸。

3.實驗室環節的影響。

（1）血清析出良好。接收的樣品若血清析出良好，可直接將血清轉入離心管，按實驗室規定程序編號檢測。

（2）血清析出較差。接收的樣品若血清析出較差或室外氣溫過低，可放入37℃恒溫箱中1小時或25～37℃水浴鍋中1小時作預處理，再用離心機1500～2000轉/分鐘作5分鐘離心。

（3）實驗室適宜環境。實驗室溫度應在23℃±2℃，相對濕度40%～70%。

（4）不同材質容器影響。玻璃試管血清析出效果優于塑料離心管。

（5）血清在實驗室的保存。若短時間保存， 4℃冷藏即可，時間最多不能超過1個月。若長時間保存, 可在-20℃冷凍保存，忌反復凍融。

點評：首先制定完整的可操作性強的血樣采集計劃，其次根據檢測項目確定采集對象、部位及器械等內容，嚴格按照計劃組織實施血樣采集，最后及時運送血樣，規范處理，科學保存。按此方法進行實驗前采血，能制備出高質量、合規格的血清樣品，值得學習借鑒。